| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 材料与方法 | 第11-34页 |
| 一、材料 | 第11-18页 |
| 1.cDNA分子库 | 第11页 |
| 2.质粒载体 | 第11-12页 |
| 3.宿主菌 | 第12页 |
| 4.细胞株 | 第12页 |
| 5.引物 | 第12-13页 |
| 6.实验材料及试剂盒 | 第13-14页 |
| 7.实验试剂 | 第14-18页 |
| 二、主要仪器设备 | 第18-19页 |
| 三、计算机分析软件 | 第19-20页 |
| 1.国际NCBI(National Center for Biotechnology Information)信息途径: | 第19页 |
| 2.核酸及蛋白质序列分析软件: | 第19-20页 |
| 3.图象处理软件 | 第20页 |
| 4.数据分析及其统计软件 | 第20页 |
| 四、实验方法 | 第20-34页 |
| 1.技术路线和实验方案 | 第20页 |
| 2.全长cDNA的克隆 | 第20-21页 |
| 3.目的克隆片段的测序验证 | 第21-22页 |
| 4.组织表达谱分析 | 第22-24页 |
| 5.表达载体的构建 | 第24-25页 |
| 6.细胞培养和瞬时转染 | 第25-26页 |
| 7.Western blotting | 第26-27页 |
| 8.免疫荧光定位 | 第27-28页 |
| 9.细胞周期测定 | 第28-29页 |
| 10.细胞存活率检测 | 第29页 |
| 11.双荧光素酶报告反应系统检测荧光素酶活性 | 第29-30页 |
| 12.BRSK2的原核细胞表达与纯化 | 第30-32页 |
| 13.激酶活性测定 | 第32-33页 |
| 14.蛋白同源比较,无根树分析 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-66页 |
| 1.BRSK2基因的克隆和序列分析 | 第34-44页 |
| 2.BRSK2基因的染色体定位和基因组结构分析 | 第44-45页 |
| 3.BRSK2的表达谱分析 | 第45页 |
| 4.BRSK2的亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 5.BRSK2的原核表达 | 第46-47页 |
| 6.BRSK2的激酶活性分析 | 第47-49页 |
| 7.PKA对BRSK2的磷酸化作用 | 第49-51页 |
| 8.PKA磷酸化BRSK2的Thr260对激酶活性的影响 | 第51-52页 |
| 9.BRSK2对糖饥饿胁迫下的细胞存活率的影响 | 第52-55页 |
| 10.BRSK2对蛋白质合成的抑制作用 | 第55-57页 |
| 11.BRSK2对细胞周期的影响 | 第57-61页 |
| 12.BRSK2对信号通路的激活作用 | 第61-62页 |
| 13.Thr174和Thr260的磷酸化对BRSK2功能的影响 | 第62-66页 |
| 讨论 | 第66-72页 |
| 小结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 文献综述 AMPK的功能及其调控 | 第77-92页 |
| 一.AMPK的研究历史 | 第78-79页 |
| 二.AMPK的结构 | 第79-82页 |
| 三.AMPK的调控 | 第82-85页 |
| 1.AMPK的磷酸化调控 | 第82-83页 |
| 2.AMP对AMPK的调控作用 | 第83-84页 |
| 3.AMPK的细胞内调控 | 第84-85页 |
| 四.AMPK的下游底物 | 第85-90页 |
| 1.AMPK的底物识别序列 | 第85-86页 |
| 2.AMPK的体内底物蛋白 | 第86-90页 |
| 五.AMPK与疾病 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
