| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-14页 |
| 英文缩写注解 | 第14-16页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 技术路线 | 第19-20页 |
| 第一部分 CXCR4在肝癌细胞迁移中的作用 | 第20-37页 |
| 1.材料 | 第20-23页 |
| ·细胞株 | 第20页 |
| ·临床标本 | 第20页 |
| ·体液标本 | 第20页 |
| ·PCR引物 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·细胞培养试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-23页 |
| 2.实验方法 | 第23-28页 |
| ·培养细胞总RNA提取 | 第23页 |
| ·组织标本总RNA提取 | 第23页 |
| ·蛋白质提取 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·ELISA | 第25-26页 |
| ·趋化实验 | 第26-27页 |
| ·Western blot | 第27页 |
| ·灰度扫描与数据处理 | 第27页 |
| ·统计方法 | 第27-28页 |
| 3.结果 | 第28-35页 |
| ·提取总RNA电泳结果 | 第28页 |
| ·循环曲线 | 第28-29页 |
| ·CXCR4和CXCL12mRNA水平的表达 | 第29-32页 |
| ·CXCR4蛋白的表达 | 第32页 |
| ·肝癌患者腹水中CXCL12的含量 | 第32-33页 |
| ·重组CXCL12、肝癌癌性腹水诱导肝癌细胞及血管内皮细胞的移动 | 第33-35页 |
| 4.讨论 | 第35-37页 |
| 第二部分 转染人CXCR4基因的动物实验研究 | 第37-59页 |
| 1.材料 | 第37-41页 |
| ·细胞株 | 第37页 |
| ·实验动物 | 第37页 |
| ·PCR引物 | 第37-38页 |
| ·载体 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39-40页 |
| ·细胞培养试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.方法 | 第41-46页 |
| ·RT-PCR、PCR扩增 | 第41页 |
| ·DNA的凝胶回收 | 第41-42页 |
| ·酶切反应 | 第42-43页 |
| ·连接反应 | 第43页 |
| ·重组体转化大肠杆菌DH5 α及其鉴定 | 第43-44页 |
| ·质粒的大量制备 | 第44页 |
| ·重组体的转染及鉴定 | 第44-45页 |
| ·趋化实验 | 第45页 |
| ·裸鼠成瘤实验 | 第45页 |
| ·CXCR4和CXCL12的检测 | 第45-46页 |
| 3.结果 | 第46-56页 |
| ·CXCR4反义重组质粒的构建和鉴定 | 第46-49页 |
| ·稳定转染细胞株的筛选和鉴定 | 第49-50页 |
| ·CXCL12诱导肝癌细胞的移动 | 第50-52页 |
| ·调控CXCR4表达影响了肝癌细胞的体内转移能力 | 第52-56页 |
| 4.讨论 | 第56-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-71页 |
| 综述 | 第71-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第91-92页 |