中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-36页 |
第一节 哺乳动物体细胞核移植方法研究进展 | 第12-18页 |
1 显微操作核移植方法 | 第12-15页 |
2 手工操作与显微操作相结合的体细胞核移植方法 | 第15-16页 |
3 手工操作的体细胞核移植方法 | 第16-18页 |
第二节 体细胞核移植影响因素及相关理论问题 | 第18-29页 |
1 供体细胞的培养与准备 | 第18-20页 |
2 细胞融合 | 第20-21页 |
3 激活 | 第21-23页 |
4 早期胚胎培养 | 第23-26页 |
5 卵母细胞发生过程中的生化变化 | 第26-29页 |
第三节 核移植的理论问题 | 第29-36页 |
1 核质运输 | 第29-30页 |
2 MPF的调控作用机制 | 第30-36页 |
第二章 第一次减数分裂期小鼠卵母细胞的化学去核 | 第36-47页 |
前言 | 第36-37页 |
1 材料与方法 | 第37-39页 |
·动物与试剂 | 第37页 |
·试验方法 | 第37-39页 |
2 实验设计 | 第39页 |
·实验1:小鼠卵母细胞第一次减数分裂进程的确定 | 第39页 |
·实验2:COC和NO的化学去核 | 第39页 |
3 结果 | 第39-43页 |
·体外成熟卵母细胞第一次减数分裂进程 | 第39-42页 |
·体外成熟5h时,卵母细胞的化学去核率最高 | 第42页 |
·COC完全去核率高于NO | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
第三章 小鼠胚胎体外培养液的选择 | 第47-62页 |
前言 | 第47-48页 |
1 材料与方法 | 第48-55页 |
·动物与试剂 | 第48页 |
·试验方法 | 第48-55页 |
2 培养 | 第55-56页 |
·试验1:BALB/C×ICRF_1代小鼠1-细胞胚胎的体外培养 | 第55页 |
·试验2:BALB/C×ICRF_1代小鼠4-细胞后胚胎的体外培养 | 第55页 |
·胚胎移植 | 第55-56页 |
3 结果 | 第56-59页 |
·M16(Sigma)使96%的1-细胞胚胎克服2-细胞发育阻滞 | 第56页 |
·ME提高小鼠胚胎体外培养的桑椹率和囊胚率 | 第56-58页 |
·与基础液相比,改进液使小鼠胚胎超前发育 | 第58页 |
·胚胎移植小鼠的出生 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-62页 |
第四章 化学去核卵母细胞为受体的体细胞核移植胚胎的发育 | 第62-80页 |
前言 | 第62-63页 |
1 材料与方法 | 第63-71页 |
·动物与试剂 | 第63页 |
·试验方法 | 第63-71页 |
2 实验设计 | 第71-73页 |
·试验1:小鼠C57BL/6×DBA2F1代胎儿成纤维细胞系的建立 | 第71页 |
·试验2:以化学去核卵母细胞为受体的体细胞核移植 | 第71-73页 |
3 结果 | 第73-76页 |
·小鼠胎儿成纤维细胞系的建立 | 第73-74页 |
·以化学去核卵母细胞为受体的小鼠体细胞核移植重构胚的制备 | 第74-75页 |
·体细胞的不同处理对重构胚发育的影响 | 第75-76页 |
4 讨论 | 第76-80页 |
第五章 化学去核卵母细胞为受体的重构胚分析 | 第80-91页 |
前言 | 第80-82页 |
1 材料与方法 | 第82-83页 |
·动物与试剂 | 第82页 |
·试验方法 | 第82-83页 |
2 试验设计 | 第83-85页 |
·试验1:化学去核卵母细胞中胞质微管组织中心的免疫荧光染色 | 第84-85页 |
·试验2:重构胚的免疫荧光染色 | 第85页 |
3 结果 | 第85-89页 |
·DC对微管聚合作用的抑制随培养时间的延长而逐渐减弱 | 第85-87页 |
·融合后重构胚中染色质的凝集和纺锤体的组装 | 第87-89页 |
4 讨论 | 第89-91页 |
第六章 结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-104页 |
附录 | 第104-107页 |
个人简历 | 第107-108页 |
致谢 | 第108页 |