| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-27页 |
| 1.天然蜘蛛丝的研究概况 | 第11-22页 |
| ·蜘蛛丝的力学性能 | 第11-15页 |
| ·再生丝或重组丝的研究 | 第15-20页 |
| ·蜘蛛丝的应用前景 | 第20-22页 |
| 2.理想的组织工程支架材料的特点 | 第22-25页 |
| ·支架的生物相容性和可降解性 | 第22-23页 |
| ·支架的结构和性能 | 第23-24页 |
| ·支架表面的改性在诱导组织形成过程的作用 | 第24-25页 |
| 3.本研究的路线与意义 | 第25-27页 |
| ·本研究的路线 | 第25-26页 |
| ·本研究的意义 | 第26-27页 |
| 第2章 工程菌pNS2／BL21(DE3)的摇瓶培养和高密度发酵 | 第27-41页 |
| 1.材料 | 第27-28页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·培养基与主要溶液 | 第27-28页 |
| 2.方法 | 第28-31页 |
| ·pNS2／BL21(DE3)工程菌的构建 | 第28-29页 |
| ·pNS2／BL21(DE3)的5L高密度发酵 | 第29页 |
| ·重组质粒的保存率检测 | 第29-30页 |
| ·摇瓶和发酵条件下不同单因素对蛋白表达的影响 | 第30页 |
| ·分析方法 | 第30-31页 |
| 3.结果 | 第31-39页 |
| ·pNS2／BL21(DE3)工程菌的构建 | 第31-32页 |
| ·重新转化的pNS2／BL21(DE3)的5L高密度发酵 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的保存率 | 第33-34页 |
| ·对工程菌pNS2／BL21(DE3)蛋白表达的几个影响因素 | 第34-39页 |
| 4.讨论 | 第39-41页 |
| 第3章 基因重组蛛丝蛋白规模化纯化的优化 | 第41-53页 |
| 1.材料 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·常用溶液 | 第41页 |
| 2.方法 | 第41-42页 |
| ·纯化过程中的蛋白损失 | 第41页 |
| ·超声破碎细菌过程的优化 | 第41-42页 |
| ·调pH值及沉淀时间 | 第42页 |
| ·加热条件对纯化的影响 | 第42页 |
| ·硫酸铵沉淀的影响 | 第42页 |
| 3.结果 | 第42-51页 |
| ·纯化步骤和目的蛋白的损失 | 第42-43页 |
| ·超声的优化 | 第43-47页 |
| ·调酸 | 第47-49页 |
| ·加热的优化 | 第49-51页 |
| 4.讨论 | 第51-53页 |
| 第4章 重组蛛丝蛋白的人工纺丝 | 第53-63页 |
| 1.材料 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| 2.方法 | 第53-54页 |
| ·重组蛛丝蛋白(pNS2)溶剂的选择 | 第53页 |
| ·湿态纺丝法 | 第53页 |
| ·湿态纺丝法中各因素的影响 | 第53-54页 |
| ·丝蛋白的电纺丝 | 第54页 |
| ·分析方法 | 第54页 |
| 3.结果 | 第54-61页 |
| ·重组蛋白的溶剂 | 第54-55页 |
| ·湿态纺丝 | 第55页 |
| ·纺丝的影响因素 | 第55-60页 |
| ·电纺法制备重组蛋白纤维 | 第60-61页 |
| 4.讨论 | 第61-63页 |
| 第5章 重组蛛丝蛋白共混膜的制备及研究 | 第63-75页 |
| 1.材料 | 第63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器 | 第63页 |
| 2.方法 | 第63-65页 |
| ·NaCl致孔制膜 | 第63页 |
| ·制膜工艺的探讨 | 第63页 |
| ·重组蛋白和壳聚糖的共混 | 第63-64页 |
| ·重组蛋白和丙烯酸树脂的共混 | 第64页 |
| ·分析方法 | 第64-65页 |
| 3.结果 | 第65-73页 |
| ·致孔剂对多孔膜孔径特点的影响 | 第65-66页 |
| ·制膜工艺 | 第66-67页 |
| ·重组蛋白和壳聚糖的共混 | 第67-70页 |
| ·重组蛋白和丙烯酸树脂的共混 | 第70-73页 |
| 4.讨论 | 第73-75页 |
| 第6章 重组蛛丝蛋白支架材料的体外降解行为和细胞相容性实验 | 第75-91页 |
| 1.材料 | 第75页 |
| ·主要试剂 | 第75页 |
| ·主要仪器 | 第75页 |
| 2.方法 | 第75-79页 |
| ·重组蛛丝蛋白支架的体外水解 | 第75页 |
| ·重组蛛丝蛋白支架的体外酶解 | 第75-76页 |
| ·支架浸泡去小分子实验 | 第76页 |
| ·支架中残余内毒素的检测和去除 | 第76-77页 |
| ·CaCo2细胞的传代培养 | 第77-78页 |
| ·CaCo2细胞的冻存 | 第78页 |
| ·支架材料的浸提实验 | 第78页 |
| ·支架复合细胞 | 第78-79页 |
| ·分析方法 | 第79页 |
| 3.结果 | 第79-87页 |
| ·体内水解和酶解 | 第79-80页 |
| ·去小分子实验 | 第80-81页 |
| ·内毒素的检测和去除 | 第81-83页 |
| ·支架浸提液对细胞的影响 | 第83-85页 |
| ·支架材料复合细胞 | 第85-87页 |
| 4.讨论 | 第87-91页 |
| 结论 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 个人简历 | 第102-103页 |
| 福建师范大学学位论文使用授权声明 | 第103页 |
