| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语(中英文全称) | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1.万古霉素研究概述 | 第11-16页 |
| ·万古霉素发展概况 | 第11页 |
| ·万古霉素的作用机理 | 第11-12页 |
| ·万古霉素的耐药基因 | 第12-14页 |
| ·万古霉素的生物合成机理 | 第14-16页 |
| 2.糖肽类抗生素的研究进展 | 第16-21页 |
| ·糖肽类抗生素的结构与分类 | 第16-17页 |
| ·糖肽类抗生素的半合成改造 | 第17-18页 |
| ·半合成的糖肽类抗生素 | 第18-19页 |
| ·糖肽类抗生素的生物合成 | 第19页 |
| ·组合生物合成的应用 | 第19-21页 |
| 3.拟无枝酸菌基因工程初步探索 | 第21-24页 |
| ·所用载体质粒 | 第22页 |
| ·载体质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·外源基因的导入 | 第23-24页 |
| 4.立题依据 | 第24-25页 |
| 第二章 糖基转移酶基因表达载体的构建 | 第25-40页 |
| 1.实验材料 | 第26-30页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·主要溶液和缓冲液 | 第27-29页 |
| ·菌种和质粒 | 第29页 |
| ·主要仪器和设备 | 第29-30页 |
| 2.实验方法 | 第30-33页 |
| ·大肠埃希菌相关DNA克隆操作 | 第30-32页 |
| ·糖基转移酶基因gtfD、gtfE的PCR扩增和克隆 | 第32-33页 |
| ·IPTG诱导蛋白的表达 | 第33页 |
| 3.结果与讨论 | 第33-39页 |
| ·通过PCR方法扩增gtfD、gtfE基因 | 第33-35页 |
| ·gtfD、gtfE基因在pUC19上的亚克隆 | 第35页 |
| ·表达质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·糖基转移酶基因gtfD、gtfE的诱导表达 | 第36-39页 |
| 4.本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 万古霉素糖苷配基的制备 | 第40-46页 |
| 1.实验材料 | 第40页 |
| ·化学试剂 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40页 |
| 2.实验方法 | 第40-41页 |
| ·水解反应 | 第40页 |
| ·生物活性测定 | 第40页 |
| ·水解物的制备 | 第40-41页 |
| 3.结果与讨论 | 第41-45页 |
| ·酸水解液中组分的探索 | 第41-43页 |
| ·碱水解液中组分的探索 | 第43-45页 |
| ·万古霉素水解物的生物活性 | 第45页 |
| 4.本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 原生质体的制备、再生与转化 | 第46-60页 |
| 1.实验材料 | 第46-49页 |
| ·主要生化试剂 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46-48页 |
| ·主要溶液和缓冲液 | 第48页 |
| ·菌种和质粒 | 第48-49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| 2.实验方法 | 第49-51页 |
| ·东方拟无枝酸菌原生质体的制备方法 | 第49-51页 |
| ·大肠埃希菌相关DNA克隆操作 | 第51页 |
| 3.结果与讨论 | 第51-59页 |
| ·原生质体制备和再生 | 第51-56页 |
| ·东方拟无枝酸菌抗生素抗性标记的选择 | 第56-57页 |
| ·PEG介导原生质体转化 | 第57-59页 |
| 4.本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 可溶性培养基的筛选 | 第60-73页 |
| 1.实验材料 | 第60-62页 |
| ·菌种 | 第60页 |
| ·主要试剂 | 第60-61页 |
| ·培养基 | 第61-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| 2.实验方法 | 第62-64页 |
| ·菌种培养和发酵 | 第62-63页 |
| ·分析方法 | 第63页 |
| ·发酵培养基的优化 | 第63-64页 |
| 3.结果与讨论 | 第64-72页 |
| ·可溶性培养基的研究 | 第64-68页 |
| ·摇瓶发酵工艺条件的优化 | 第68-72页 |
| 4.本章小结 | 第72-73页 |
| 全文总结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81页 |