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植原体侵染对泡桐组培苗酶的影响及相关基因片段克隆研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-9页
1 文献综述第9-21页
   ·植原体与泡桐丛枝病第9-11页
     ·泡桐丛枝病的发生与危害第9页
     ·泡桐丛枝病的病原及其特性第9-11页
     ·泡桐丛枝病的防治策略第11页
   ·泡桐丛枝病症状与植株体内激素代谢的关系第11-15页
     ·吲哚乙酸的生理作用和代谢第11-12页
     ·植原体对寄主症状和代谢的影响第12-13页
     ·外源药剂处理对激素代谢的影响第13-15页
   ·植物过氧化物酶与吲哚乙酸氧化酶第15-20页
     ·植物过氧化物同工酶第15-18页
       ·过氧化物酶所催化的反应第15页
       ·过氧化物酶的分子结构和特点第15-16页
       ·过氧化物酶基因的结构和表达特点第16-18页
       ·过氧化物酶在植物体内的作用第18页
     ·吲哚乙酸氧化酶第18-19页
       ·吲哚乙酸氧化酶的分子结构和存在部位第18页
       ·吲哚乙酸氧化酶的作用第18页
       ·吲哚乙酸氧化酶活性影响因子第18-19页
     ·植物过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶的异同第19-20页
   ·本研究目的、总体思路和技术路线第20-21页
2 实验部分第21-52页
   ·不同药剂处理对泡桐不同无性系组培苗过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶的影响第21-38页
     ·材料和方法第21-22页
       ·材料第21页
         ·泡桐无性系第21页
         ·药剂处理浓度和方法第21页
         ·加入PVP-P去除酚类物质对POD和IAAO活性的影响第21页
         ·转接一至四周的泡桐组培苗POD和IAAO活性的变化第21页
       ·酶活性测定第21-22页
         ·过氧化物酶的提取和活性测定第21-22页
         ·吲哚乙酸氧化酶活性测定第22页
     ·结果与分析第22-38页
       ·不同药剂处理对泡桐组培苗症状和生长的影响第22-27页
       ·不同药剂处理的POD和IAAO活性测定第27-38页
         ·NAA处理对酶活性变化的影响第27-29页
         ·6-BA处理对酶活性变化的影响第29-32页
         ·SA处理对酶活性变化的影响第32-35页
         ·PVP-P处理对酶活性变化的影响第35-36页
         ·转接一至四周泡桐组培苗POD和IAAO活性变化第36-38页
   ·与泡桐丛枝病植原体侵染相关的过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶蛋白的纯化第38-44页
     ·材料和方法第38-39页
       ·试验材料第38页
       ·主要仪器设备和试剂第38页
       ·酶蛋白的提取第38页
       ·酶活性测定第38页
       ·蛋白质含量测定第38页
       ·酶蛋白的液相层析第38-39页
         ·DEAE-sephadex A50液相层析第38页
         ·CM-52液相层析第38-39页
       ·酶蛋白水溶液的冷冻干燥第39页
       ·酶蛋白的高效液相色谱检测第39页
     ·结果与分析第39-44页
       ·125病健苗的DEAE-sephadex A50柱层析第39-41页
       ·125病健苗的CM-52柱层析第41-42页
       ·纯化组分的高效液相色谱测定第42-43页
       ·酶蛋白纯化产率表第43-44页
   ·与植原体侵染相关的过氧化物酶基因的克隆第44-52页
     ·材料第44页
     ·方法第44-48页
       ·植物总RNA的提取第44页
       ·RT-PCR第44-45页
       ·PCR产物回收第45-46页
       ·连接反应第46页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第46-47页
       ·连接产物转化大肠杆菌第47页
       ·碱裂解法提取质粒DNA第47-48页
       ·重组质粒酶切验证第48页
       ·重组质粒PCR验证第48页
       ·序列分析第48页
     ·结果与分析第48-52页
       ·POD基因克隆与分析第49页
       ·POD序列测序结果与分析第49-52页
3 结论第52-53页
4 讨论第53-57页
   ·机械损伤和植原体侵染对泡桐POD和IAAO代谢的影响第53页
   ·外施药剂对泡桐组培苗POD和IAAO的影响第53-55页
     ·NAA处理对POD和IAAO的影响第53-54页
     ·6-BA处理对POD和IAAO的影响第54-55页
     ·SA处理对POD和IAAO的影响第55页
   ·泡桐POD和IAAO之间的异同第55-56页
   ·植原体侵染对泡桐POD和IAAO基因的诱导表达作用第56-57页
参考文献第57-61页
致谢第61页

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