| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-23页 |
| ·哈茨木霉研究现状及意义 | 第10-12页 |
| ·木霉菌的特点 | 第10页 |
| ·哈茨木霉在生物防治方面的重要性 | 第10-11页 |
| ·逆境对哈茨木霉的危害 | 第11-12页 |
| ·SOD与哈茨木霉的抗逆性 | 第12页 |
| ·国内外SOD的研究现状及应用前景 | 第12-16页 |
| ·SOD目前的研究状况 | 第12-14页 |
| ·SOD的应用前景 | 第14-16页 |
| ·丝状真菌转基因研究进展 | 第16-21页 |
| ·丝状真菌传统遗传转化方法概述 | 第16-17页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化系统在真菌遗传转化上的应用 | 第17-20页 |
| ·双元载体的发展及应用 | 第20-21页 |
| ·研究内容及研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第2章 材料和方法 | 第23-42页 |
| ·实验材料 | 第23-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第23-25页 |
| ·构建载体用培养基和试剂 | 第25页 |
| ·真菌转化用培养基和试剂 | 第25-26页 |
| ·Southern 杂交及检测用试剂 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌微型质粒提取用试剂 | 第27页 |
| ·对峙实验用培养基 | 第27页 |
| ·仪器设备 | 第27-28页 |
| ·载体构建实验方法 | 第28-33页 |
| ·大肠杆菌高效感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
| ·pUC18、p81121 和pCAMBIA1301 质粒扩增和提取 | 第29页 |
| ·SOD基因引物设计 | 第29-30页 |
| ·SOD基因的克隆 | 第30页 |
| ·pUC18 和p81121 的双酶切及回收 | 第30-31页 |
| ·中间载体pUC18-GUS的构建 | 第31-32页 |
| ·中间载体pUC18-GSOD的构建 | 第32-33页 |
| ·表达载体pCA-GSOD的构建 | 第33页 |
| ·载体构建流程图 | 第33-35页 |
| ·真菌转化实验方法 | 第35-39页 |
| ·木霉菌转化前对潮霉素敏感性测定 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备及冻融法转化 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌质粒的提取 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌的活化培养 | 第36页 |
| ·不同初始菌液量农杆菌AGL-1 菌液的制备 | 第36页 |
| ·转化用真菌孢子悬液的制备 | 第36-37页 |
| ·木霉菌的转化 | 第37页 |
| ·木霉菌总DNA的提取 | 第37页 |
| ·转化子PCR检测 | 第37页 |
| ·转化子的Southern blot分析 | 第37-39页 |
| ·转化子对潮霉素的抗性水平及遗传稳定性检测 | 第39页 |
| ·木霉菌及其转化子对峙及胁迫实验方法 | 第39-41页 |
| ·木霉菌及其转化子的培养 | 第39-40页 |
| ·不同植物病原菌的培养 | 第40页 |
| ·两点对峙培养 | 第40页 |
| ·五点对峙培养 | 第40页 |
| ·生物防治菌拮抗机理的观察方法 | 第40页 |
| ·木霉菌及其转化子的逆境胁迫实验 | 第40-41页 |
| ·胁迫处理后菌株对峙实验 | 第41页 |
| ·本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 实验结果 | 第42-66页 |
| ·表达载体构建结果 | 第42-45页 |
| ·SOD基因引物设计 | 第42页 |
| ·SOD基因的克隆 | 第42-43页 |
| ·pUC18 和p81121 的双酶切胶回收 | 第43页 |
| ·中间载体pUC18-GUS的构建 | 第43-44页 |
| ·中间载体pUC18-GSOD的构建 | 第44-45页 |
| ·pUC18-GSOD的测序 | 第45页 |
| ·真菌表达载体pCA-GSOD的构建 | 第45页 |
| ·真菌转化实验结果 | 第45-50页 |
| ·转化前木霉对潮霉素的敏感性测定 | 第45-46页 |
| ·冻融法转化根癌农杆菌 | 第46页 |
| ·根癌农杆菌转化真菌影响因素分析 | 第46-48页 |
| ·转化pCA-GSOD及其转化子的初步鉴定 | 第48-49页 |
| ·木霉转化子的Southern blot分析 | 第49-50页 |
| ·转化子的传代分析结果 | 第50页 |
| ·对峙及胁迫实验结果 | 第50-62页 |
| ·木霉菌T88 及转化子T-SOD对立枯丝核菌室内拮抗实验 | 第50-52页 |
| ·T88 及其转化子T-SOD对尖孢镰刀菌的室内拮抗实验 | 第52-54页 |
| ·T88 及其转化子T-SOD和核盘菌室内拮抗实验 | 第54-56页 |
| ·木霉菌及其转化子逆境胁迫及对峙实验 | 第56-62页 |
| ·结论与讨论 | 第62-65页 |
| ·本章小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74页 |
