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GCR1,GCR2蛋白在植物感应细菌N-酰基高丝氨酸内酯过程中的作用

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-13页
 §1-1 植物与细菌信号分子的互作第9-10页
 §1-2 G 蛋白信号转导系统及其作用第10-11页
  1-2-1 异三聚体G 蛋白系统的组成及其信号转导途径第10页
  1-2-2 异三聚体G 蛋白在激素信号转导过程中的作用第10-11页
 §1-3 G 蛋白偶联受体及其参与的信号转导第11页
 §1-4 课题意义第11-13页
第二章 GCR1,GCR2 在N-酰基高丝氨酸内酯调节拟南芥根生长过程中的作用第13-23页
 §2-1 材料第13-15页
  2-1-1 供试菌株及载体第13页
  2-1-2 引物第13-14页
  2-1-3 主要试剂第14页
  2-1-4 仪器设备第14页
  2-1-5 培养基及营养液第14-15页
 §2-2 方法第15-18页
  2-2-1 拟南芥种子的消毒和种植第15页
  2-2-2 TRNzol 法提取植物总RNA第15页
  2-2-3 RT-PCR第15-16页
  2-2-4 拟南芥突变体的鉴定第16页
  2-2-5 拟南芥主根长的测定第16-17页
  2-2-6 荧光定量PCR第17-18页
  2-2-7 Real Time PCR 检测GCR1,GCR2 基因表达量第18页
 §2-3 结果第18-20页
  2-3-1 拟南芥T-DNA 插入突变体gcr1-1 和gcr2-2 的鉴定第18-19页
  2-3-2 AHLs 对不同基因型拟南芥主根生长的影响第19-20页
  2-3-3 AHLs 对拟南芥GCR1 和GCR2 基因表达的影响第20页
 §2-4 讨论第20-22页
 §2-5 小结第22-23页
第三章 拟南芥突变体基因回复植株和过表达植株的构建第23-34页
 §3-1 材料第23-26页
  3-1-1 供试植株菌株及载体第23页
  3-1-2 引物第23-24页
  3-1-3 主要试剂第24页
  3-1-4 仪器设备第24页
  3-1-5 培养基第24-25页
  3-1-6 溶液配制第25-26页
 §3-2 方法第26-30页
  3-2-1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第26页
  3-2-2 大肠杆菌DH5α的热激转化第26-27页
  3-2-3 从菌液中提取质粒DNA第27页
  3-2-4 从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段第27-28页
  3-2-5 制备农杆菌EHA105 感受态第28页
  3-2-6 农杆菌EHA105 的热激转化第28页
  3-2-7 农杆菌EHA105 表达载体pCAMBIA1301-gcr1, pCAMBIA1301-gcr2 的构建第28-29页
  3-2-8 农杆菌EHA105 介导拟南芥转基因第29-30页
  3-2-9 转基因拟南芥的筛选第30页
 §3-3 结果第30-32页
  3-3-1 GCR1,GCR2 基因真核表达载体pCAMBIA1301-gcr1,pCAMBIA1301-gcr2 的构建第30-32页
  3-3-2 转基因拟南芥的筛选第32页
 §3-4 小结第32-34页
第四章 GCR1,GCR2 蛋白在大肠杆菌中的表达和鉴定第34-46页
 §4-1 材料第34-38页
  4-1-1 供试菌株及载体第34页
  4-1-2 引物第34页
  4-1-3 主要试剂第34-35页
  4-1-4 仪器设备第35页
  4-1-5 培养基第35页
  4-1-6 溶液配制第35-38页
 §4-2 方法第38-42页
  4-2-1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备第38页
  4-2-2 大肠杆菌DH5α的热激转化第38页
  4-2-3 从菌液中提取质粒DNA第38页
  4-2-4 从琼脂糖凝胶中回收DNA第38页
  4-2-5 制备大肠杆菌BL21 感受态第38-39页
  4-2-6 大肠杆菌BL21 的热激转化第39页
  4-2-7 重组表达质粒的构建第39-40页
  4-2-8 重组大肠杆菌BL21(pET-28a-gcr1),大肠杆菌BL21(pET-28a-gcr2)的诱导表达第40页
  4-2-9 SDS-PAGE 分析第40-41页
  4-2-10 Western Blot 检测第41-42页
 §4-3 结果第42-45页
  4-3-1 GCR1,GCR2 原核表达载体pET28a-gcr1 和pET28a-gcr2 的构建第42-43页
  4-3-2 表达产物GCR1,GCR2 蛋白的SDS-PAGE 和Western Blot 分析第43-45页
 §4-4 小结第45-46页
第五章 结论第46-47页
第六章 展望第47-48页
参考文献第48-52页
致谢第52-53页
攻读学位期间所取得的相关科研成果第53页

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