| 第一章 前言 | 第1-21页 |
| 1 植物抗病分子机制及抗病基因工程 | 第8-13页 |
| ·植物抗病分子机制 | 第8-10页 |
| ·植物抗病基因的克隆及结构、功能 | 第10-11页 |
| ·植物抗病过程中的信号传导 | 第11-12页 |
| ·植物抗病基因工程 | 第12-13页 |
| 2 植物系统获得抗性，SAR | 第13-17页 |
| ·SAR信号的本质 | 第14-15页 |
| ·水杨酸是SAR的重要信号分子 | 第14页 |
| ·脂质信号分子 | 第14-15页 |
| ·NPR1依赖的信号途径及下游PR基因 | 第15-17页 |
| ·NPR1依赖的SA信号途径 | 第15-16页 |
| ·NPR1下游相关基因 | 第16-17页 |
| 3 水稻抗病基因工程 | 第17-18页 |
| 4 RNA干涉技术是基因功能研究的有力手段 | 第18-19页 |
| 5 本研究的目的 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-38页 |
| 1 质粒与菌株 | 第21页 |
| 2 水稻品种 | 第21页 |
| 3 培养基和培养条件 | 第21-24页 |
| ·培养基 | 第21-24页 |
| ·LB培养基 | 第21页 |
| ·SOC培养基 | 第21-22页 |
| ·YEB培养基 | 第22页 |
| ·OB培养基 | 第22页 |
| ·淀粉培养基 | 第22页 |
| ·纯琼脂培养基 | 第22-23页 |
| ·AAM培养基 | 第23-24页 |
| ·培养条件 | 第24页 |
| ·水稻稻瘟病菌分生孢子的制备 | 第24页 |
| ·菌种保存 | 第24页 |
| 4 抗生素及其使用浓度 | 第24-25页 |
| 5 常用溶液及缓冲液 | 第25页 |
| 6 质粒DNA的提取 | 第25-26页 |
| 7 DNA沉淀 | 第26页 |
| 8 DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第26-27页 |
| 9 DNA片段的酶切、回收、连接和转化 | 第27页 |
| 10 PCR反应体系及反应条件 | 第27-28页 |
| ·本研究中使用的所有引物 | 第27页 |
| ·PCR反应条件 | 第27-28页 |
| ·马铃薯GA20氧化酶基因第一个内含子序列的扩增 | 第27页 |
| ·SDKB基因全长cDNA667-1088核苷酸的扩增 | 第27-28页 |
| ·对转基因植株外源基因的PCR检测 | 第28页 |
| ·荧光定量PCR中各基因片段的扩增 | 第28页 |
| ·常规PCR反应体系 | 第28页 |
| 11 植物总DNA的制备 | 第28-30页 |
| ·碱提取法(制备用于PCR检测的DNA粗提液) | 第28-29页 |
| ·CTAB法(制备用于Southern杂交的植物总DNA) | 第29-30页 |
| 12 Southern杂交 | 第30-32页 |
| ·Southern转移 | 第30页 |
| ·探针标记——随机引物标记 | 第30-31页 |
| ·杂交 | 第31-32页 |
| ·预杂交 | 第31页 |
| ·杂交 | 第31页 |
| ·洗膜 | 第31页 |
| ·放射自显影 | 第31-32页 |
| 13 植物总RNA的提取 | 第32页 |
| 14 以水稻总RNA为模板合成cDNA第一链 | 第32-33页 |
| 15 实时荧光定量PCR | 第33-35页 |
| ·实时荧光定量PCR反应的建立 | 第33-34页 |
| ·实时荧光定量PCR反应条件 | 第34页 |
| ·实时荧光定量PCR实验数据的处理 | 第34-35页 |
| 16 用于转化水稻的根癌农杆菌菌株的构建 | 第35页 |
| 17 RNA干涉水稻表达载体对水稻的转化 | 第35-36页 |
| ·水稻组织培养和转化培养基 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻转化 | 第36页 |
| 18 转基因水稻对水稻白叶枯病、稻瘟病的抗性检测 | 第36-38页 |
| ·转基因水稻对水稻白叶枯病的抗性检测 | 第36页 |
| ·转基因水稻对水稻稻瘟病的抗性检测 | 第36-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-45页 |
| 1 RNA干涉水稻表达载体pCAMBIA1301-ihp的构建 | 第38-39页 |
| 2 RNA干涉水稻表达载体pCAMBIA1301-ihp对桂99的转化 | 第39-40页 |
| 3 潮霉素抗性再生植株及其T1代植株的分子鉴定 | 第40-41页 |
| ·潮霉素抗性再生苗的PCR鉴定 | 第40页 |
| ·潮霉素抗性株系T1代植株的Southern杂交分析 | 第40-41页 |
| 4 T1代转基因植株中SDKB基因表达明显受到抑制 | 第41-42页 |
| 5 转基因植株对水稻白叶枯病、稻瘟病的敏感性显著增加 | 第42-45页 |
| ·转基因植株对水稻白叶枯病的敏感性显著增加 | 第42-43页 |
| ·转基因植株对水稻稻瘟病的敏感性显著增加 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
