| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-15页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第8页 |
| ·国内外研究现状 | 第8-14页 |
| ·哈茨木霉 | 第8-10页 |
| ·RNAi 技术 | 第10-11页 |
| ·mapk 基因 | 第11-13页 |
| ·rac 基因 | 第13-14页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第14-15页 |
| ·课题来源 | 第14页 |
| ·主要研究内容 | 第14-15页 |
| 第2章 材料与方法 | 第15-29页 |
| ·实验材料 | 第15-18页 |
| ·菌株和质粒 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·酶与试剂 | 第16-17页 |
| ·常用储液 | 第17-18页 |
| ·仪器设备 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-29页 |
| ·哈茨木霉mapk 和rac 基因的克隆 | 第18-19页 |
| ·重组沉默质粒pCambla1301-mapk 和pCambla1301-rac 的构建 | 第19-23页 |
| ·农杆菌转化 | 第23-24页 |
| ·根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化 | 第24-26页 |
| ·哈茨木霉转化子沉默效率 | 第26-27页 |
| ·哈茨木霉转化子平皿拮抗病原真菌能力研究 | 第27页 |
| ·哈茨木霉转化子的渗透敏感性检测 | 第27页 |
| ·哈茨木霉转化子的酶活测定 | 第27-29页 |
| 第3章 载体构建及农杆菌介导的转化 | 第29-41页 |
| ·哈茨木霉mapk 和rac 基因的克隆 | 第29-31页 |
| ·mapk 的cDNA 序列分析 | 第29-30页 |
| ·rac 的cDNA 序列分析 | 第30-31页 |
| ·沉默载体构建 | 第31-36页 |
| ·中间载体pSilent-mapk-r 和pSilent-rac-r 的构建 | 第31页 |
| ·中间载体pSilent-mapk-r 和pSilent-rac-r 的鉴定 | 第31-33页 |
| ·中间载体pSilent-mapk 和pSilent-rac 的鉴定 | 第33-34页 |
| ·沉默载体pCambla1301-mapk/pCambla1301-rac 的鉴定 | 第34-35页 |
| ·沉默载体载入农杆菌AGL-1 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导的哈茨木霉遗传转化 | 第36-37页 |
| ·半定量RT-PCR 检测转化子的基因沉默效果 | 第37-38页 |
| ·mapk、rac 和 18S 基因的 PCR 扩增 | 第37页 |
| ·基因相对表达量的统计 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 第4章 转化子酶活及抗病原能力研究 | 第41-56页 |
| ·哈茨木霉转化子抗病原能力研究 | 第41-49页 |
| ·哈茨木霉与立枯丝核菌平皿对峙培养 | 第41-44页 |
| ·哈茨木霉与叶枯病菌平皿对峙培养 | 第44-46页 |
| ·哈茨木霉与尖孢镰刀菌平皿对峙培养 | 第46-49页 |
| ·哈茨木霉水解酶酶活测定 | 第49-52页 |
| ·CMC 酶活 | 第49-51页 |
| ·β-葡萄糖苷酶酶活 | 第51页 |
| ·β-l,3-葡聚糖酶酶活 | 第51-52页 |
| ·渗透敏感性检测 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
