| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 本文缩略词(Abbreviation) | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·单核苷酸多态性在分子育种中的应用 | 第11-12页 |
| ·单核苷酸多态性的意义 | 第11页 |
| ·单核苷酸多态性的检测方法 | 第11-12页 |
| ·PCR扩增目的序列及其产物测序法 | 第11页 |
| ·基因芯片法 | 第11-12页 |
| ·质谱法 | 第12页 |
| ·单核苷酸多态性在林木分子育种中的应用 | 第12页 |
| ·牛枝子抗旱候选基因的选择 | 第12-14页 |
| ·脯氨酸合成酶与植物抗旱性的关系 | 第13页 |
| ·DREB转录因子的研究进展 | 第13-14页 |
| ·牛枝子抗旱性研究进展 | 第14-15页 |
| ·本研究的主要内容及技术路线 | 第15-16页 |
| 2 牛枝子LPDREB,LPP5CS基因的克隆及序列分析 | 第16-34页 |
| ·实验材料及试剂 | 第16页 |
| ·实验材料与处理方法 | 第16页 |
| ·实验试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-22页 |
| ·牛枝子LPDREB基因克降 | 第16-20页 |
| ·引物设计 | 第16-17页 |
| ·牛枝子基因组DNA的提取 | 第17页 |
| ·牛技子叶片总RNA的提取 | 第17页 |
| ·CDNA第一链的合成 | 第17页 |
| ·染色体步移文库的构建 | 第17-19页 |
| ·PCR扩增 | 第19页 |
| ·PCR产物的胶回收纯化 | 第19页 |
| ·纯化回收片段与载体连接 | 第19页 |
| ·质粒的转化和蓝白斑筛选 | 第19页 |
| ·测序和序列分析 | 第19页 |
| ·牛枝子干旱胁迫处理 | 第19页 |
| ·LPDREB基因组织及诱导表达 | 第19-20页 |
| ·牛枝子LPP5CS基因克隆 | 第20-22页 |
| ·引物设计 | 第20-21页 |
| ·染色体步移法扩增LPP5CS基因DNA片段序列 | 第21页 |
| ·3'RACE扩增LPP5CS基因CDNA片段序列 | 第21页 |
| ·牛枝子干旱胁迫处理 | 第21-22页 |
| ·LPP5CS基因组织及诱导表达 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-31页 |
| ·牛枝子LPDREB基因序列分析 | 第22-27页 |
| ·DNA酶切片段文库分析 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增结果 | 第23页 |
| ·DNA序列分析 | 第23-24页 |
| ·LPDREB基因同源性及系统进化分析 | 第24-26页 |
| ·LPDREB基因组织及干旱胁迫诱导表达 | 第26-27页 |
| ·牛枝子LPP5CS基因序列分析 | 第27-31页 |
| ·PCR扩增结果分析 | 第27-28页 |
| ·DNA序列分析 | 第28页 |
| ·LPP5CS基因同源性及系统进化分析 | 第28-30页 |
| ·LPP5CS基因组织及干旱胁迫诱导表达 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-34页 |
| 3 牛枝子LPDREB,LPP5CS基因单核苷酸多态性分析 | 第34-42页 |
| ·实验材料及试剂 | 第34页 |
| ·实验材料与处理方法 | 第34页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·LPDREB,LPP5CS基因的SNP位点的筛选 | 第34-36页 |
| ·PCR引物设计 | 第34-36页 |
| ·DNA的提取 | 第36页 |
| ·PCR扩增 | 第36页 |
| ·PCR产物与载体连接 | 第36页 |
| ·DNA序列测序及SNPs位点的检测 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·LPDREB基因的SNPs分析 | 第36-38页 |
| ·SNPs数量、变异类型及频率的分析 | 第36-37页 |
| ·SNPs引起的氨基酸变异类型分析 | 第37-38页 |
| ·LPP5CS基因的SNPs分析 | 第38-40页 |
| ·SNPs数量、变异类型及频率的分析 | 第38页 |
| ·SNPs引起的氨基酸变异类型分析 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 4 牛枝子耐旱生理指标的测定及分析 | 第42-50页 |
| ·实验材料及试剂 | 第42页 |
| ·实验材料与处理方法 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·茚三酮法测定牛枝子游离脯氨酸含量 | 第42-44页 |
| ·三氯乙酸法测定牛枝子叶片丙二醛醛含量 | 第44页 |
| ·电导仪法测定牛枝子叶片电导率 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-47页 |
| ·牛枝子个体间耐旱性差异分析 | 第44-46页 |
| ·牛枝子种源间耐旱性差异分析 | 第46页 |
| ·牛枝子种源间耐旱性差异多重比较 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-50页 |
| 5 讨论 | 第50-54页 |
| ·抗旱候选基因克隆及SNPs分析 | 第50-52页 |
| ·LPDREB基因结构与SNPs分析 | 第50-51页 |
| ·LPP5CS基因结构与SNPs分析 | 第51-52页 |
| ·牛枝子干旱胁迫处理后生理指标变化 | 第52-54页 |
| 6 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 个人简介 | 第61-62页 |
| 导师简介 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
