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DNA分子标记技术在甜瓜西瓜杂种优势利用和抗病育种中的应用

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-13页
1 引言与文献综述第13-41页
   ·引言第13-15页
   ·分子标记概述第15-19页
     ·RFLP(Restriction fragment length polymorphism)第15-16页
     ·RAPD(Random amplified polymorphism DNA)第16页
     ·SCAR(Sequence characterized amplified regions)第16-17页
     ·SSR(Simple sequence repeats)第17页
     ·ISSR(Inter-simple sequence repeat)第17-18页
     ·AFLP(Amplified fragment length polymorphism)第18-19页
   ·分子标记技术在园艺作物品种(杂种)鉴定中的研究进展第19-26页
     ·杂种(包括体细胞杂种)纯度鉴定第19-21页
     ·品种鉴定第21-23页
     ·品种亲缘关系分析与分类第23-25页
     ·小结第25-26页
   ·园艺作物与抗病基因相连锁的分子标记的研究进展第26-33页
     ·遗传群体的结构第26-27页
     ·应用分子标记的育种策略第27-28页
     ·上位相互作用第28页
     ·连锁距离第28-29页
     ·抗病基因的分子标记与辅助选择第29-30页
     ·甜瓜抗白粉病抗性资源第30-31页
     ·小结第31-33页
   ·克隆植物抗病基因的研究进展第33-37页
     ·已克隆的抗病基因及基因产物结构第33-34页
     ·抗病基因产物结构与可能的功能第34-35页
     ·RGA-克隆植物抗病基因的新策略第35-36页
     ·RGA在克隆与定位植物抗病基因中的应用第36页
     ·小结第36-37页
   ·本项研究的目的意义第37-39页
   ·本项研究采取的研究方案、技术路线第39-41页
2 RAPD标记检测甜瓜西瓜杂种纯度的技术体系研究第41-63页
   ·材料与方法第41-48页
     ·甜瓜西瓜杂交种及其亲本材料第41-42页
     ·RAPD引物第42-43页
     ·甜瓜和西瓜叶片DNA的提取第43-45页
     ·模板DNA样品浓度及质量的测定第45页
     ·RAPD扩增体系第45-46页
     ·扩增产物的电泳检测第46-48页
   ·结果与分析第48-57页
     ·甜瓜、西瓜杂交种及其亲本间RAPD扩增多态性引物的筛选第48-50页
     ·RAPD多态性标记对甜瓜F_1代杂交种群体纯度检测第50-51页
     ·RAPD标记在其他品种上的验证第51-52页
     ·RAPD标记用于杂交种纯度鉴定稳定扩增体系的建立第52-57页
       ·模板DNA对RAPD扩增的影响第53-55页
       ·循环程序及参数对RAPD扩增的影响第55-56页
       ·电泳检测方法的选择第56-57页
   ·讨论第57-63页
     ·RAPD标记引物的选择与鉴定甜瓜杂种纯度第57-58页
     ·基因型与RAPD标记引物的选择第58-60页
     ·RAPD标记鉴定甜瓜杂种纯度的可行性第60-63页
3 SCAR标记检测甜瓜杂种纯度第63-80页
   ·材料与方法第63-69页
     ·甜瓜材料第63页
     ·生化试剂及SCAR引物合成第63页
     ·甜瓜叶片DNA的提取第63页
     ·扩增产物回收第63-64页
     ·回收产物与克隆载体pM D18-T vector的连接转化与鉴定第64-67页
       ·连接产物转化E.col:DH5α感受态细胞第64-65页
       ·质粒DNA的小量制备与电泳检测第65-66页
       ·重组质粒的酶切鉴定第66-67页
     ·RAPD扩增产物的PCR-Southern检测第67-69页
       ·特异性RAPD片段探针制备第67页
       ·杂交组合PCR产物的印迹转移第67-68页
       ·预杂交及杂交第68页
       ·洗膜及显色第68-69页
   ·结果与分析第69-77页
     ·甜瓜杂交种1-36 RAPD标记与亲本的分子检测第69-70页
     ·RAPD标记片段的克隆序列测定和分析第70-73页
     ·RAPD标记转换SCAR标记第73-76页
     ·SCAR标记对杂交种1-36群体的纯度检测与在其他品种上的验证第76-77页
   ·讨论第77-80页
     ·由RAPD标记向SCAR标记的成功转换第77-78页
     ·SCAR标记在杂种鉴定中的可行性第78-80页
4 甜瓜抗白粉病基因的ISSR标记第80-86页
   ·材料与方法第80-81页
     ·材料第80页
     ·ISSR引物第80页
     ·甜瓜抗白粉病鉴定第80页
     ·基因组DNA提取及抗病池和感病池的建立第80页
     ·ISSR引物的PCR扩增第80-81页
     ·PCR扩增产物的电泳检测第81页
     ·遗传距离估算及连锁分析第81页
   ·结果与分析第81-83页
     ·甜瓜抗白粉病基因在F_2代群体中的分离第81页
     ·ISSR多态性引物的筛选第81-82页
     ·ISSR标记在F_2群体与抗病基因的连锁分析第82-83页
   ·讨论第83-86页
     ·ISSR技术用于甜瓜白粉病抗性基因标记第83-84页
     ·抗病标记用于杂交种纯度检测的可能第84-86页
5 结论第86-87页
参考文献第87-98页
图版第98-106页
缩写词第106-107页

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