内容提要 | 第1-5页 |
英文缩写词表 | 第5-9页 |
前言 | 第9-12页 |
第一篇 文献综述旋毛虫分子生物学研究进展 | 第12-39页 |
1 旋毛虫种属分类的研究进展 | 第13-17页 |
·分类现状 | 第13-16页 |
·我国旋毛虫属的分类 | 第16-17页 |
2 旋毛虫分类的分子生物学技术研究进展 | 第17-22页 |
·简单重复序列锚定PCR | 第17-18页 |
·限制性酶切片段长度多态性及核酸探针技术 | 第18页 |
·随机扩增多态性DNA | 第18-19页 |
·PCR- 单链构象多态性分析 | 第19-20页 |
·多重PCR ( multiplex PCR) | 第20-21页 |
·DNA 序列分析及分子系统发生研究 | 第21-22页 |
3 旋毛虫抗原的研究 | 第22-32页 |
·旋毛虫表面抗原 | 第22-24页 |
·虫体抗原 | 第24-25页 |
·杆细胞颗粒相关抗原 | 第25页 |
·旋毛虫排泄/分泌(Excretory-Secretory,ES)抗原 | 第25-29页 |
·旋毛虫重组抗原 | 第29-32页 |
4 旋毛虫病的检测方法 | 第32-39页 |
·检测病原 | 第32-33页 |
·免疫学诊断 | 第33-37页 |
·皮内试验 | 第33页 |
·补体结合试验(CF) | 第33页 |
·凝集试验 | 第33-34页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第34-35页 |
·免疫酶染色试验(IEST) | 第35-36页 |
·增强化学发光酶免疫染色试验(ECIA) | 第36页 |
·循环抗原的检测 | 第36页 |
·聚醛化聚苯乙烯( PAPS)免疫微球快速诊断法 | 第36页 |
·免疫聚合酶链反应法( Immuno-PCR) | 第36-37页 |
·Western 印迹技术 | 第37页 |
·聚合酶链式反应(PCR)检测技术 | 第37-39页 |
第二篇 研究内容 | 第39-70页 |
第一章 伪旋毛虫肌幼虫WR29 抗原基因的序列分析及克隆 | 第39-51页 |
·材料与方法 | 第39-43页 |
·材料 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-43页 |
·结果 | 第43-49页 |
·分析 | 第43-48页 |
·pBluescript-WR29 目的片段PCR 扩增 | 第48页 |
·pMD -WR29 克隆载体的构建 | 第48-49页 |
·重组质粒pMD18T-WR29 的序列鉴定 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
第二章 伪旋毛虫肌幼虫WR29 抗原基因重组表达载体的构建及高效表达 | 第51-59页 |
·材料与方法 | 第51-56页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-56页 |
·结果 | 第56-58页 |
·重组质粒pET-WR29 的构建 | 第56-57页 |
·重组质粒的测序鉴定 | 第57页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第57页 |
·重组蛋白的表达量测定 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58页 |
·小结 | 第58-59页 |
第三章 伪旋毛虫肌幼虫WR29 抗原基因重组蛋白的鉴定及在不同发育时期的表达分析 | 第59-70页 |
·材料与方法 | 第59-66页 |
·材料 | 第59-60页 |
·方法 | 第60-62页 |
·兔抗WR29 重组蛋白抗血清的制备 | 第62页 |
·Western blotting 检测 | 第62-66页 |
·结果 | 第66-68页 |
·包涵体的纯化 | 第66页 |
·血清效价的测定 | 第66页 |
·Western blotting 检测结果 | 第66-67页 |
·各组样品总RNA 纯度及完整性分析 | 第67页 |
·WR29mRNA 检测情况 | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
·小结 | 第69-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
导师及作者简介 | 第81-83页 |
中文摘要 | 第83-85页 |
ABSTRACT | 第85-86页 |