中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
前言 | 第8-12页 |
一、 材料与方法 | 第12-20页 |
·实验材料 | 第12-14页 |
·供试水稻品种或亲本 | 第12页 |
·菌株及双元载体 | 第12-14页 |
·培养基 | 第14-15页 |
·载体的构建、鉴定及转化 | 第15-16页 |
·水稻愈伤组织的诱导及培养 | 第16页 |
·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻共转化 | 第16-17页 |
·单菌体转化中根癌农杆菌的培养 | 第16页 |
·双菌体共转化中根癌农杆菌的培养 | 第16页 |
·水稻受体材料的浸染及其与根癌农杆菌的共培养 | 第16-17页 |
·抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第17页 |
·水稻共转化频率的计算 | 第17-18页 |
·瞬间表达率 | 第17页 |
·共转化率Ⅰ | 第17页 |
·共转化率Ⅱ | 第17-18页 |
·转基因水稻植株中GUS活性的组织化学染色分析 | 第18页 |
·转基因水稻植株总DNA的PCR分析 | 第18-19页 |
·水稻植株叶片总DNA的提取 | 第18页 |
·PCR扩增 | 第18-19页 |
·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第19页 |
·大量总DNA的提取 | 第19页 |
·地高辛标记的DNA探针的制备 | 第19页 |
·Southern杂交分析 | 第19页 |
·水稻成熟种子中直链淀粉含量的测定 | 第19页 |
·水稻成熟种子胶稠度和糊化温度的测定 | 第19-20页 |
二、 结果和分析 | 第20-43页 |
·只含GUS报告基因双元载体的构建 | 第20-21页 |
·农杆菌不同菌株和浓度配比对双载体共转化效率的影响 | 第21-27页 |
·不同菌株搭配对双载体共转化效率的影响 | 第21-24页 |
·不同农杆菌配比浓度对双载体共转化效率的影响 | 第24-26页 |
·共转化植株的PCR分析 | 第26-27页 |
·双载体介导转化获得共转化反义Wx基因的水稻植株 | 第27-35页 |
·双载体共转化法获得的转基因水稻植株 | 第27-28页 |
·转反义Wx基因T_0代水稻植株的PCR分析 | 第28-30页 |
·T_0代双载体共转化水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第30-31页 |
·T_0代双载体共转化植株成熟种子胚乳中的直链淀粉含量分析 | 第31-33页 |
·部分双载体共转化水稻植株T_1代成熟种子的品质分析 | 第33-34页 |
·无选择标记T_1代共转化水稻植株的分离及PCR鉴定 | 第34-35页 |
·超双元载体共转化水稻植株的获得及其鉴定 | 第35-41页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第35-36页 |
·T_0代转基因植株的PCR分析 | 第36-37页 |
·T_0代转基因植株总DNA的Southern杂交分析 | 第37-38页 |
·T_0代水稻植株成熟种子胚乳中的直链淀粉含量分析 | 第38-39页 |
·共转化水稻植株T_1代成熟种子的品质分析 | 第39-40页 |
·无抗性选择标记转反义Wx基因水稻植株的获得及其鉴定 | 第40-41页 |
·一步法培育无抗性选择标记转反义Wx基因水稻植株的研究 | 第41-43页 |
·与农杆菌共培养后再生水稻植株的获得 | 第42页 |
·转基因水稻植株的筛选 | 第42-43页 |
三、 讨论 | 第43-46页 |
·农杆菌介导的双载体转化法中影响共转化频率的因素 | 第43-44页 |
·不同介导途径的共转化频率的比较 | 第44页 |
·抗性选择标记基因与目的基因在共转化植株后代中的分离 | 第44-45页 |
·一步法获得无标记转基因水稻的价值 | 第45-46页 |
参考文献: | 第46-50页 |
附录: | 第50-53页 |
致谢 | 第53页 |