英文缩略词 | 第8-11页 |
中文摘要 | 第11-14页 |
Abstract | 第14-17页 |
引言 | 第18-22页 |
第一部分 逍遥散对小鼠结肠癌转移的影响 | 第22-32页 |
1 实验材料 | 第22-24页 |
1.1 细胞株 | 第22页 |
1.2 实验动物 | 第22-23页 |
1.3 中药制备 | 第23页 |
1.4 主要试剂药品 | 第23页 |
1.5 主要仪器设备 | 第23-24页 |
1.6 主要试剂的配备 | 第24页 |
2 实验方法 | 第24-27页 |
2.1 CT-26Luc细胞培养 | 第24-26页 |
2.2 尾静脉接种CT-26-Luc细胞 | 第26页 |
2.3 建立结肠癌尾静脉转移瘤模型 | 第26-27页 |
2.4 动物活体成像技术 | 第27页 |
2.5 统计学处理 | 第27页 |
3 实验结果 | 第27-31页 |
3.1 小鼠体重变化及生存质量 | 第27-28页 |
3.2 逍遥散明显抑制结肠癌的成瘤及转移 | 第28-29页 |
3.3 逍遥散提高小鼠脾脏和血液中M1型巨噬细胞的比例 | 第29-31页 |
4 分析与讨论 | 第31-32页 |
第二部分 逍遥散对巨噬细胞表型的影响 | 第32-46页 |
1 实验材料 | 第32-33页 |
1.1 细胞株 | 第32页 |
1.2 主要试剂药品 | 第32-33页 |
1.3 主要仪器设备 | 第33页 |
1.4 主要试剂的配备 | 第33页 |
2 实验方法 | 第33-40页 |
2.1 THP-1细胞培养 | 第33-35页 |
2.2 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第35-36页 |
2.3 荧光定量PCR | 第36-39页 |
2.4 流式细胞术 | 第39页 |
2.5 细胞毒性试验 | 第39页 |
2.6 统计学处理 | 第39-40页 |
3 实验结果 | 第40-45页 |
3.1 M1型巨噬细胞模型的建立 | 第40-42页 |
3.2 逍遥散增加M1型巨噬细胞对结肠癌细胞HCT116的杀伤 | 第42-44页 |
3.3 逍遥散增加M1型巨噬细胞的极化 | 第44-45页 |
4 分析与讨论 | 第45-46页 |
第三部分 β肾上腺素通路调控M1型巨噬细胞极化作用 | 第46-57页 |
1 实验材料 | 第46-48页 |
1.1 实验样品 | 第46-47页 |
1.2 主要试剂 | 第47页 |
1.3 主要仪器设备 | 第47页 |
1.4 实验试剂配制 | 第47-48页 |
2 实验方法 | 第48-50页 |
2.1 细胞培养 | 第48页 |
2.2 荧光定量PCR | 第48页 |
2.3 细胞毒性试验 | 第48页 |
2.4 流式细胞术 | 第48-49页 |
2.5 慢病毒转染THP-1细胞 | 第49页 |
2.6 统计学处理 | 第49-50页 |
3 实验结果 | 第50-56页 |
3.1 β 肾上腺素受体在THP-1、M0、M1 中的表达变化 | 第50-51页 |
3.2 β肾上腺素受体抑制剂和激动剂及逍遥散对M1型巨噬细胞功能和表型的影响 | 第51-54页 |
3.3 慢病毒转染沉默THP-1 细胞ADRB2 基因 | 第54-55页 |
3.4 ADRB2基因沉默后M1型巨噬细胞标志物的基因表达明显提高 | 第55-56页 |
4 分析与讨论 | 第56-57页 |
第四部分 逍遥散通过β肾上腺素通路调控M1型巨噬细胞极化的分子机制研究 | 第57-71页 |
1 实验材料 | 第57页 |
2 试验方法 | 第57-62页 |
2.1 细胞内Ca~(2+)浓度的检测 | 第57-58页 |
2.2 荧光定量PCR | 第58页 |
2.3 细胞毒性试验 | 第58-59页 |
2.4 Western Blot蛋白免疫印迹法 | 第59-61页 |
2.5 慢病毒转染THP-1细胞 | 第61-62页 |
3 实验结果 | 第62-70页 |
3.1 逍遥散对巨噬细胞β肾上腺素受体表达的影响 | 第62-63页 |
3.2 逍遥散能逆转肾上腺素受体激动剂对巨噬细胞的影响 | 第63-65页 |
3.3 逍遥散对ADRB2沉默的M1型巨噬细胞无明显影响 | 第65-67页 |
3.4 逍遥散影响THP-1 细胞ADRB2 受体的表达 | 第67页 |
3.5 逍遥散不影响THP-1 细胞ADRB2 受体的活化 | 第67-68页 |
3.6 ADRB2 沉默后对PTEN/PI3K/AKT/RICTOR信号通路的影响 | 第68-70页 |
4 分析与讨论 | 第70-71页 |
结论 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-76页 |
附录 | 第76-84页 |