引言 | 第1-16页 |
实验一 含药血清芍药苷浓度测定及其制备 | 第16-27页 |
一、实验材料 | 第16页 |
(一) 实验仪器 | 第16页 |
(二) 药品与试剂 | 第16页 |
(三) 实验动物 | 第16页 |
二、实验方法 | 第16-19页 |
(一) 含药血清芍药苷含量测定 | 第16-18页 |
1.色谱条件 | 第16-17页 |
2.标准液配制 | 第17页 |
3.血清样品预处理方法 | 第17页 |
4.芍药苷标准曲线制备 | 第17页 |
5.日内、日间精密度测定 | 第17页 |
6.回收率测定 | 第17页 |
7.检测限测定 | 第17页 |
8.血清样品制备方法 | 第17-18页 |
(二) 含药血清制备 | 第18-19页 |
1.造模方法 | 第18页 |
2.分组与给药 | 第18-19页 |
三、实验结果 | 第19-23页 |
(一) HPLC色谱图 | 第19页 |
(二) 标准曲线 | 第19-20页 |
(三) 日内、日间精密度 | 第20-21页 |
(四) 回收率 | 第21-22页 |
(五) 检测限 | 第22页 |
(六) 含药血清中芍药苷浓度随时间的变化 | 第22-23页 |
四、讨论 | 第23-27页 |
(一) RP-HPLC测定方法确定 | 第23页 |
(二) 指标选择 | 第23页 |
(三) 实验动物模型选择 | 第23-24页 |
(四) 给药剂量确定 | 第24-25页 |
(五) 取血方案确定 | 第25页 |
(六) 血清处理 | 第25-26页 |
(七) 含药血清芍药苷浓度随时间的变化 | 第26-27页 |
实验二 胚胎大鼠大脑皮层神经元体外原代培养 | 第27-34页 |
一、实验材料 | 第27页 |
(一) 实验仪器 | 第27页 |
(二) 药物与试剂 | 第27页 |
(三) 实验动物 | 第27页 |
二、实验方法 | 第27-29页 |
(一) 大鼠大脑皮层神经元培养 | 第27-29页 |
1.培养方法 | 第27-28页 |
2.吉姆萨染色观察神经元形态 | 第28页 |
3.免疫荧光染色法鉴定神经元 | 第28-29页 |
三、实验结果 | 第29-30页 |
(一) 神经元形态学观察 | 第29-30页 |
(二) MAP_2标记鉴别神经元 | 第30页 |
四、讨论 | 第30-34页 |
(一) 神经元鉴别方法 | 第30-31页 |
(二) 影响大鼠脑皮层神经元体外原代培养因素 | 第31-34页 |
1.大鼠胎龄 | 第31页 |
2.胰蛋白酶消化 | 第31-32页 |
3.神经元纯化 | 第32页 |
4.培养条件 | 第32-33页 |
5.杂质细胞干扰 | 第33-34页 |
实验三 含药血清对体外原代培养大鼠大脑皮层神经元活力及5-HT1A受体影响 | 第34-42页 |
一、实验材料 | 第34页 |
(一) 实验仪器 | 第34页 |
(二) 药物与试剂 | 第34页 |
(三) 实验动物 | 第34页 |
二、实验方法 | 第34-36页 |
(一) 胚胎大鼠大脑皮层神经元培养 | 第34页 |
(二) 神经元活力测定 | 第34-35页 |
(三) 免疫荧光细胞化学染色法测定神经元5-HT1A受体含量与分布 | 第35-36页 |
1.改良免疫荧光染色法测定神经元5-HT1A受体含量 | 第35-36页 |
2.碘化丙碇标记神经元细胞核 | 第36页 |
三、实验结果 | 第36-38页 |
(一) 神经元活力测定结果 | 第36-37页 |
(二) 体外原代培养大鼠大脑皮层神经元5-HT1A受体的变化 | 第37-38页 |
1.体外原代培养大鼠大脑皮层神经元5-HT1A受体分布 | 第37页 |
2.体外原代培养大鼠大脑皮层神经元5-HT1A受体表达量影响 | 第37-38页 |
四、讨论 | 第38-42页 |
(一) 反应系中血清添加量 | 第38-39页 |
(二) 含药血清对体外原代培养大鼠大脑皮层神经元活力影响 | 第39页 |
(三) 含药血清对体外原代培养大鼠大脑皮层神经元5-HT1A受体表达影响 | 第39-42页 |
讨论 | 第42-46页 |
一、肝主疏泄与情志调节 | 第42-43页 |
二、WPD胶囊组方分析及治疗PMS肝气逆证依据 | 第43-44页 |
三、问题与展望 | 第44-46页 |
结语 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
综述 | 第53-70页 |
附录 | 第70-75页 |
致谢 | 第75页 |