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鳗弧菌毒力相关基因fatA的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要第1-11页
综述鳗弧菌毒力作用研究进展第11-23页
 1 弧菌与弧菌病第11页
 2 鳗弧菌与出血性败血病第11-12页
 3 鳗弧菌的疫苗研制与鳗弧菌病的治疗第12-14页
 4 鳗弧菌的毒力系统第14页
 5 铁吸收系统的分子生物学研究第14-21页
 6 展望第21-23页
1 前言第23-25页
2 材料与方法第25-42页
   ·材料第25-29页
     ·菌株与质粒第25页
     ·实验动物第25页
     ·主要实验仪器第25-26页
     ·酶及抗生素第26页
     ·PCR 相关试剂第26-27页
     ·DNA 琼脂糖凝胶电泳相关试剂第27页
     ·DNA 片段凝胶回收系统第27页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相关试剂第27页
     ·考马斯亮兰染色相关试剂第27-28页
     ·蛋白纯化常用试剂及试剂盒第28页
     ·免疫动物相关试剂第28页
     ·蛋白印迹相关试剂第28页
     ·培养基第28-29页
     ·缓冲液第29页
   ·方法第29-42页
     ·鳗弧菌菌株MVM425 的生长曲线的测定第29-30页
     ·鳗弧菌菌株MVM425 的毒力相关基因fatA 的克隆第30-36页
     ·融合蛋白的表达及纯化第36-39页
     ·抗血清的制备第39-42页
3 结果第42-57页
   ·鳗弧菌菌株MVM425 的生长曲线的测定第42-43页
     ·鳗弧菌菌株MVM425 的标准曲线的测定结果第42页
     ·鳗弧菌菌株MVM425 的生长曲线的测定结果第42-43页
   ·鳗弧菌菌株MVM425 的毒力相关基因FATA 的克隆第43-52页
     ·鳗弧菌菌株MVM425 中pE181 质粒的提取第43页
     ·目的片段的PCR 扩增及纯化第43-44页
     ·纯化后PCR 产物与表达载体pET-28a(+)的双酶切及纯化第44-45页
     ·阳性重组质粒的构建、筛选及鉴定第45-51页
     ·阳性重组质粒转化表达菌BL21(DE3)第51-52页
   ·融合蛋白的表达及纯化第52-55页
     ·大肠杆菌菌株BL21(DE3)中融合蛋白的诱导表达第52-53页
     ·融合蛋白的表达形式第53页
     ·从包涵体中初步纯化表达蛋白第53-54页
     ·变性条件下组氨酸亲和层析柱纯化目的蛋白第54-55页
   ·抗血清的制备第55-57页
     ·抗血清效价的测定第55页
     ·蛋白质印迹第55-57页
4 讨论第57-61页
5 结论第61-62页
6 参考文献第62-70页
致谢第70-71页
攻读硕士学位期间发表文章第71页

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