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猪繁殖与呼吸综合征病毒E基因重组质粒免疫效果的研究

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-10页
中英文对照表第10-11页
第一部分 前言第11-22页
 1 PRRSV的分类第11-12页
 2 PRRSV的基因结构第12-13页
 3 PRRSV E蛋白第13-14页
 4 PRRS免疫学研究进展第14-16页
 5 PRRS的综合防制和疫苗研究进展第16-20页
 6 本研究的目的和意义第20-22页
第二部分 材料与方法第22-37页
 1 材料第22-28页
   ·质粒与细菌第22页
   ·实验动物第22页
   ·细胞系第22页
   ·病毒第22页
   ·引物第22页
   ·试剂及配制第22-27页
   ·主要仪器第27-28页
 2 方法第28-37页
   ·实验技术路线第28-29页
   ·DH5α菌种的复苏第29页
   ·感受态细胞的制备第29页
   ·转化第29-30页
   ·小量抽提质粒第30页
   ·真核表达质粒pIRES-E的双酶切鉴定和PCR鉴定第30-31页
   ·重组质粒的大量制备第31-32页
   ·PRRS病毒GXA株病毒滴度的测定第32-35页
   ·动物的免疫与分组第35页
   ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第35-36页
   ·微量中和试验(固定病毒—稀释血清法)第36-37页
第三部分 实验结果第37-44页
 1 重组质粒pIRES-E的PCR和双酶切鉴定第37-38页
 2 重组质粒的大量制备第38页
 3 PRRS病毒GXA株病毒滴度的测定第38-40页
   ·细胞毒的RT-PCR鉴定第38页
   ·间接免疫荧光第38-39页
   ·CPE显微镜观察及照片第39页
   ·病毒滴度的测定(TCID_(50))第39-40页
 4 联免疫吸附试验(ELISA)第40-42页
   ·最佳抗原包被稀释度和阴阳血清稀释度的确定第40-41页
   ·间接ELISA检测免疫后家兔血清中的特异性抗体第41-42页
 5 中和抗体水平的检测第42-44页
第四部分 讨论第44-49页
 1 关于核酸疫苗第44-45页
 2 关于PRRSV的培养第45-46页
 3 关于间接ELISA检测方法第46-47页
 4 关于PRRSV E蛋白的免疫作用第47-49页
第五部分 结论第49-50页
参考文献第50-58页
致谢第58-59页
攻读学位期间发表论文情况第59页

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