摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1 小麦转基因研究现状与发展趋势 | 第9-17页 |
·现有的小麦遗传转化方法 | 第9-13页 |
·基因枪法 | 第9-11页 |
·农杆菌介导法 | 第11-12页 |
·花粉管通道法 | 第12页 |
·其它转基因方法 | 第12-13页 |
·转化细胞的筛选 | 第13-14页 |
·现今在小麦上转化成功的目的基因 | 第14-16页 |
·转基因技术存在的问题 | 第16-17页 |
·小麦转基因研究展望 | 第17页 |
2 D型植物细胞周期蛋白基因研究进展 | 第17-20页 |
·植物细胞周期蛋白基因 | 第17-18页 |
·依赖细胞周期蛋白的蛋白激酶(CDKs)基因 | 第18-19页 |
·其他相关的基因 | 第19页 |
·D型植物细胞蛋白基因及其转基因研究进展 | 第19-20页 |
3 研究目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 基因枪法获得CycD2转基因植株及对其后代的研究 | 第22-33页 |
1 CycD2转基因植株的获得 | 第22-24页 |
·植物材料 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·转化质粒 | 第22-23页 |
·小麦成熟胚离体培养 | 第23页 |
·基因枪转化与G418抗性筛选 | 第23页 |
·小麦转基因植株 T_0代分子鉴定 | 第23-24页 |
·小麦转基因植株 T_0代的获得 | 第24页 |
2 对CycD2转基因后代的研究 | 第24-33页 |
·材料 | 第24页 |
·方法 | 第24-27页 |
·叶片总DNA的提取:SDS法 | 第24-25页 |
·小麦转基因植株 T_1代 PCR检测 | 第25页 |
·小麦转基因植株 T_1代 Southern-blot鉴定 | 第25-27页 |
·时间安排 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-31页 |
·小麦转基因植株 T_1代 PCR检测 | 第27-28页 |
·小麦转基因植株 T_1代 Southern-blot鉴定 | 第28-29页 |
·小麦转基因植株后代农艺性状分析 | 第29-31页 |
·讨论 | 第31-33页 |
第三章 农杆菌花器浸蘸法在小麦转化中的应用研究 | 第33-44页 |
1 材料和方法 | 第33-36页 |
·小麦受体材料准备 | 第33页 |
·培养基 | 第33页 |
·工程菌株的构建和鉴定 | 第33-34页 |
·农杆菌菌株的活化与保存 | 第34-35页 |
·菌株的短期保存 | 第34页 |
·菌株的长期保存 | 第34页 |
·接种菌液的制备 | 第34-35页 |
·接种方法 | 第35页 |
·花器滴注法接种 | 第35页 |
·针刺注射法接种 | 第35页 |
·对 T_1代种子进行G418抗性筛选 | 第35页 |
·抗性植株PCR检测 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-41页 |
·工程菌株的菌落PCR法鉴定 | 第36页 |
·菌液处理对 T_1代种子外观形态的影响 | 第36-37页 |
·G418抗性筛选 | 第37-38页 |
·菌液接种方式对转化效率的影响 | 第38-39页 |
·抗性植株PCR检测 | 第39页 |
·抗性植株农艺性状观察 | 第39-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·影响农杆菌花器浸蘸转化效率的一些因素 | 第41-42页 |
·转化体的筛选和鉴定 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52页 |