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贡嘎蝠蛾幼虫肠道微生物区系的研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
1 绪论第11-17页
   ·问题的提出及研究意义第11-14页
     ·问题的提出第11-12页
     ·研究的意义第12-14页
   ·国内外研究现状第14-16页
     ·贡嘎蝠蛾的研究现状第14-15页
     ·昆虫肠道微生物的研究进展第15-16页
   ·本文研究的目的和研究内容第16-17页
     ·本文研究的目的第16页
     ·本文研究的主要内容与技术路线第16-17页
2 肠道微生物研究方法介绍第17-25页
   ·引言第17页
   ·传统的分类鉴定方法第17-18页
   ·细菌16S RRNA 序列在微生物多样性分析中的应用第18-22页
     ·变性梯度凝胶电泳和温度梯度凝胶电泳技术第19页
     ·单链构象多态性分析技术第19-20页
     ·随机扩增多态性分析技术第20页
     ·限制性片段长度多态性分析技术第20-21页
     ·基因探针杂交技术第21页
     ·核酸印迹杂交技术第21页
     ·利用16S-235 rRNA 基因区间序列进行的研究第21-22页
   ·真核生物ITS 区在微生物多样性分析中的应用第22-23页
     ·利用rRNA 上具高度保守性的区域设计通用引物第22-23页
     ·以ITS 区段的RFLP 图谱作为标记特征进行分子鉴定第23页
     ·根据DNA 序列进行分子鉴定第23页
   ·小结第23-25页
3 PCR-RFLP 法分析贡嘎蝠蛾幼虫肠道细菌区系第25-37页
   ·引言第25-26页
   ·材料与仪器第26页
     ·研究材料第26页
     ·试验仪器第26页
   ·实验方法与步骤第26-31页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道总DNA 的提取第26-27页
     ·细菌16S rRNA 基因PCR 扩增第27-28页
     ·PCR 产物的纯化第28-29页
     ·高效感受态细胞的制备第29页
     ·16S rRNA 基因文库的构建第29-30页
     ·阳性克隆筛选第30-31页
     ·RFLP 酶切分型和系统进化关系分析第31页
   ·结果与分析第31-36页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道内细菌的总DNA 提取第31页
     ·16S rDNA 的PCR 扩增第31-32页
     ·阳性克隆的鉴定第32-33页
     ·EcoRI、MspI 及HaeⅢ的酶切分析结果第33-35页
     ·系统发育分析第35-36页
   ·小结第36-37页
4 贡嘎蝠蛾幼虫肠道真菌区系分析第37-48页
   ·引言第37页
   ·材料与仪器第37-38页
     ·贡嘎蝠蛾样品的采集及处理第37页
     ·实验材料与试剂第37页
     ·引物序列第37页
     ·试验仪器第37-38页
   ·实验方法与步骤第38-40页
     ·肠道微生物总DNA 的提取第38-39页
     ·ITS 片段的PCR 扩增第39-40页
     ·PCR 产物的纯化第40页
     ·高效感受态细胞的制备第40页
     ·ITS 基因文库的构建第40页
     ·阳性克隆筛选第40页
     ·RFLP 酶切分型和克隆文库分析第40页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道真菌的分离培养及与非培养法的比较第40页
   ·结果与分析第40-46页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道内真菌的总DNA 提取与ITS 序列的PCR 扩增第40-41页
     ·ITS 克隆文库的构建与筛选第41页
     ·序列比对与RFLP 分析第41-43页
     ·系统发育分析第43-44页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道真菌的分离培养法与非培养法的比较第44-46页
   ·小结第46-48页
5 结论与展望第48-51页
   ·主要结论第48-50页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道各种微生物数量差异大第48页
     ·贡嘎蝠蛾幼虫肠道微生物的种类特殊第48页
     ·纯培养和分子生物学方法鉴定结果不一致第48-49页
     ·研究方法的评价第49页
     ·PCR-RFLP 分析方法的局限第49-50页
   ·后续工作与展望第50-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-58页
附录第58-60页
  A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录:第58页
  B.作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目第58-60页

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