摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第9-10页 |
1 文献综述 | 第10-25页 |
·植物基因工程发展概况 | 第10-12页 |
·转基因技术的重要性 | 第10-11页 |
·转基因植物的产业化发展 | 第11页 |
·转基因技术发展中存在的问题 | 第11-12页 |
·植物基因工程与抗除草剂作物 | 第12-17页 |
·抗除草剂基因工程主要方法 | 第12-13页 |
·抗除草剂基因的种类 | 第13-17页 |
·抗草丁膦(Glufosinate)基因及其转基因作物 | 第13-14页 |
·抗草甘膦(Glyphosate)基因及其转基因作物 | 第14-15页 |
·抗除草剂磺酰脲基因及其转基因作物 | 第15-16页 |
·其他一些抗除草剂基因及其转基因作物 | 第16-17页 |
·抗除草剂基因的应用 | 第17页 |
·细胞色素P450酶系 | 第17-22页 |
·细胞色素P450的多样性 | 第18-19页 |
·细胞色素P450种类多样性 | 第18页 |
·细胞色素P450功能多样性 | 第18-19页 |
·细胞色素P450代谢除草剂的作用机理 | 第19页 |
·细胞色素P450与转基因抗除草剂作物 | 第19-20页 |
·细胞色素P450与除草剂污染的生物修复 | 第20-21页 |
·P450基因在植物改良中的应用 | 第21-22页 |
·创造雄性不育系 | 第21页 |
·培育抗除草剂的作物品种 | 第21页 |
·生产具有重要医药价值的天然化合物 | 第21-22页 |
·改良植物的抗逆性 | 第22页 |
·拟南芥转化方法的概述 | 第22-23页 |
·油菜与抗除草剂 | 第23页 |
·本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-36页 |
·材料 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-36页 |
·植株叶片总RNA提取与RT-PCR | 第25-27页 |
·总RNA抽提步骤 | 第25页 |
·逆转录反应 | 第25-26页 |
·GC含量较高区段的PCR扩增程序 | 第26-27页 |
·一步法RT-PCR克隆基因 | 第27页 |
·载体的构建 | 第27-31页 |
·液体LB(Luria-Bertani)培养基 | 第28页 |
·小量碱法提取质粒DNA | 第28-29页 |
·电转化感受态细胞的制备 | 第29页 |
·质粒的酶切 | 第29页 |
·目标DNA片段的回收纯化 | 第29-30页 |
·连接反应 | 第30页 |
·感受态细胞的电转化 | 第30-31页 |
·阳性重组克隆的鉴定 | 第31页 |
·抗除草剂基因Bel的遗传转化 | 第31-33页 |
·拟南芥的遗传转化 | 第31-32页 |
·油菜的遗传转化 | 第32页 |
·烟草的遗传转化 | 第32-33页 |
·转基因拟南芥种子的筛选与分子检测 | 第33-34页 |
·转基因拟南芥种子的筛选 | 第33页 |
·拟南芥总DNA的提取 | 第33页 |
·PCR检测 | 第33-34页 |
·RT-PCR检测 | 第34页 |
·转基因植株对除草剂的耐药性试验 | 第34页 |
·转基因油菜的筛选与初步检测 | 第34-35页 |
·转基因油菜种子的筛选 | 第34-35页 |
·PCR检测 | 第35页 |
·转基因烟草的初步检测 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-44页 |
·目的基因片段的克隆 | 第36页 |
·植物表达载体的构建 | 第36-37页 |
·转基因拟南芥植株的获得与检测 | 第37-42页 |
·转基因拟南芥植株的获得 | 第37-38页 |
·抗性拟南芥的PCR检测 | 第38-39页 |
·RT-PCR检测 | 第39-40页 |
·转基因拟南芥对除草剂的耐药性试验 | 第40-42页 |
·转基因油菜的获得与初步检测 | 第42-43页 |
·转基因烟草的获得与初步检测 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
·遗传转化中除草剂筛选浓度的确定 | 第44页 |
·抗除草剂基因遗传表现 | 第44-45页 |
·抗除草剂基因的应用 | 第45-46页 |
·除草剂在油菜、烟草中使用时遇到的问题 | 第46-47页 |
5 参考文献 | 第47-52页 |
6 致谢 | 第52页 |