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一株减毒荧光假单胞菌的构建及其交叉免疫保护性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-8页
第一章前言第8-15页
   ·我国水产养殖业的现状第8-9页
   ·荧光假单胞菌第9-10页
   ·嗜水气单胞菌第10-11页
   ·鱼用疫苗的种类第11-13页
   ·铁吸收调节基因fur第13-14页
   ·本研究的目的和意义第14-15页
第二章荧光假单胞菌TSS 铁吸收调控基因fur 的克隆及分析第15-23页
   ·材料和方法第15-22页
     ·实验材料第15-17页
     ·基因组DNA 的提取第17-18页
     ·感受态细胞的制备第18页
     ·转化第18页
     ·TSS 染色体步移文库的构建第18-19页
     ·染色体步移法克隆TSS fur(furpf)第19-20页
     ·furpf 与大肠杆菌furEc 互补实验(β-半乳糖苷酶活性检测)第20-21页
     ·序列提交第21-22页
   ·结果与讨论第22-23页
第三章荧光假单胞菌铁吸收调控基因缺失突变体TFM 的构建第23-35页
   ·材料和方法第23-32页
     ·实验材料第23-24页
     ·载体p704TS 的构建第24页
     ·荧光假单胞菌TSS fur 缺失突变片段TFID 的克隆第24-26页
     ·质粒p704TSFID 的构建第26页
     ·二次同源重组法筛选TFM第26-28页
     ·外膜蛋白OMP 的制备第28页
     ·生长状况的分析第28页
     ·Serum resistance activity第28-29页
     ·TSS 和TFM 的LD50 的测定第29页
     ·TSS 和TFM 侵染能力的测定第29-32页
   ·结果与讨论第32-35页
     ·PCR 检测TFM第32页
     ·TFM 和TSS 外膜蛋白的变化第32-33页
     ·基因fur 的缺失对生长状况的影响第33页
     ·Serum resistance activity第33-34页
     ·TSS 和TFM 侵染能力的差别第34页
     ·TSS 和TFM 毒力的差别第34-35页
第四章TFM 对荧光假单胞菌及嗜水气单胞菌的免疫保护效应检测第35-46页
   ·材料和方法第35-41页
     ·实验材料第35-36页
     ·腹腔注射免疫法第36页
     ·浸泡免疫法第36页
     ·口服免疫法第36-37页
     ·攻毒试验第37页
     ·质粒pJAQ 的构建第37-38页
     ·TFM/pJAQ 和TFM/pJT 的构建第38页
     ·Western第38页
     ·全菌ELISA 检测抗体效价第38-39页
     ·Serum bactericidal activity第39-41页
   ·结果与讨论第41-46页
     ·TFM 对TSS、AH1 和T4 的免疫保护效应第41-42页
     ·TFM 的免疫效果第42-43页
     ·TFM 作为携带外源抗原的载体第43-46页
结论第46-47页
参考文献第47-50页
硕士期间发表的论文第50-51页
致谢第51页

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