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小鼠树突状细胞瘤转移相关基因的研究和生物信息学分析

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-15页
第一章 前言第15-28页
   ·研究肿瘤转移的意义第15-16页
   ·高通量筛选与肿瘤转移相关基因的方法第16-22页
     ·差异显示技术第17页
     ·基因表达系列分析(SAGE)第17-18页
     ·基因表达芯片(DNA 微阵列)第18-22页
   ·基因表达分析原则和方法第22-23页
   ·小鼠基因表达的调控第23页
     ·DNA甲基化第23页
     ·转录因子的调控第23页
     ·组蛋白的甲基化或乙酰化第23页
   ·基因表达与转录因子的生物信息学分析第23-24页
   ·Affymetrix基因表达芯片的详细操作规程(见附录一)第24页
   ·我们的研究思路及本论文的结构第24-26页
 参考文献第26-28页
第二章 小鼠树突状细胞瘤转移相关基因的研究第28-47页
   ·引言第28页
   ·材料和方法第28-33页
     ·主要试剂第28-29页
     ·试验仪器第29页
     ·细胞培养的方法和步骤第29页
     ·小鼠树突状细胞瘤DD1 和DG6 全基因组表达谱和统计学处理第29-30页
     ·逆转录PCR(RT-PCR)验证第30-31页
     ·细胞免疫荧光(蛋白质水平)的验证第31-33页
       ·免疫荧光技术简介第31-32页
       ·免疫荧光细胞染色的步骤第32-33页
   ·结果第33-42页
     ·基因表达芯片的质量控制第33-34页
     ·DD1 和DG6 细胞株全基因组表达差异的比较第34-36页
     ·DD1 和DG6 细胞株显著差异表达的基因GO 分类第36-40页
     ·部分DD1 和DG6 细胞株中表达差异显著基因的RT-PCR 验证第40-41页
     ·部分DD1 和DG6 差异基因的蛋白质水平(细胞免疫荧光)验证第41-42页
   ·讨论第42-45页
 参考文献第45-47页
第三章 DNA 甲基化与小鼠树突状细胞瘤的基因表达第47-60页
   ·引言第47-48页
   ·小鼠 DD1 和 DG6 细胞基因组 DNA 的提取和纯化第48-50页
     ·试验器材第48-49页
     ·基因组 DNA 抽提原理第49页
     ·操作步骤第49-50页
   ·小鼠 DD1 和 DG6 细胞基因组 DNA 的转化第50-51页
     ·试验器材第50页
     ·试验步骤第50-51页
   ·PCR 扩增第51-52页
     ·试验器材第51页
     ·引物设计与 PCR 扩增第51-52页
   ·结果与与讨论第52-58页
     ·PCR结果第52页
     ·测序结果第52-58页
   ·结论第58页
 参考文献第58-60页
第四章 小鼠树突状细胞瘤基因表达谱分析第60-84页
   ·引言第60-62页
   ·小鼠树突状细胞发育相关基因的表达数据处理第62-68页
     ·数据下载与预处理第62-63页
     ·数据标准化第63-67页
     ·数据筛选第67-68页
   ·分层聚类分析、SOM聚类分析和主成分分析第68-74页
     ·聚类分析简介第69页
     ·分层(层次)聚类法第69-70页
     ·自组织映射神经网络(SOM)聚类第70-73页
     ·主成分分析第73-74页
   ·结果与讨论第74-82页
     ·DC 细胞瘤和 DC 发育相关细胞的分层聚类分析第74页
     ·DC 细胞瘤和 DC 发育相关细胞的主成分分析第74-78页
     ·DC细胞瘤和DC发育相关细胞的最近邻分析第78-79页
     ·DC细胞瘤和DC发育相关细胞的SOM聚类分析第79-82页
 参考文献第82-84页
第五章 含有同源异型结构的转录因子的生物信息学分析第84-101页
   ·同源异型基因在转移潜能不同的小鼠树突状细胞瘤中表达存在差异第84-86页
   ·同源异型结构的序列及 DNA 结合位点特征第86-90页
     ·数据来源第86页
     ·方法第86-87页
     ·结果第87-90页
   ·复合同源异型结构的类型、位置及结合的 DNA 序列特点第90-96页
     ·复合同源异型结构的类型第90-91页
     ·复合同源异型结构相对 HOX 的位置第91-92页
     ·复合同源异型结构的 DNA 结合序列的特点第92-93页
     ·复合同源异型框的功能第93-96页
   ·复合同源异型框与恶性肿瘤的关系第96-98页
   ·总结第98页
 参考文献第98-101页
第六章 利用DNA启动子区序列的同源性寻找转录因子结合位点第101-108页
   ·数据来源第101页
   ·方法第101-102页
     ·人类和小鼠、大鼠 NDF1、IPF1 和 HNF4 蛋白氨基酸序列的比对第101页
     ·人类、小鼠、大鼠 NDF1、IPF1 和 HNF4 结构域分析第101-102页
     ·人类、小鼠、大鼠胰岛素基因Promoter区的核苷酸序列比较第102页
     ·转录因子在胰岛素基因启区与 DNA 的可能结合位点分析第102页
   ·结果第102-105页
     ·人类和小鼠、大鼠 NDF1、IPF1 和 HNF4 氨基酸序列的两两比对第102页
     ·人类、小鼠、大鼠 NDF1、IPF1 和 HNF4 的结构域第102-103页
     ·人类、小鼠、大鼠胰岛素基因 Promoter 区的核苷酸序列多重比对第103-104页
     ·转录因子在胰岛素基因 Promoter 区与 DNA 的可能结合位点分析第104-105页
   ·讨论第105-106页
 参考文献第106-108页
总结第108-109页
附录一 基因表达芯片的试验操作方案第109-122页
附录二 小鼠树突状细胞瘤及高转移和低转移细胞株的鉴定第122-126页
攻读博士学位期间发表的论文第126-127页
致谢第127页

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