几种病程相关蛋白基因转化番茄的研究
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-34页 |
| ·引言 | 第12-13页 |
| ·植物与病原的相互作用 | 第13页 |
| ·植物的抗病机制 | 第13-15页 |
| ·抗性基因的特性 | 第15-17页 |
| ·抗病基因 | 第15-16页 |
| ·防卫基因 | 第16-17页 |
| ·植物几丁质酶及其基因的研究 | 第17-21页 |
| ·植物几丁质酶 | 第17-19页 |
| ·植物几丁质酶基因的分离克隆 | 第19页 |
| ·几丁质酶转基因植物 | 第19-21页 |
| ·植物葡聚糖酶及其基因的研究 | 第21-24页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶 | 第21-22页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶的结构 | 第22-23页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶基因的表达调控 | 第23页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶及其基因的进化 | 第23-24页 |
| ·植物β-1，3-葡聚糖酶转基因植物 | 第24页 |
| ·烟草AP24及其基因的研究 | 第24页 |
| ·植物转基因研究 | 第24-26页 |
| ·研究进展概况 | 第24-25页 |
| ·番茄转基因研究 | 第25-26页 |
| ·外源基因的表达 | 第26-29页 |
| ·外源基因的沉默 | 第26-28页 |
| ·消除外源基因沉默的可能策略 | 第28-29页 |
| ·T-DNA侧翼序列的分析 | 第29-30页 |
| ·I-PCR | 第29-30页 |
| ·TAIL-PCR | 第30页 |
| ·提高植物抗病性的策略 | 第30-32页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第32-34页 |
| 2 材料和方法 | 第34-54页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·植物材料 | 第34页 |
| ·农杆菌和植物表达载体 | 第34-35页 |
| ·大肠杆菌和克隆载体 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-54页 |
| ·番茄的遗传转化 | 第36-39页 |
| ·番茄子叶再生体系的优化(培养基见表2.1) | 第36-37页 |
| ·番茄子叶和下胚轴的转化(培养基见表2.1) | 第37-39页 |
| ·转基因植株倍性变异调查 | 第39页 |
| ·转基因植株分子鉴定 | 第39-43页 |
| ·番茄基因组DNA的提取 | 第39页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第39-40页 |
| ·Southern杂交分析 | 第40-42页 |
| ·总RNA的提取 | 第42页 |
| ·Northern杂交分析 | 第42-43页 |
| ·转基因植株的抗病性鉴定 | 第43-45页 |
| ·T-DNA右边界侧翼序列分析 | 第45-50页 |
| ·外源基因性状分离调查方法的研究 | 第50页 |
| ·外源基因的融合蛋白表达载体构建 | 第50-52页 |
| ·番茄内源相关基因的克隆 | 第52-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-82页 |
| ·外植体再生和遗传转化 | 第54-59页 |
| ·番茄子叶再生体系的优化 | 第54-57页 |
| ·细胞分裂素对再生芽形成的影响 | 第54-55页 |
| ·低水平Zt与高水平IAA促进再生芽形成 | 第55-56页 |
| ·低水平Zt与高水平IAA促进再生芽根的形成 | 第56-57页 |
| ·子叶和下胚轴转化获得Km抗性植株 | 第57-59页 |
| ·转基因植株分子鉴定 | 第59-65页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第59-60页 |
| ·Southern Blot分析 | 第60-63页 |
| ·转基因植株Northern Blot分析 | 第63-65页 |
| ·转基因植株的抗病性鉴定 | 第65-68页 |
| ·转基因番茄抗枯萎病试验 | 第65-67页 |
| ·转基因番茄抗早疫病试验 | 第67-68页 |
| ·T-DNA整合位点的上游序列 | 第68-76页 |
| ·TAIL-PCR扩增及特异产物的克隆 | 第68-71页 |
| ·TAIL-PCR产物测序结果分析 | 第71-74页 |
| ·T-DNA整合中的特殊现象 | 第74-76页 |
| ·外源基因性状分离调查方法 | 第76-77页 |
| ·外源基因的原核表达载体构建 | 第77-80页 |
| ·番茄内源抗病相关基因的克隆 | 第80-82页 |
| 4 讨论 | 第82-90页 |
| 参考文献 | 第90-105页 |
| APPENDIX | 第105-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
