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大熊猫生长激素基因的植物表达载体构建及其在烟草中的遗传表达

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-9页
第一篇 文献综述第9-42页
 第一章 生长激素(Growth Hormone)第9-32页
  1. GH研究历史与基因结构第9-17页
   ·GH表达的调控第10-13页
   ·GH的表面结构第13-14页
   ·GH的生物学功能第14-15页
   ·GH片段与类似物第15-17页
  2. GHR与生长激素结合蛋白(GHBP)第17-25页
   ·细胞因子受体超家族第17-18页
   ·GHR结构第18-19页
   ·GHBP的功能与调控第19-20页
   ·GHR的组织分布第20页
   ·GHR基因结构第20-23页
   ·GHR“敲除”小鼠第23页
   ·GHR基因表达的调控第23-25页
  3. GH介导的信号转导第25-32页
   ·GH/GHR的二聚作用第25-27页
   ·JAK第27-28页
   ·转录的信号转导物与激活子(STATS)第28-29页
   ·细胞因子信号转导的抑制因子(SOCS)第29-31页
   ·GH激活的其他信号转导路径第31-32页
 第二章 大熊猫的繁殖与生长激素第32-34页
 第三章 转基因植物工程与生产有用蛋白第34-42页
  1. 转基因植物表达生物活性蛋白第34-36页
   ·转基因植物表达药用蛋白第34页
   ·转基因植物表达抗体第34-35页
   ·转基因植物表达抗原第35页
   ·转基因植物表达其他医用相关蛋白第35-36页
  2. 转基因受体植物第36-39页
   ·烟草第36-37页
     ·水培烟草的根分泌物第36页
     ·烟草叶绿体基因工程第36页
     ·烟草细胞悬浮培养第36-37页
   ·谷物类第37-38页
     ·水稻细胞悬浮培养第37页
     ·水稻、小麦植物第37页
     ·玉米第37-38页
   ·水果及蔬菜第38-39页
     ·马铃薯第38-39页
     ·番茄第39页
     ·莴苣第39页
  3. 转基因植物表达生物活性蛋白的基本方法第39-40页
   ·瞬时表达系统第39-40页
   ·稳定表达系统第40页
  4. 存在的问题第40-42页
第二篇 研究报告第42-69页
 第四章 pCAMBIA13011-GH基因高效表达载体的构建第42-52页
  1. 材料和方法第42-48页
   ·实验材料第42-43页
     ·质粒与菌株第42-43页
     ·酶及主要试剂第43页
   ·实验方法第43-48页
     ·目的基因片段的获得第43-46页
       ·pUC18-GH/JM-109的培养和收集第43页
       ·细菌的裂解第43-44页
       ·质粒 DNA的纯化第44页
       ·菌种保存第44页
       ·pUC18-GH的PCR扩增第44-45页
       ·PCR扩增产物的双酶切第45页
       ·DNA酶切片段回收第45-46页
     ·pCAMBIA13011载体片段的获得第46页
       ·pCAMBIA13011/JM-109的培养第46页
       ·pCAMBIA13011 DNA的提取第46页
       ·pCAMBIA13011的双酶切第46页
       ·pCAMBIA13011酶切产物的电泳及回收第46页
     ·目的基因片段与表达载体片段的连接第46-47页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第47页
     ·连接产物转化大肠杆菌第47页
     ·重组质粒pCA-GH的测序第47-48页
  2. 结果和分析第48-51页
   ·pUC18-GH DNA的PCR及双酶切第48页
   ·pCA-GH表达载体的构建第48-49页
   ·重组质粒pCA-GH/JM-109的PCR及酶切鉴定第49-50页
   ·测序结果第50-51页
  3. 讨论第51-52页
 第五章 Am-GH基因农杆菌介导的烟草转化第52-69页
  1. 材料与方法第52-61页
   ·实验材料第52页
   ·实验方法第52-61页
     ·农杆菌的培养第52页
     ·DNA直接导入农杆菌第52-53页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第52-53页
       ·转化第53页
       ·回转化鉴定第53页
     ·农杆菌介导的转化第53-54页
       ·受体材料的获得第53页
       ·筛选培养基选择压力的确定第53页
       ·叶盘法转化烟草第53-54页
     ·CTAB法大量提取烟草基因组DNA第54页
     ·PCR检测转基因植株第54-55页
     ·双酶切鉴定转基因植株第55页
     ·转基因植株根系的GUS组织化学鉴定第55-56页
     ·转基因植株的植物学形态观察第56页
     ·转基因植株的Southern检测第56-61页
       ·DNA样品的准备第56-57页
       ·杂交探针制备第57-58页
       ·杂交膜的制备第58-59页
       ·核酸杂交第59-60页
       ·检测第60-61页
  2. 结果和分析第61-65页
   ·筛选压的确定第61页
   ·转化植株的再生第61-62页
   ·转基因烟草植株的获得和组织化学检测第62-63页
   ·转化植株的 PCR鉴定第63页
   ·植物学形态观察第63-64页
   ·转基因烟草的Southern Blotting第64-65页
   ·转基因烟草的栽培与观察第65页
  3. 讨论第65-69页
   ·影响根癌农杆菌转化效率的一些因素第65-69页
     ·组培系统第65页
     ·细菌的状态和浓度第65-66页
     ·筛选浓度第66页
     ·农杆菌的抑制第66页
     ·共培养方式第66-69页
参考文献(references)第69-82页
附录A 本文所用缩略词一英中文对照第82-83页
附录B 主要培养基母液、缓冲液配方及配制方法第83-87页
致谢第87页

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