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伪旋毛虫肌幼虫WR29抗原基因的克隆、表达及鉴定

内容提要第1-5页
英文缩写词表第5-9页
前言第9-12页
第一篇 文献综述旋毛虫分子生物学研究进展第12-39页
 1 旋毛虫种属分类的研究进展第13-17页
   ·分类现状第13-16页
   ·我国旋毛虫属的分类第16-17页
 2 旋毛虫分类的分子生物学技术研究进展第17-22页
   ·简单重复序列锚定PCR第17-18页
   ·限制性酶切片段长度多态性及核酸探针技术第18页
   ·随机扩增多态性DNA第18-19页
   ·PCR- 单链构象多态性分析第19-20页
   ·多重PCR ( multiplex PCR)第20-21页
   ·DNA 序列分析及分子系统发生研究第21-22页
 3 旋毛虫抗原的研究第22-32页
   ·旋毛虫表面抗原第22-24页
   ·虫体抗原第24-25页
   ·杆细胞颗粒相关抗原第25页
   ·旋毛虫排泄/分泌(Excretory-Secretory,ES)抗原第25-29页
   ·旋毛虫重组抗原第29-32页
 4 旋毛虫病的检测方法第32-39页
   ·检测病原第32-33页
   ·免疫学诊断第33-37页
     ·皮内试验第33页
     ·补体结合试验(CF)第33页
     ·凝集试验第33-34页
     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第34-35页
     ·免疫酶染色试验(IEST)第35-36页
     ·增强化学发光酶免疫染色试验(ECIA)第36页
     ·循环抗原的检测第36页
     ·聚醛化聚苯乙烯( PAPS)免疫微球快速诊断法第36页
     ·免疫聚合酶链反应法( Immuno-PCR)第36-37页
   ·Western 印迹技术第37页
   ·聚合酶链式反应(PCR)检测技术第37-39页
第二篇 研究内容第39-70页
 第一章 伪旋毛虫肌幼虫WR29 抗原基因的序列分析及克隆第39-51页
   ·材料与方法第39-43页
     ·材料第39-40页
     ·方法第40-43页
   ·结果第43-49页
     ·分析第43-48页
     ·pBluescript-WR29 目的片段PCR 扩增第48页
     ·pMD -WR29 克隆载体的构建第48-49页
     ·重组质粒pMD18T-WR29 的序列鉴定第49页
   ·讨论第49-50页
   ·小结第50-51页
 第二章 伪旋毛虫肌幼虫WR29 抗原基因重组表达载体的构建及高效表达第51-59页
   ·材料与方法第51-56页
     ·材料第51-52页
     ·方法第52-56页
   ·结果第56-58页
     ·重组质粒pET-WR29 的构建第56-57页
     ·重组质粒的测序鉴定第57页
     ·重组蛋白的诱导表达第57页
     ·重组蛋白的表达量测定第57-58页
   ·讨论第58页
   ·小结第58-59页
 第三章 伪旋毛虫肌幼虫WR29 抗原基因重组蛋白的鉴定及在不同发育时期的表达分析第59-70页
   ·材料与方法第59-66页
     ·材料第59-60页
     ·方法第60-62页
     ·兔抗WR29 重组蛋白抗血清的制备第62页
     ·Western blotting 检测第62-66页
   ·结果第66-68页
     ·包涵体的纯化第66页
     ·血清效价的测定第66页
     ·Western blotting 检测结果第66-67页
     ·各组样品总RNA 纯度及完整性分析第67页
     ·WR29mRNA 检测情况第67-68页
   ·讨论第68-69页
   ·小结第69-70页
结论第70-71页
参考文献第71-80页
致谢第80-81页
导师及作者简介第81-83页
中文摘要第83-85页
ABSTRACT第85-86页

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