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水稻苯达松和磺酰脲类除草剂抗性基因Bel的载体构建与转化

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略词表(Abbreviation)第9-10页
1 文献综述第10-25页
   ·植物基因工程发展概况第10-12页
     ·转基因技术的重要性第10-11页
     ·转基因植物的产业化发展第11页
     ·转基因技术发展中存在的问题第11-12页
   ·植物基因工程与抗除草剂作物第12-17页
     ·抗除草剂基因工程主要方法第12-13页
     ·抗除草剂基因的种类第13-17页
       ·抗草丁膦(Glufosinate)基因及其转基因作物第13-14页
       ·抗草甘膦(Glyphosate)基因及其转基因作物第14-15页
       ·抗除草剂磺酰脲基因及其转基因作物第15-16页
       ·其他一些抗除草剂基因及其转基因作物第16-17页
     ·抗除草剂基因的应用第17页
   ·细胞色素P450酶系第17-22页
     ·细胞色素P450的多样性第18-19页
       ·细胞色素P450种类多样性第18页
       ·细胞色素P450功能多样性第18-19页
     ·细胞色素P450代谢除草剂的作用机理第19页
     ·细胞色素P450与转基因抗除草剂作物第19-20页
     ·细胞色素P450与除草剂污染的生物修复第20-21页
     ·P450基因在植物改良中的应用第21-22页
       ·创造雄性不育系第21页
       ·培育抗除草剂的作物品种第21页
       ·生产具有重要医药价值的天然化合物第21-22页
       ·改良植物的抗逆性第22页
   ·拟南芥转化方法的概述第22-23页
   ·油菜与抗除草剂第23页
   ·本研究的目的与意义第23-25页
2 材料与方法第25-36页
   ·材料第25页
   ·实验方法第25-36页
     ·植株叶片总RNA提取与RT-PCR第25-27页
       ·总RNA抽提步骤第25页
       ·逆转录反应第25-26页
       ·GC含量较高区段的PCR扩增程序第26-27页
       ·一步法RT-PCR克隆基因第27页
     ·载体的构建第27-31页
       ·液体LB(Luria-Bertani)培养基第28页
       ·小量碱法提取质粒DNA第28-29页
       ·电转化感受态细胞的制备第29页
       ·质粒的酶切第29页
       ·目标DNA片段的回收纯化第29-30页
       ·连接反应第30页
       ·感受态细胞的电转化第30-31页
       ·阳性重组克隆的鉴定第31页
     ·抗除草剂基因Bel的遗传转化第31-33页
       ·拟南芥的遗传转化第31-32页
       ·油菜的遗传转化第32页
       ·烟草的遗传转化第32-33页
     ·转基因拟南芥种子的筛选与分子检测第33-34页
       ·转基因拟南芥种子的筛选第33页
       ·拟南芥总DNA的提取第33页
       ·PCR检测第33-34页
       ·RT-PCR检测第34页
       ·转基因植株对除草剂的耐药性试验第34页
     ·转基因油菜的筛选与初步检测第34-35页
       ·转基因油菜种子的筛选第34-35页
       ·PCR检测第35页
     ·转基因烟草的初步检测第35-36页
3 结果第36-44页
   ·目的基因片段的克隆第36页
   ·植物表达载体的构建第36-37页
   ·转基因拟南芥植株的获得与检测第37-42页
     ·转基因拟南芥植株的获得第37-38页
     ·抗性拟南芥的PCR检测第38-39页
     ·RT-PCR检测第39-40页
     ·转基因拟南芥对除草剂的耐药性试验第40-42页
   ·转基因油菜的获得与初步检测第42-43页
   ·转基因烟草的获得与初步检测第43-44页
4 讨论第44-47页
   ·遗传转化中除草剂筛选浓度的确定第44页
   ·抗除草剂基因遗传表现第44-45页
   ·抗除草剂基因的应用第45-46页
   ·除草剂在油菜、烟草中使用时遇到的问题第46-47页
5 参考文献第47-52页
6 致谢第52页

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