中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
缩写索引 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-25页 |
·植物类受体蛋白激酶研究进展 | 第14-19页 |
·植物类受体蛋白激酶简介 | 第14页 |
·植物类受体蛋白激酶的结构特征 | 第14-15页 |
·植物类受体蛋白激酶的分类 | 第15-16页 |
·植物类受体蛋白激酶的生理功能 | 第16-18页 |
·调控花粉自交不亲和 | 第16-17页 |
·调控组织形成和器官发育 | 第17页 |
·介导胞内信号转导 | 第17-18页 |
·参与抗逆性反应 | 第18页 |
·植物类受体蛋白激酶的研究意义 | 第18-19页 |
·水稻种子特异性启动子研究进展 | 第19-24页 |
·启动子的概念及基本结构 | 第19页 |
·水稻种子特异性启动子的的研究进展 | 第19-22页 |
·种胚特异基因启动子 | 第20-21页 |
·谷蛋白基因启动子 | 第21页 |
·醇溶蛋白基因启动子 | 第21页 |
·球蛋白基因启动子 | 第21-22页 |
·异淀粉酶基因启动子 | 第22页 |
·水稻种子特异性启动子的顺式作用元件及相关转录因子 | 第22-23页 |
·水稻种子特异性启动子的研究展望 | 第23-24页 |
·本研究背景及目的意义 | 第24-25页 |
第二章 启动子OSESP1的表达调控分析 | 第25-53页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株和质粒 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器设备 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-36页 |
·常用培养基的配制 | 第26-27页 |
·LB培养基 | 第26页 |
·水稻转化培养基 | 第26页 |
·MS培养基 | 第26-27页 |
·常用试剂及溶液的配置 | 第27页 |
·水稻基因组DNA的提取 | 第27页 |
·启动子序列的分析 | 第27-28页 |
·引物设计及相关的PCR扩增 | 第28-29页 |
·琼脂糖凝胶回收DNA | 第29页 |
·酶切及连接反应 | 第29页 |
·酶切反应 | 第29页 |
·连接反应 | 第29页 |
·连接产物的转化、重组质粒的提取及鉴定 | 第29-30页 |
·启动子表达载体的瞬时表达 | 第30-32页 |
·瞬时表达所需水稻材料的准备 | 第30-31页 |
·基因枪进行瞬时表达 | 第31-32页 |
·重组质粒转化农杆菌 | 第32-33页 |
·农杆菌LBA4404感受态的制备 | 第32页 |
·质粒转化农杆菌LBA4404 | 第32页 |
·农杆菌阳性克隆的PCR鉴定 | 第32-33页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第33-34页 |
·水稻愈伤组织的培养 | 第33页 |
·侵染及共培养 | 第33页 |
·愈伤组织的筛选 | 第33-34页 |
·抗性愈伤组织的诱导分化和生根 | 第34页 |
·转基因苗的锻炼和移栽 | 第34页 |
·转基因苗的分子鉴定 | 第34页 |
·GUS组织化学染色 | 第34页 |
·转基因水稻GUS酶活性的测定 | 第34-36页 |
·GUS粗酶液的提取 | 第34-35页 |
·GUS酶活反应及荧光测定 | 第35页 |
·水稻GUS粗酶液的蛋白含量测定 | 第35-36页 |
·酶活力计算 | 第36页 |
·实验结果与分析 | 第36-48页 |
·启动子OsESP1片段的克隆 | 第36-37页 |
·启动子OsESP1的生物信息学分析 | 第37-38页 |
·启动子OsESP1系列缺失片段植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
·启动子系列缺失片段的构建策略 | 第38-39页 |
·启动子系列缺失片段植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
·启动子OsESP1系列缺失载体在水稻种胚中瞬时表达分析 | 第40-41页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第41-42页 |
·转基因水稻的分子鉴定 | 第42-45页 |
·转基因水稻的GUS组织化学染色 | 第45-46页 |
·转基因水稻种胚中GUS酶活性分析 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-52页 |
·启动子OsESP1的种胚表达特异性 | 第48-50页 |
·启动子OsESP1及其系列缺失片段的启动强度及表达调控研究 | 第50-52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
第三章 基因OsESG1的克隆及功能研究 | 第53-78页 |
·实验材料 | 第53页 |
·植物材料 | 第53页 |
·菌株和质粒 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-58页 |
·水稻RNA的提取及反转录 | 第53-55页 |
·Trizol法提取水稻叶片RNA | 第53-54页 |
·CTAB-LiCl法提取水稻种胚总RNA | 第54页 |
·反转录实验 | 第54-55页 |
·OsESG1基因的生物信息学分析 | 第55页 |
·OsESG1基因的组织表达模式分析 | 第55页 |
·水稻OsESG1对ABA、生长素的响应及表达模式分析 | 第55-56页 |
·OsESG1基因的克隆 | 第56页 |
·基因OsESG1植物表达载体的构建 | 第56页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第56-57页 |
·拟南芥遗传转化 | 第57页 |
·转基因植株的表型观察 | 第57-58页 |
·转基因水稻的表型观察 | 第57-58页 |
·转基因拟南芥的表型观察 | 第58页 |
·非生物胁迫对转基因拟南芥种子萌发率的影响 | 第58页 |
·实验结果与分析 | 第58-73页 |
·OsESG1基因的分离 | 第58-61页 |
·OsESG1基因的生物信息学分析 | 第61-66页 |
·OsESG1基因与对应氨基酸序列分析 | 第61-64页 |
·基因OsESG1编码蛋白的功能预测 | 第64-66页 |
·OsESG1基因的组织表达特性分析 | 第66页 |
·水稻OsESG1对ABA、生长素的响应及表达模式分析 | 第66-67页 |
·基因OsESG1植物表达载体的构建 | 第67-68页 |
·水稻OsESG1转基因植株的获得 | 第68-69页 |
·转基因水稻植株的OsESG1表达分析 | 第69-70页 |
·转基因水稻的表型观察及功能分析 | 第70-71页 |
·拟南芥转基因植株的获得 | 第71页 |
·拟南芥转基因植株表型的观察 | 第71-72页 |
·转基因拟南芥在非生物胁迫下萌发率的分析 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-77页 |
·水稻种胚特异表达基因的研究 | 第73-74页 |
·OsESG1基因功能的初步研究 | 第74-77页 |
·本章小结 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
附录一 水稻培养基母液的配置 | 第86页 |
附录二 水稻转化培养基的配置 | 第86-90页 |
附录三 MS培养基母液的配制 | 第90-91页 |
附录四 MS培养基的配制 | 第91-92页 |
硕士期间发表的论文 | 第92-93页 |
致谢 | 第93页 |