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玉米内生细菌的分离鉴定及抗真菌活性物质的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩写词表第7-11页
1 引言第11-16页
   ·玉米大斑病的发生与防治现状第11-12页
     ·玉米大斑病的发生及病菌分化第11页
     ·玉米大斑病菌的致病机理与防治第11-12页
   ·内生细菌生物防治的应用现状第12页
   ·枯草芽孢杆菌抑菌的作用机制第12-14页
     ·营养与空间位点的竞争作用第12-13页
     ·分泌抗菌物质第13页
     ·产生诱导抗性第13页
     ·产生水解酶类第13-14页
   ·抗菌物质的分离纯化第14-15页
     ·抗菌蛋白的分离纯化第14页
     ·脂肽类物质的分离纯化第14-15页
   ·本研究的目的与意义第15-16页
2 材料和方法第16-32页
   ·菌株和质粒第16页
   ·培养基第16-17页
   ·试剂与溶液配置第17-18页
     ·主要试剂第17-18页
     ·溶液的配制第18页
   ·仪器与设备第18-19页
   ·玉米内生细菌分离、鉴定与拮抗试验第19-21页
     ·玉米内生细菌的分离第19页
     ·拮抗玉米大斑病菌内生细菌的筛选第19页
     ·菌株YY1 的抗菌谱第19页
     ·菌株YY1 的盆栽生防试验第19-20页
     ·菌株YY1 胞外分泌物的抑菌活性第20页
     ·菌株YY1 形态观察及生理生化特性测定第20页
     ·菌株YY1 16S rDNA 的分子生物学鉴定第20-21页
   ·菌株YY1 的发酵条件优化第21-22页
     ·种子培养第21-22页
     ·生长曲线的测定第22页
     ·发酵条件优化第22页
     ·菌株YY1 发酵无菌上清液的制备第22页
     ·抗菌活性的检测第22页
     ·数据统计第22页
   ·菌株YY1 蛋白粗提液性质及抑菌机理研究第22-27页
     ·菌株YY1 蛋白粗提液的提取及活性检测第22-23页
     ·菌株YY1 蛋白粗提液抑菌谱的测定第23页
     ·菌株YY1 蛋白粗提液对大斑病菌菌丝形态的影响第23页
     ·菌株YY1 蛋白粗提液对孢子萌发的影响第23-24页
     ·菌株YY1 蛋白粗提液对原生质体的影响第24页
     ·菌株YY1 蛋白粗提液的分子作用机制第24-27页
   ·菌株YY1 抗菌蛋白的分离纯化第27-28页
     ·粗蛋白的提取第27页
     ·粗蛋白性质分析第27页
     ·粗蛋白的离子交换层析第27-28页
     ·活性组分的葡聚糖凝胶G-150 柱层析第28页
     ·一级质谱分析第28页
   ·菌株YY1 产脂肽物质的分离第28-30页
     ·种子液制备第28页
     ·发酵培养第28-29页
     ·脂肽类物质的提取第29页
     ·高速逆流色谱(HSCCC)条件的确定第29-30页
     ·脂肽物质的HSCCC 分析第30页
     ·HSCCC 各组分的生测第30页
     ·活性组分的HPLC 分析第30页
   ·菌株YY1 的定殖研究第30-32页
     ·GFP 标记菌株的制备第30-31页
     ·菌株YY1-32 的定殖试验第31-32页
3 结果与分析第32-60页
   ·对大斑病菌具有拮抗作用的玉米内生细菌的筛选与鉴定第32-36页
     ·玉米内生拮抗细菌的筛选第32页
     ·菌株YY1 的抗菌谱第32-33页
     ·菌株YY1 的盆栽生防试验第33页
     ·内生细菌菌株YY1 胞外分泌物的抑菌作用第33-34页
     ·内生细菌菌体的形态特征第34页
     ·内生细菌的生理生化性质第34-35页
     ·内生细菌菌株YY1 16S rDNA 的分子生物学鉴定第35-36页
   ·菌株YY1 发酵条件的优化第36-42页
     ·生长曲线第36页
     ·发酵条件优化的单因素试验第36-38页
     ·发酵培养基组成的正交试验第38-39页
     ·发酵工艺参数的优化第39-42页
   ·蛋白粗提物的抑菌机理第42-47页
     ·菌株YY1 蛋白粗提物的提取第42-43页
     ·菌株YY1 蛋白粗提物的抗菌谱第43页
     ·菌株YY1 蛋白粗提物对菌丝形态的影响第43-44页
     ·菌株YY1 蛋白粗提物对孢子萌发的影响第44页
     ·菌株YY1 蛋白粗提物对原生质体的影响第44-45页
     ·菌株YY1 蛋白粗提物拮抗作用的分子机制第45-47页
   ·粗蛋白性质分析及分离纯化第47-52页
     ·粗蛋白性质分析第47-48页
     ·粗蛋白DEAE Sepharose Fast Flow 阴离子交换层析柱分离第48-49页
     ·各活性组分经葡聚糖凝胶G-150 柱层析分离第49-50页
     ·YY1-0.3-6 的一级质谱分析第50-52页
   ·脂肽类物质的提取分离第52-56页
     ·脂肽类物质提取第52-53页
     ·高速逆流色谱(HSCCC)条件的确定第53-55页
     ·高速逆流色谱对脂肽类物质进行分离第55页
     ·各组分脂肽类物质抑菌活性检测第55-56页
     ·高效液相色谱分析9 号组分第56页
   ·菌株YY1 的定殖研究第56-60页
     ·pS4GFP 质粒提取与酶切验证第56-57页
     ·转化菌株的验证第57-58页
     ·菌株YY1-32 在玉米体内的分布第58-60页
4 讨论第60-63页
   ·芽孢杆菌的抑菌作用与发酵条件优化第60-61页
   ·芽孢杆菌产生的抑菌物质与抑菌机理第61-62页
   ·内生菌的定殖与传导第62-63页
结论第63-64页
参考文献第64-70页
在读期间发表的学术论文第70-71页
作者简历第71-72页
致谢第72-73页

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