| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 引言 | 第8-12页 |
| ·神经元的极性发育 | 第8-9页 |
| ·Myosin X 与神经元极性发育的关系 | 第9-10页 |
| ·微管的稳定性对神经元极性发育的影响 | 第10页 |
| ·在神经元极性发育过程中,调节微管稳定的信号通路的研究 | 第10-12页 |
| 材料与方法 | 第12-19页 |
| ·实验材料和仪器 | 第12页 |
| ·实验材料 | 第12页 |
| ·实验仪器 | 第12页 |
| ·主要试剂 | 第12页 |
| ·MyoX Headless 和 MyoX Fulllength 基因沉默载体的构建 | 第12-16页 |
| ·设计并合成单链 oligo | 第12-13页 |
| ·退火,形成双链的 DNAoligo | 第13页 |
| ·Psuper-c1 载体的线性化及线性载体的胶回收 | 第13页 |
| ·AxyPrep DNA 凝胶回收 | 第13-14页 |
| ·连接反应 | 第14页 |
| ·大肠杆菌 DH5α转化 | 第14页 |
| ·AxyPrep 质粒 DNA 的小量提取 | 第14-15页 |
| ·沉默载体的 PCR 鉴定 | 第15页 |
| ·无内毒素质粒的大量提取 | 第15-16页 |
| ·荧光素酶双报告系统检测沉默载体的沉默效率 | 第16页 |
| ·海马神经元的原代培养 | 第16-17页 |
| ·准备 | 第16-17页 |
| ·原代神经元培养 | 第17页 |
| ·原代神经元的电转染 | 第17页 |
| ·神经元免疫荧光染色 | 第17-18页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第18-19页 |
| 结果与分析 | 第19-25页 |
| ·Myo X调节微管的稳定性分布 | 第19-20页 |
| ·MyoX-Headless siRNA 和 MyoX-Fulllength siRNA 的构建 | 第20-22页 |
| ·MyoX在 PIP3-AKT-GSK3β信号途径下游调节微管的稳定性 | 第22-23页 |
| ·MyoⅩ调节 pGSK3β在轴突末端的聚集状态,而不改变 GSK3β在各个突起上的均匀分布现象 | 第23-25页 |
| 讨论 | 第25-26页 |
| 结论 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-30页 |
| Construction information | 第30-31页 |
| Sequences in the vector | 第31页 |
| Vector map | 第31-33页 |
| 致谢 | 第33页 |