中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
第一篇 文献综述 | 第9-42页 |
第一章 生长激素(Growth Hormone) | 第9-32页 |
1. GH研究历史与基因结构 | 第9-17页 |
·GH表达的调控 | 第10-13页 |
·GH的表面结构 | 第13-14页 |
·GH的生物学功能 | 第14-15页 |
·GH片段与类似物 | 第15-17页 |
2. GHR与生长激素结合蛋白(GHBP) | 第17-25页 |
·细胞因子受体超家族 | 第17-18页 |
·GHR结构 | 第18-19页 |
·GHBP的功能与调控 | 第19-20页 |
·GHR的组织分布 | 第20页 |
·GHR基因结构 | 第20-23页 |
·GHR“敲除”小鼠 | 第23页 |
·GHR基因表达的调控 | 第23-25页 |
3. GH介导的信号转导 | 第25-32页 |
·GH/GHR的二聚作用 | 第25-27页 |
·JAK | 第27-28页 |
·转录的信号转导物与激活子(STATS) | 第28-29页 |
·细胞因子信号转导的抑制因子(SOCS) | 第29-31页 |
·GH激活的其他信号转导路径 | 第31-32页 |
第二章 大熊猫的繁殖与生长激素 | 第32-34页 |
第三章 转基因植物工程与生产有用蛋白 | 第34-42页 |
1. 转基因植物表达生物活性蛋白 | 第34-36页 |
·转基因植物表达药用蛋白 | 第34页 |
·转基因植物表达抗体 | 第34-35页 |
·转基因植物表达抗原 | 第35页 |
·转基因植物表达其他医用相关蛋白 | 第35-36页 |
2. 转基因受体植物 | 第36-39页 |
·烟草 | 第36-37页 |
·水培烟草的根分泌物 | 第36页 |
·烟草叶绿体基因工程 | 第36页 |
·烟草细胞悬浮培养 | 第36-37页 |
·谷物类 | 第37-38页 |
·水稻细胞悬浮培养 | 第37页 |
·水稻、小麦植物 | 第37页 |
·玉米 | 第37-38页 |
·水果及蔬菜 | 第38-39页 |
·马铃薯 | 第38-39页 |
·番茄 | 第39页 |
·莴苣 | 第39页 |
3. 转基因植物表达生物活性蛋白的基本方法 | 第39-40页 |
·瞬时表达系统 | 第39-40页 |
·稳定表达系统 | 第40页 |
4. 存在的问题 | 第40-42页 |
第二篇 研究报告 | 第42-69页 |
第四章 pCAMBIA13011-GH基因高效表达载体的构建 | 第42-52页 |
1. 材料和方法 | 第42-48页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·质粒与菌株 | 第42-43页 |
·酶及主要试剂 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-48页 |
·目的基因片段的获得 | 第43-46页 |
·pUC18-GH/JM-109的培养和收集 | 第43页 |
·细菌的裂解 | 第43-44页 |
·质粒 DNA的纯化 | 第44页 |
·菌种保存 | 第44页 |
·pUC18-GH的PCR扩增 | 第44-45页 |
·PCR扩增产物的双酶切 | 第45页 |
·DNA酶切片段回收 | 第45-46页 |
·pCAMBIA13011载体片段的获得 | 第46页 |
·pCAMBIA13011/JM-109的培养 | 第46页 |
·pCAMBIA13011 DNA的提取 | 第46页 |
·pCAMBIA13011的双酶切 | 第46页 |
·pCAMBIA13011酶切产物的电泳及回收 | 第46页 |
·目的基因片段与表达载体片段的连接 | 第46-47页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第47页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第47页 |
·重组质粒pCA-GH的测序 | 第47-48页 |
2. 结果和分析 | 第48-51页 |
·pUC18-GH DNA的PCR及双酶切 | 第48页 |
·pCA-GH表达载体的构建 | 第48-49页 |
·重组质粒pCA-GH/JM-109的PCR及酶切鉴定 | 第49-50页 |
·测序结果 | 第50-51页 |
3. 讨论 | 第51-52页 |
第五章 Am-GH基因农杆菌介导的烟草转化 | 第52-69页 |
1. 材料与方法 | 第52-61页 |
·实验材料 | 第52页 |
·实验方法 | 第52-61页 |
·农杆菌的培养 | 第52页 |
·DNA直接导入农杆菌 | 第52-53页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第52-53页 |
·转化 | 第53页 |
·回转化鉴定 | 第53页 |
·农杆菌介导的转化 | 第53-54页 |
·受体材料的获得 | 第53页 |
·筛选培养基选择压力的确定 | 第53页 |
·叶盘法转化烟草 | 第53-54页 |
·CTAB法大量提取烟草基因组DNA | 第54页 |
·PCR检测转基因植株 | 第54-55页 |
·双酶切鉴定转基因植株 | 第55页 |
·转基因植株根系的GUS组织化学鉴定 | 第55-56页 |
·转基因植株的植物学形态观察 | 第56页 |
·转基因植株的Southern检测 | 第56-61页 |
·DNA样品的准备 | 第56-57页 |
·杂交探针制备 | 第57-58页 |
·杂交膜的制备 | 第58-59页 |
·核酸杂交 | 第59-60页 |
·检测 | 第60-61页 |
2. 结果和分析 | 第61-65页 |
·筛选压的确定 | 第61页 |
·转化植株的再生 | 第61-62页 |
·转基因烟草植株的获得和组织化学检测 | 第62-63页 |
·转化植株的 PCR鉴定 | 第63页 |
·植物学形态观察 | 第63-64页 |
·转基因烟草的Southern Blotting | 第64-65页 |
·转基因烟草的栽培与观察 | 第65页 |
3. 讨论 | 第65-69页 |
·影响根癌农杆菌转化效率的一些因素 | 第65-69页 |
·组培系统 | 第65页 |
·细菌的状态和浓度 | 第65-66页 |
·筛选浓度 | 第66页 |
·农杆菌的抑制 | 第66页 |
·共培养方式 | 第66-69页 |
参考文献(references) | 第69-82页 |
附录A 本文所用缩略词一英中文对照 | 第82-83页 |
附录B 主要培养基母液、缓冲液配方及配制方法 | 第83-87页 |
致谢 | 第87页 |