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小鼠化学去核卵母细胞支持供体细胞核体外发育的研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
目录第9-11页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-36页
 第一节 哺乳动物体细胞核移植方法研究进展第12-18页
  1 显微操作核移植方法第12-15页
  2 手工操作与显微操作相结合的体细胞核移植方法第15-16页
  3 手工操作的体细胞核移植方法第16-18页
 第二节 体细胞核移植影响因素及相关理论问题第18-29页
  1 供体细胞的培养与准备第18-20页
  2 细胞融合第20-21页
  3 激活第21-23页
  4 早期胚胎培养第23-26页
  5 卵母细胞发生过程中的生化变化第26-29页
 第三节 核移植的理论问题第29-36页
  1 核质运输第29-30页
  2 MPF的调控作用机制第30-36页
第二章 第一次减数分裂期小鼠卵母细胞的化学去核第36-47页
 前言第36-37页
 1 材料与方法第37-39页
   ·动物与试剂第37页
   ·试验方法第37-39页
 2 实验设计第39页
   ·实验1:小鼠卵母细胞第一次减数分裂进程的确定第39页
   ·实验2:COC和NO的化学去核第39页
 3 结果第39-43页
   ·体外成熟卵母细胞第一次减数分裂进程第39-42页
   ·体外成熟5h时,卵母细胞的化学去核率最高第42页
   ·COC完全去核率高于NO第42-43页
 4 讨论第43-47页
第三章 小鼠胚胎体外培养液的选择第47-62页
 前言第47-48页
 1 材料与方法第48-55页
   ·动物与试剂第48页
   ·试验方法第48-55页
 2 培养第55-56页
   ·试验1:BALB/C×ICRF_1代小鼠1-细胞胚胎的体外培养第55页
   ·试验2:BALB/C×ICRF_1代小鼠4-细胞后胚胎的体外培养第55页
   ·胚胎移植第55-56页
 3 结果第56-59页
   ·M16(Sigma)使96%的1-细胞胚胎克服2-细胞发育阻滞第56页
   ·ME提高小鼠胚胎体外培养的桑椹率和囊胚率第56-58页
   ·与基础液相比,改进液使小鼠胚胎超前发育第58页
   ·胚胎移植小鼠的出生第58-59页
 4 讨论第59-62页
第四章 化学去核卵母细胞为受体的体细胞核移植胚胎的发育第62-80页
 前言第62-63页
 1 材料与方法第63-71页
   ·动物与试剂第63页
   ·试验方法第63-71页
 2 实验设计第71-73页
   ·试验1:小鼠C57BL/6×DBA2F1代胎儿成纤维细胞系的建立第71页
   ·试验2:以化学去核卵母细胞为受体的体细胞核移植第71-73页
 3 结果第73-76页
   ·小鼠胎儿成纤维细胞系的建立第73-74页
   ·以化学去核卵母细胞为受体的小鼠体细胞核移植重构胚的制备第74-75页
   ·体细胞的不同处理对重构胚发育的影响第75-76页
 4 讨论第76-80页
第五章 化学去核卵母细胞为受体的重构胚分析第80-91页
 前言第80-82页
 1 材料与方法第82-83页
   ·动物与试剂第82页
   ·试验方法第82-83页
 2 试验设计第83-85页
   ·试验1:化学去核卵母细胞中胞质微管组织中心的免疫荧光染色第84-85页
   ·试验2:重构胚的免疫荧光染色第85页
 3 结果第85-89页
   ·DC对微管聚合作用的抑制随培养时间的延长而逐渐减弱第85-87页
   ·融合后重构胚中染色质的凝集和纺锤体的组装第87-89页
 4 讨论第89-91页
第六章 结论第91-93页
参考文献第93-104页
附录第104-107页
个人简历第107-108页
致谢第108页

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