| 第一章 前言 | 第1-31页 |
| 1 农杆菌介导水稻的遗传转化 | 第9-12页 |
| ·农杆菌介导水稻的遗传转化的研究进展 | 第9-10页 |
| ·影响根癌农杆菌介导的水稻转化的因素 | 第10-12页 |
| ·选择活跃分裂的功能细胞 | 第10页 |
| ·菌株的选择与质粒的构建 | 第10-11页 |
| ·酚类化合物的影响 | 第11页 |
| ·培养基 | 第11-12页 |
| 2 植物抗病分子机制及抗病基因工程 | 第12-21页 |
| ·植物抗病反应的机制 | 第12-13页 |
| ·植物抗病基因的克隆及结构、功能 | 第13-17页 |
| ·植物抗病过程中的信号传导 | 第17-21页 |
| ·植物抗病基因工程 | 第21页 |
| 3 植物系统获得抗性 | 第21-28页 |
| ·水杨酸是SAR信号转导途径的重要信号分子 | 第22-23页 |
| ·影响SA合成的突变体 | 第23-24页 |
| ·通过NPR1依赖性和NPR1非依赖性途径的SA信号 | 第24-25页 |
| ·影响SAR信号传导的其它突变体 | 第25页 |
| ·NPR1功能分析 | 第25-27页 |
| ·SAR下游相关基因 | 第27-28页 |
| ·SAR的标志基因 | 第27页 |
| ·SAR标志基因的表达 | 第27-28页 |
| 4 水稻抗病基因工程 | 第28-30页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第30-31页 |
| 第二章 材料与方法 | 第31-52页 |
| 1 质粒和菌株 | 第31页 |
| 2 水稻品种 | 第31-32页 |
| 3 培养基 | 第32-34页 |
| 4 菌株培养条件及菌种保存 | 第34-35页 |
| 5 抗生素及其使用浓度 | 第35页 |
| 6 常用溶液及缓冲液 | 第35-36页 |
| 7 质粒DNA的提取 | 第36-38页 |
| ·质粒DNA的少量提取 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第37-38页 |
| 8 DNA沉淀 | 第38页 |
| 9 DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第38页 |
| 10 植物总DNA的提取 | 第38-39页 |
| ·植物总DNA的大量提取 | 第38-39页 |
| ·植物总DNA的微量提取 | 第39页 |
| 11 植物总RNA的提取 | 第39-40页 |
| 12 水稻的RT-PCR分析 | 第40-41页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增 | 第41页 |
| 13 水稻Northern杂交检测 | 第41-43页 |
| ·琼脂糖／甲醛凝胶电泳 | 第42页 |
| ·转膜 | 第42-43页 |
| ·杂交分析 | 第43页 |
| 14 DNA的酶切、电泳及DNA片段浓度大小测算 | 第43-44页 |
| ·DNA的酶切 | 第43页 |
| ·电泳及DNA片段浓度、大小测算 | 第43-44页 |
| 15 DNA片段的回收 | 第44-45页 |
| ·低熔点琼脂糖凝胶法 | 第44页 |
| ·电透析法回收DNA片段 | 第44-45页 |
| 16 三亲本接合 | 第45-46页 |
| 17 水稻的遗传转化过程 | 第46-48页 |
| ·组织培养和转化的培养基 | 第46页 |
| ·水稻种子的灭菌 | 第46页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第46-47页 |
| ·水稻转化的基本路线 | 第47-48页 |
| 18 PCR检测 | 第48页 |
| 19 DNA测序 | 第48页 |
| 20 DNA-DNA杂交 | 第48-50页 |
| ·Southern转移 | 第48-49页 |
| ·探针标记-随机引物标记 | 第49页 |
| ·Southern杂交 | 第49-50页 |
| 21 水稻抗病性检测 | 第50-52页 |
| ·白叶枯病抗病性检测 | 第50-51页 |
| ·稻瘟病抗病性检测 | 第51-52页 |
| 第三章 结果与分析 | 第52-75页 |
| 1 根癌农杆菌介导的水稻桂99和253转化的主要条件的确定 | 第52-54页 |
| ·桂99和253成熟胚诱导愈伤组织培养基的确定 | 第52-53页 |
| ·桂99和253愈伤组织分化培养基的确立 | 第53-54页 |
| 2 拟南芥NPR1基因对水稻桂99和253的转化及再生 | 第54-62页 |
| ·转化受体的制备 | 第54-55页 |
| ·对水稻的转化和筛选 | 第55-57页 |
| ·拟转基因植株的获得 | 第57-61页 |
| ·转化效率分析 | 第61页 |
| ·转基因植株数量统计 | 第61-62页 |
| 3 转基因植株的分子鉴定 | 第62-66页 |
| ·桂99转基因植株的PCR检测 | 第62页 |
| ·253转基因植株的PCR检测 | 第62-63页 |
| ·转基因植株的PCR产物测序分析 | 第63-64页 |
| ·转基因植株的DNA杂交检测 | 第64页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第64-65页 |
| ·转基因植株的DNA杂交检测 | 第65-66页 |
| 4 转基因桂99T1代遗传分析 | 第66-67页 |
| 5 转基因植株对水稻病害的抗性检测 | 第67-75页 |
| ·转拟南芥NPR1基因桂99对水稻白叶枯病的抗性检测 | 第67-69页 |
| ·转拟南芥NPR1基因水稻对稻瘟病的抗性检测 | 第69-75页 |
| ·转拟南芥NPR1基因桂99对稻瘟病的抗性检测 | 第69-71页 |
| ·转拟南芥NPR1基因253对稻瘟病的抗性检测 | 第71-75页 |
| 第四章 讨论 | 第75-78页 |
| 参考文献 | 第78-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
