| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 前言 | 第6-7页 |
| 第一章 材料与方法 | 第7-20页 |
| 1.仪器、试剂和耗材 | 第7-9页 |
| 2.目的基因的制备 | 第9-12页 |
| 3.腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV-IL-10构建 | 第12-14页 |
| 4.在RecA~+BJ5183宿主菌中构建重组子 | 第14-16页 |
| 5.重组腺病毒载体转染293细胞 | 第16页 |
| 6.重组腺病毒IL-10基因的表达 | 第16-17页 |
| 7.重组腺病毒感染RINm-5F细胞 | 第17页 |
| 8.ELISA检测感染细胞目的基因的表达 | 第17-18页 |
| 9.胰岛素释放试验 | 第18页 |
| 10.培养上清中NO、NOS测定 | 第18页 |
| 11.RINm-5F细胞凋亡的检测 | 第18-20页 |
| 第二章 结果 | 第20-27页 |
| 1.目的基因RT-PCR电泳结果 | 第20页 |
| 2.融合基因PCR电泳结果 | 第20-21页 |
| 3.腺病毒质粒穿梭载体pAdTrack-CMV-IL-10鉴定 | 第21页 |
| 4.大肠杆菌RecA~+BJ5183中重组腺病毒载体pAd-IL-10构建 | 第21-22页 |
| 5.重组腺病毒的包装及滴度测定 | 第22-23页 |
| ·细胞中重组腺病毒的表达 | 第23页 |
| 7.病毒感染RINm-5F目的蛋白测定 | 第23-25页 |
| 8.RINm-5F细胞分泌胰岛素的影响 | 第25页 |
| 9.培养上清中NO、NOS含量测定结果 | 第25-26页 |
| 10.IL-10对LPS诱导的大鼠胰岛细胞凋亡的影响 | 第26-27页 |
| 第三章 讨论 | 第27-32页 |
| 1.载体选择 | 第27-29页 |
| 2.目的基因的选择 | 第29页 |
| 3.IL-10腺病毒表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 4.vAd-IL-10在RINm5F细胞中表达及活性检测 | 第30-31页 |
| 5.IL-10基因治疗的意义 | 第31-32页 |
| 第四章 结论 | 第32-33页 |
| 附图1 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-37页 |
| 文献综述 | 第37-49页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
