| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第9-15页 |
| 1 镍的生物学作用及其毒理 | 第9-10页 |
| 2 镍对睾酮合成的影响 | 第10-12页 |
| 3 ROS对睾酮合成的调控 | 第12-13页 |
| 4 NAC和TEMPO的抗氧化作用 | 第13-14页 |
| 5 技术路线 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-25页 |
| 1 主要试剂和仪器 | 第15-18页 |
| 1.1 主要试剂 | 第15-16页 |
| 1.2 主要溶液配制 | 第16-17页 |
| 1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2 研究方法 | 第18-25页 |
| 2.1 大鼠Leydig细胞的分离、纯化和鉴定 | 第18-19页 |
| 2.2 剂量选择和分组 | 第19页 |
| 2.3 细胞处理 | 第19页 |
| 2.4 酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养上清液中睾酮含量 | 第19-20页 |
| 2.5 荧光标记法检测细胞中ROS水平 | 第20页 |
| 2.6 RT-qPCR检测睾酮合成酶mRNA表达水平 | 第20-23页 |
| 2.7 Western Blot检测睾酮合成酶蛋白表达水平 | 第23-24页 |
| 2.8 统计分析 | 第24-25页 |
| 结果 | 第25-31页 |
| 1 大鼠Leydig细胞的纯化和鉴定 | 第25-26页 |
| 1.1 大鼠Leydig细胞的纯化 | 第25-26页 |
| 1.2 大鼠Leydig细胞纯度鉴定 | 第26页 |
| 2 NiSO_4抑制大鼠Leydig细胞睾酮合成的机制研究 | 第26-28页 |
| 2.1 NiSO_4 对大鼠 Leydig 细胞睾酮分泌的的影响 | 第26-27页 |
| 2.2 NiSO_4致大鼠 Leydig 细胞睾酮合成酶 m RNA表达水平的变化 | 第27页 |
| 2.3 NiSO_4 致大鼠Leydig 细胞睾酮合成酶蛋白表达水平的变化 | 第27-28页 |
| 3 ROS介导的NiSO_4处理大鼠Leydig细胞睾酮合成障碍 | 第28-31页 |
| 3.1 NiSO_4 对大鼠 Leydig 细胞内 ROS 水平的影响 | 第28页 |
| 3.2 ROS介导的NiSO_4处理大鼠Leydig细胞中睾酮含量的变化 | 第28-29页 |
| 3.3 ROS介导的NiSO_4处理细胞睾酮合成酶mRNA表达水平的变化 | 第29页 |
| 3.4 ROS介导的NiSO_4处理细胞睾酮合成酶蛋白表达水平的变化 | 第29-31页 |
| 讨论 | 第31-36页 |
| 1 Leydig细胞的主要功能 | 第31页 |
| 2 Leydig细胞体外培养体系的成功建立 | 第31-32页 |
| 3 NiSO_4对大鼠Leydig细胞睾酮合成的影响 | 第32-34页 |
| 4 ROS对NiSO_4致大鼠Leydig细胞睾酮合成障碍的机制探讨 | 第34-36页 |
| 全文总结 | 第36-37页 |
| 1 结论 | 第36页 |
| 2 不足之处 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 缩略词表 | 第43-45页 |
| 在学期间研究成果 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
