中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
缩略语表 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-20页 |
1.1 家蚕病毒及病毒病 | 第8-10页 |
1.2 BmDNV的分类 | 第10-11页 |
1.3 宿主域及组织亲和性 | 第11页 |
1.4 病原性与感病机理 | 第11-13页 |
1.5 浓核病病毒染色体DNA的构造 | 第13-15页 |
1.6 病毒粒子的蛋白质构成 | 第15-16页 |
1.7 病毒粒子的精制 | 第16-18页 |
1.8 对家蚕病毒病常用的免疫学诊断方法 | 第18-20页 |
第二章 引言 | 第20-22页 |
2.1 研究的意义 | 第20-21页 |
2.2 研究的目的 | 第21页 |
2.3 研究技术路线 | 第21-22页 |
第三章 BmDNV-5(信大株)感染增殖的研究 | 第22-30页 |
3.1 材料与方法 | 第22-26页 |
3.1.1 供试蚕品种 | 第22页 |
3.1.2 病毒接种液的制备 | 第22页 |
3.1.3 添毒的方法 | 第22-23页 |
3.1.4 中肠的摘除 | 第23页 |
3.1.5 病毒DNA的抽出 | 第23页 |
3.1.6 QC-PCB设计 | 第23-24页 |
3.1.7 竞争性模板DNA的制备 | 第24-25页 |
3.1.8 QC-PCP反应体系和HaeⅢ酶切处理 | 第25页 |
3.1.9 病毒DNA浓度的计算 | 第25-26页 |
3.2 结果与分析 | 第26-28页 |
3.2.1 感染初期BmDNV-5DNA的增殖经时变化 | 第26-27页 |
3.2.2 感染中后期BmDNV-5DNA的增殖经时变化 | 第27-28页 |
3.3 讨论 | 第28-30页 |
第四章 BmDNV-5(信大株)的DNA序列分析 | 第30-44页 |
4.1 材料与方法 | 第30-31页 |
4.1.1 材料 | 第30页 |
4.1.2 方法 | 第30-31页 |
4.1.2.1 BmDNV-5(信大株)全序列的测定 | 第30页 |
4.1.2.2 BmDNV-5(信大株)的DNA全序列分析 | 第30-31页 |
4.2 结果与分析 | 第31-34页 |
4.2.1 BmDNV-5(信大株)的DNA全序列分析 | 第31-33页 |
4.2.1.1 酶切图谱 | 第31-32页 |
4.2.1.2 开放阅读框的结构 | 第32页 |
4.2.1.3 信大株两末端的反向重复序列(ITR) | 第32页 |
4.2.1.4 信大株ORF1转录产物5'末端的二级结构 | 第32页 |
4.2.1.5 信大株病毒DNA内的同向重复序列 | 第32-33页 |
4.2.2 分子进化与分类分析 | 第33-34页 |
4.3 讨论 | 第34-44页 |
4.3.1 BmDNV-5(信大株)基因组的构造特征 | 第34页 |
4.3.2 BmDNV-5(信大株)的分子进化与比较基因组 | 第34-35页 |
4.3.3 BmDNV-5(信大株)作为生物工程载体的潜在价值 | 第35-44页 |
第五章 BmDNV-5(信大株)全克隆的研究 | 第44-61页 |
5.1 材料 | 第44-46页 |
5.1.1 病毒粒子 | 第44页 |
5.1.2 载体及宿主菌 | 第44-45页 |
5.1.3 主要仪器设备 | 第45页 |
5.1.4 主要生化试剂 | 第45页 |
5.1.5 主要试剂配方 | 第45-46页 |
5.2 方法 | 第46-54页 |
5.2.1 全克隆的战略 | 第46-47页 |
5.2.2 病毒基因组DNA的制备 | 第47页 |
5.2.3 病毒DNA的分段克隆 | 第47-52页 |
5.2.3.1 分段克隆的原理 | 第47-48页 |
5.2.3.2 插入片断的制备 | 第48-49页 |
5.2.3.3 质粒载体的制备 | 第49-50页 |
5.2.3.4 连接体系的构建 | 第50页 |
5.2.3.5 感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
5.2.3.6 遗传转化 | 第51页 |
5.2.3.7 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
5.2.4 病毒DNA全克隆的构建 | 第52-54页 |
5.2.4.1 全克隆载体的构建 | 第52-53页 |
5.2.4.2 全克隆插入片段的制备 | 第53-54页 |
5.2.4.3 连接体系的建立 | 第54页 |
5.2.4.4 自身连接产物的去除 | 第54页 |
5.3 结果与分析 | 第54-59页 |
5.3.1 病毒DNA的制备 | 第54-55页 |
5.3.2 插入片段的制备 | 第55页 |
5.3.3 质粒载体的制备 | 第55-56页 |
5.3.4 分段克隆的转化与筛选 | 第56-58页 |
5.3.5 病毒基因组DNA的全克隆 | 第58-59页 |
5.3.5.1 全克隆载体的制备 | 第58页 |
5.3.5.2 全克隆插入片段的制备 | 第58-59页 |
5.3.5.3 连接转化后的筛选 | 第59页 |
5.4 讨论 | 第59-61页 |
第六章 小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-64页 |
附录 | 第64-66页 |
致谢 | 第66页 |