摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
中文文摘 | 第4-11页 |
序言 | 第11-20页 |
第1章 花生白藜芦醇合酶基因表达载体构建 | 第20-37页 |
·材料与方法 | 第21-31页 |
·材料 | 第21-23页 |
·菌种、质粒、引物 | 第21-23页 |
·主要药品和生化试剂 | 第23页 |
·培养基 | 第23页 |
·质粒提取液和电泳缓冲液 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·方法 | 第23-31页 |
·菌株pCAMBIA1301和pUCRSH1活化与质粒提取 | 第23-24页 |
·植物双元表达载体pB3RS构建技术路线 | 第24-25页 |
·质粒pCAMBIA1301与pUCRSH1酶切检测 | 第25-26页 |
·质粒pUCRSH1酶切 | 第26页 |
·质粒pCAMBIA1301酶切、补平 | 第26-27页 |
·质粒pCAMBIA1301与pUCRSH1酶切片段纯化 | 第27-28页 |
·质粒pCAMBIA1301与pUCRSH1酶切纯化片段连接 | 第28-29页 |
·E.coli DH5 α感受态细胞制备 | 第29页 |
·重组质粒pB3RS转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
·转化菌株PCR检测和酶切检测 | 第30-31页 |
·菌株保存 | 第31页 |
·结果与分析 | 第31-35页 |
·质粒pCAMBIA1301与pUCRSH1酶切检测 | 第31-32页 |
·质粒pCAMBIA1301与pUCRSH1酶切片段纯化 | 第32-33页 |
·质粒pCAMBIA1301与pUCRSH1酶切片段纯化后电泳 | 第33页 |
·重组质粒pB3RS检测 | 第33-35页 |
·小结和讨论 | 第35-37页 |
第2章 重组质粒pB3RS转化农杆菌 | 第37-45页 |
·材料与方法 | 第37-41页 |
·材料 | 第37-38页 |
·菌种、质粒、引物 | 第37-38页 |
·主要药品和生化试剂 | 第38页 |
·培养基 | 第38页 |
·提取液和电泳缓冲液 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·方法 | 第38-41页 |
·农杆菌LBA4404感受态细胞制备 | 第38-39页 |
·重组质粒pB3RS转化农杆菌 | 第39页 |
·转化菌株重组质粒pB3RS提取 | 第39-40页 |
·重组质粒pB3RS PCR检测 | 第40-41页 |
·重组质粒pB3RS酶切检测 | 第41页 |
·工程菌株保存 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-43页 |
·小结和讨论 | 第43-45页 |
第3章 马铃薯转基因受体系统建立 | 第45-52页 |
·材料与方法 | 第46-49页 |
·材料 | 第46-47页 |
·植物材料 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·培养基母液和生长调节剂母液 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-49页 |
·不同生长调节剂组合对愈伤组织诱导和器官再生的影响 | 第47-49页 |
·培养基配制 | 第47-48页 |
·外植体分离与接种 | 第48-49页 |
·潮霉素选择压测定 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-51页 |
·不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导和器官再生的影响 | 第49-51页 |
·潮霉素对不定芽分化的影响 | 第51页 |
·小结和讨论 | 第51-52页 |
第4章 农杆菌转化程序优化及马铃薯遗传转化 | 第52-58页 |
·材料与方法 | 第52-55页 |
·材料 | 第52-53页 |
·生物材料 | 第52页 |
·主要生化药品 | 第52-53页 |
·培养基 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53页 |
·方法 | 第53-55页 |
·转化程序优化 | 第53-55页 |
·外植体准备 | 第54页 |
·工程菌液制备 | 第54页 |
·菌液浸泡 | 第54页 |
·共培养 | 第54-55页 |
·选择培养 | 第55页 |
·继代选择培养 | 第55页 |
·马铃薯遗传转化 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-57页 |
·根癌农杆菌转化程序优化 | 第55-56页 |
·马铃薯转化株获得 | 第56-57页 |
·小结与分析 | 第57-58页 |
第五章 抗性无性系的PCR检测和Southern杂交鉴定 | 第58-69页 |
·材料与方法 | 第58-64页 |
·材料 | 第58-59页 |
·无性系和质粒 | 第58页 |
·主要生化试剂和试剂盒 | 第58页 |
·主要化学试剂 | 第58-59页 |
·主要仪器 | 第59页 |
·方法 | 第59-64页 |
·植物总DNA提取 | 第59-60页 |
·植物总DNA PCR检测 | 第60页 |
·地高辛标记探针制备 | 第60-61页 |
·RS基因片段PCR扩增 | 第60-61页 |
·扩增片段纯化 | 第61页 |
·探针标记 | 第61页 |
·植物总DNA限制性酶切 | 第61-62页 |
·限制性酶切片段琼脂糖凝胶分离 | 第62页 |
·印迹 | 第62-63页 |
·凝胶处理 | 第62页 |
·印迹 | 第62-63页 |
·杂交 | 第63页 |
·洗膜 | 第63页 |
·免疫检验 | 第63-64页 |
·试剂配制 | 第63页 |
·呈色反应 | 第63-64页 |
·结果与分析 | 第64-67页 |
·抗性无性系总DNA PCR检测 | 第64-65页 |
·重组质粒pB3RS PCR扩增产物纯化与浓缩 | 第65-66页 |
·马铃薯总DNA酶切效果 | 第66页 |
·Southern杂交鉴定 | 第66-67页 |
·小结与讨论 | 第67-69页 |
结论 | 第69-70页 |
附录 符号缩略表 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
福建师范大学学位论文使用授权声明 | 第77页 |