摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-13页 |
§1-1 植物与细菌信号分子的互作 | 第9-10页 |
§1-2 G 蛋白信号转导系统及其作用 | 第10-11页 |
1-2-1 异三聚体G 蛋白系统的组成及其信号转导途径 | 第10页 |
1-2-2 异三聚体G 蛋白在激素信号转导过程中的作用 | 第10-11页 |
§1-3 G 蛋白偶联受体及其参与的信号转导 | 第11页 |
§1-4 课题意义 | 第11-13页 |
第二章 GCR1,GCR2 在N-酰基高丝氨酸内酯调节拟南芥根生长过程中的作用 | 第13-23页 |
§2-1 材料 | 第13-15页 |
2-1-1 供试菌株及载体 | 第13页 |
2-1-2 引物 | 第13-14页 |
2-1-3 主要试剂 | 第14页 |
2-1-4 仪器设备 | 第14页 |
2-1-5 培养基及营养液 | 第14-15页 |
§2-2 方法 | 第15-18页 |
2-2-1 拟南芥种子的消毒和种植 | 第15页 |
2-2-2 TRNzol 法提取植物总RNA | 第15页 |
2-2-3 RT-PCR | 第15-16页 |
2-2-4 拟南芥突变体的鉴定 | 第16页 |
2-2-5 拟南芥主根长的测定 | 第16-17页 |
2-2-6 荧光定量PCR | 第17-18页 |
2-2-7 Real Time PCR 检测GCR1,GCR2 基因表达量 | 第18页 |
§2-3 结果 | 第18-20页 |
2-3-1 拟南芥T-DNA 插入突变体gcr1-1 和gcr2-2 的鉴定 | 第18-19页 |
2-3-2 AHLs 对不同基因型拟南芥主根生长的影响 | 第19-20页 |
2-3-3 AHLs 对拟南芥GCR1 和GCR2 基因表达的影响 | 第20页 |
§2-4 讨论 | 第20-22页 |
§2-5 小结 | 第22-23页 |
第三章 拟南芥突变体基因回复植株和过表达植株的构建 | 第23-34页 |
§3-1 材料 | 第23-26页 |
3-1-1 供试植株菌株及载体 | 第23页 |
3-1-2 引物 | 第23-24页 |
3-1-3 主要试剂 | 第24页 |
3-1-4 仪器设备 | 第24页 |
3-1-5 培养基 | 第24-25页 |
3-1-6 溶液配制 | 第25-26页 |
§3-2 方法 | 第26-30页 |
3-2-1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第26页 |
3-2-2 大肠杆菌DH5α的热激转化 | 第26-27页 |
3-2-3 从菌液中提取质粒DNA | 第27页 |
3-2-4 从琼脂糖凝胶中回收DNA 片段 | 第27-28页 |
3-2-5 制备农杆菌EHA105 感受态 | 第28页 |
3-2-6 农杆菌EHA105 的热激转化 | 第28页 |
3-2-7 农杆菌EHA105 表达载体pCAMBIA1301-gcr1, pCAMBIA1301-gcr2 的构建 | 第28-29页 |
3-2-8 农杆菌EHA105 介导拟南芥转基因 | 第29-30页 |
3-2-9 转基因拟南芥的筛选 | 第30页 |
§3-3 结果 | 第30-32页 |
3-3-1 GCR1,GCR2 基因真核表达载体pCAMBIA1301-gcr1,pCAMBIA1301-gcr2 的构建 | 第30-32页 |
3-3-2 转基因拟南芥的筛选 | 第32页 |
§3-4 小结 | 第32-34页 |
第四章 GCR1,GCR2 蛋白在大肠杆菌中的表达和鉴定 | 第34-46页 |
§4-1 材料 | 第34-38页 |
4-1-1 供试菌株及载体 | 第34页 |
4-1-2 引物 | 第34页 |
4-1-3 主要试剂 | 第34-35页 |
4-1-4 仪器设备 | 第35页 |
4-1-5 培养基 | 第35页 |
4-1-6 溶液配制 | 第35-38页 |
§4-2 方法 | 第38-42页 |
4-2-1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第38页 |
4-2-2 大肠杆菌DH5α的热激转化 | 第38页 |
4-2-3 从菌液中提取质粒DNA | 第38页 |
4-2-4 从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第38页 |
4-2-5 制备大肠杆菌BL21 感受态 | 第38-39页 |
4-2-6 大肠杆菌BL21 的热激转化 | 第39页 |
4-2-7 重组表达质粒的构建 | 第39-40页 |
4-2-8 重组大肠杆菌BL21(pET-28a-gcr1),大肠杆菌BL21(pET-28a-gcr2)的诱导表达 | 第40页 |
4-2-9 SDS-PAGE 分析 | 第40-41页 |
4-2-10 Western Blot 检测 | 第41-42页 |
§4-3 结果 | 第42-45页 |
4-3-1 GCR1,GCR2 原核表达载体pET28a-gcr1 和pET28a-gcr2 的构建 | 第42-43页 |
4-3-2 表达产物GCR1,GCR2 蛋白的SDS-PAGE 和Western Blot 分析 | 第43-45页 |
§4-4 小结 | 第45-46页 |
第五章 结论 | 第46-47页 |
第六章 展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
攻读学位期间所取得的相关科研成果 | 第53页 |