| 缩略词 | 第1-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-14页 |
| 第一部分 丙型肝炎病毒核心抗原基因片段重组表达载体的构建 | 第14-27页 |
| 材料和方法 | 第14-19页 |
| 一、 材料 | 第14-15页 |
| 二、 实验方法 | 第15-19页 |
| (一) 引物设计 | 第15页 |
| (二) PCR扩增 | 第15-16页 |
| (三) 目的基因的克隆 | 第16-18页 |
| 1 质粒DNA的制备及酶切 | 第16-17页 |
| 2 目的基因片段的纯化、酶切 | 第17页 |
| 3 质粒大片段及目的基因片段的分离和回收 | 第17页 |
| 4 目的基因片断与载体的连接反应 | 第17页 |
| 5 感受态细胞的制备 | 第17页 |
| 6 转化 | 第17-18页 |
| (四) 重组克隆的筛选及鉴定 | 第18页 |
| 1 初步鉴定 | 第18页 |
| 2 酶切鉴定 | 第18页 |
| (五) C119基因序列测定及同源性分析 | 第18-19页 |
| 结果 | 第19-24页 |
| 一、 C119基因的扩增 | 第19页 |
| 二、 重组克隆的筛选及鉴定 | 第19-20页 |
| 三、 序列的测定及同源性分析 | 第20-24页 |
| 讨论 | 第24-26页 |
| 小结 | 第26-27页 |
| 第二部分 重组蛋白的表达、纯化及抗原性研究 | 第27-46页 |
| 材料和方法 | 第27-33页 |
| 一、 材料 | 第27-29页 |
| 二、 实验方法 | 第29-33页 |
| (一) C119工程菌的发酵 | 第29页 |
| (二) 表达产物的溶解性分析 | 第29页 |
| (三) 表达产物的纯化 | 第29-30页 |
| (四) 纯化后蛋白的含量测定 | 第30页 |
| (五) 表达产物及纯化后蛋白的SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| (六) 表达产物及纯化后蛋白Western-blot分析 | 第31页 |
| (七) 纯化后蛋白用于临床血清的ELISA检测 | 第31-33页 |
| (一) 敏感性和特异性 | 第31页 |
| (二) 重复性试验 | 第31-33页 |
| 结果 | 第33-43页 |
| 一、 重组质粒的表达 | 第33-36页 |
| (一) 诱导时机的优化 | 第33-34页 |
| (二) 诱导时间的优化 | 第34页 |
| (三) 诱导剂浓度的优化 | 第34-36页 |
| 二、 表达蛋白的纯化 | 第36-38页 |
| 三、 纯化后蛋白含量的测定 | 第38-39页 |
| 四、 表达产物及纯化后蛋白Western-blot分析 | 第39页 |
| 五、 纯化后的蛋白用于ELISA检测 | 第39-43页 |
| (一) 敏感性和特异性 | 第39-41页 |
| (二) 重复性试验 | 第41-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 小结 | 第45-46页 |
| 总结 | 第46-47页 |
| 研究展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 综述 | 第55-68页 |
| 附录: 论文发表情况 | 第68页 |
