| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·我国转基因杨树研究概况 | 第9-11页 |
| ·抗虫转基因研究 | 第9-10页 |
| ·转抗盐碱基因研究 | 第10-11页 |
| ·木材材性的改良研究 | 第11页 |
| ·植物中耐盐基因的种类 | 第11-16页 |
| ·植物中与耐盐相关的功能基因 | 第12-13页 |
| ·渗透调节物质合成及调节相关基因及其应用 | 第12-13页 |
| ·活性氧清除相关基因及其应用 | 第13页 |
| ·直接保护细胞免受盐胁迫伤害的功能蛋白 | 第13页 |
| ·植物中与耐盐相关的调控基因 | 第13-16页 |
| ·转录因子和传递信号基因的作用 | 第14页 |
| ·翻译起始因子eIF基因家族 | 第14-15页 |
| ·翻译起始因子eIF1A | 第15-16页 |
| ·本研究的目的意义 | 第16-17页 |
| 2 重组酵母INVSc1(pYES-eIF1A)抗逆性分析 | 第17-29页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·试验材料 | 第17-18页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·酶和试剂 | 第17-18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·重组酵母胁迫处理主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18页 |
| ·试验方法 | 第18-22页 |
| ·目的基因和载体的获得 | 第18页 |
| ·目的基因和载体的双酶切与纯化 | 第18-19页 |
| ·重组质粒的构建和转化 | 第19页 |
| ·重组质粒的选择和鉴定 | 第19页 |
| ·重组质粒pYES-eIF1A的抗性选择 | 第19页 |
| ·重组质粒pYES-eIF1A的PCR扩增检测 | 第19页 |
| ·重组质粒pYES-eIF1A的双酶切检测 | 第19页 |
| ·重组质粒的酵母转化及鉴定 | 第19页 |
| ·重组酵母的分子检测 | 第19-20页 |
| ·重组酵母的PCR检测 | 第19-20页 |
| ·重组酵母的Northern印迹杂交 | 第20页 |
| ·重组酵母INVSc1(pYES-eIF1A)的胁迫处理 | 第20-22页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)的NaCl胁迫处理 | 第20页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)的Na_2CO_3胁迫处理 | 第20-21页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)的低温胁迫处理 | 第21页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)的高温胁迫处理 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-28页 |
| ·目的基因的获得 | 第22页 |
| ·目的基因和载体的双酶切 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的构建和纯化 | 第23页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的抗性筛选 | 第23页 |
| ·重组质粒的PCR检测 | 第23-24页 |
| ·重组质粒的双酶切检测 | 第24页 |
| ·重组质粒pYES-eIF1A酵母转化 | 第24页 |
| ·重组酵母的分子检测 | 第24-26页 |
| ·重组酵母的PCR检测 | 第24-25页 |
| ·重组酵母Northern杂交 | 第25-26页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)酵母抗逆性提高 | 第26-28页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)酵母的抗NaCl能力增强 | 第26页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)酵母的抗Na_2CO_3能力增强 | 第26-27页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)酵母的抗冷能力增强 | 第27页 |
| ·INVSc1(pYES-eIF1A)酵母的抗高温能力增强 | 第27-28页 |
| ·本章小结 | 第28-29页 |
| 3 eIF1A基因山新杨的遗传转化 | 第29-37页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·酶和试剂 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·中间表达载体的获得 | 第30页 |
| ·工程菌的制备和检测 | 第30-31页 |
| ·山新杨的遗传转化 | 第31页 |
| ·转基因山新杨的分子检测 | 第31-33页 |
| ·转基因山新杨的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·Northern印迹杂交 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·中间表达载体的获得 | 第33页 |
| ·工程菌的检测 | 第33-34页 |
| ·转eIF1A基因山新杨的获得 | 第34-36页 |
| ·eIF1A基因山新杨的抗生素筛选 | 第34页 |
| ·转eIF1A基因山新杨的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·转eIF1A基因山新杨Northern印迹杂交 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 4 转eIF1A基因山新杨的耐盐性研究 | 第37-48页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第38页 |
| ·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第38页 |
| ·过氧化物酶(POD)的测定 | 第38页 |
| ·丙二醛(MDA)含量测定 | 第38-39页 |
| ·可溶性蛋白的测定 | 第39-40页 |
| ·盐胁迫下盐害指数的比较 | 第40页 |
| ·数据处理和分析 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·盐胁迫下转eIF1A基因山新杨叶绿素的变化 | 第41-42页 |
| ·盐胁迫下转eIF1A基因山新杨SOD活性变化 | 第42-43页 |
| ·盐胁迫下转eIF1A基因山新杨POD活性变化 | 第43-44页 |
| ·盐胁迫下转eIF1A基因山新杨MDA活性变化 | 第44-45页 |
| ·盐胁迫下转eIF1A基因山新杨可溶性蛋白含量的变化 | 第45-46页 |
| ·盐胁迫下转eIF1A基因山新杨盐害指数变化 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-51页 |
| ·eIF1A基因在转基因山新杨中起的主要作用是增强了蛋白质的合成 | 第48页 |
| ·杨树核遗传转化的探讨 | 第48-49页 |
| ·关于转基因植株的耐盐性及耐盐性鉴定的一些初步认识 | 第49-50页 |
| ·山新杨转化 | 第50页 |
| ·转基因山新杨的筛选 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
