摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
第一章前言 | 第8-15页 |
·我国水产养殖业的现状 | 第8-9页 |
·荧光假单胞菌 | 第9-10页 |
·嗜水气单胞菌 | 第10-11页 |
·鱼用疫苗的种类 | 第11-13页 |
·铁吸收调节基因fur | 第13-14页 |
·本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
第二章荧光假单胞菌TSS 铁吸收调控基因fur 的克隆及分析 | 第15-23页 |
·材料和方法 | 第15-22页 |
·实验材料 | 第15-17页 |
·基因组DNA 的提取 | 第17-18页 |
·感受态细胞的制备 | 第18页 |
·转化 | 第18页 |
·TSS 染色体步移文库的构建 | 第18-19页 |
·染色体步移法克隆TSS fur(furpf) | 第19-20页 |
·furpf 与大肠杆菌furEc 互补实验(β-半乳糖苷酶活性检测) | 第20-21页 |
·序列提交 | 第21-22页 |
·结果与讨论 | 第22-23页 |
第三章荧光假单胞菌铁吸收调控基因缺失突变体TFM 的构建 | 第23-35页 |
·材料和方法 | 第23-32页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·载体p704TS 的构建 | 第24页 |
·荧光假单胞菌TSS fur 缺失突变片段TFID 的克隆 | 第24-26页 |
·质粒p704TSFID 的构建 | 第26页 |
·二次同源重组法筛选TFM | 第26-28页 |
·外膜蛋白OMP 的制备 | 第28页 |
·生长状况的分析 | 第28页 |
·Serum resistance activity | 第28-29页 |
·TSS 和TFM 的LD50 的测定 | 第29页 |
·TSS 和TFM 侵染能力的测定 | 第29-32页 |
·结果与讨论 | 第32-35页 |
·PCR 检测TFM | 第32页 |
·TFM 和TSS 外膜蛋白的变化 | 第32-33页 |
·基因fur 的缺失对生长状况的影响 | 第33页 |
·Serum resistance activity | 第33-34页 |
·TSS 和TFM 侵染能力的差别 | 第34页 |
·TSS 和TFM 毒力的差别 | 第34-35页 |
第四章TFM 对荧光假单胞菌及嗜水气单胞菌的免疫保护效应检测 | 第35-46页 |
·材料和方法 | 第35-41页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·腹腔注射免疫法 | 第36页 |
·浸泡免疫法 | 第36页 |
·口服免疫法 | 第36-37页 |
·攻毒试验 | 第37页 |
·质粒pJAQ 的构建 | 第37-38页 |
·TFM/pJAQ 和TFM/pJT 的构建 | 第38页 |
·Western | 第38页 |
·全菌ELISA 检测抗体效价 | 第38-39页 |
·Serum bactericidal activity | 第39-41页 |
·结果与讨论 | 第41-46页 |
·TFM 对TSS、AH1 和T4 的免疫保护效应 | 第41-42页 |
·TFM 的免疫效果 | 第42-43页 |
·TFM 作为携带外源抗原的载体 | 第43-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-50页 |
硕士期间发表的论文 | 第50-51页 |
致谢 | 第51页 |