摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-20页 |
·蛋白质翻译后修饰 | 第9-11页 |
·概念 | 第9页 |
·研究进展 | 第9-10页 |
·研究意义 | 第10-11页 |
·蛋白质泛素化的研究进展 | 第11-13页 |
·泛素 | 第11页 |
·泛素化过程 | 第11-12页 |
·泛素化的生物功能 | 第12-13页 |
·蛋白质(类)泛素化的研究进展 | 第13页 |
·小泛素相关修饰物---SUMO | 第13-14页 |
·SUMO 化修饰 | 第14-15页 |
·SUMO 化修饰的生化反应过程 | 第14-15页 |
·SUMO 化与泛素化过程的异同之处 | 第15页 |
·SUMO 化的生物学功能 | 第15-18页 |
·作为蛋白定位的信号及参与转录调控过程 | 第16-17页 |
·拮抗泛素化 | 第17-18页 |
·调控细胞周期 | 第18页 |
·第二类SUMO 家族 | 第18-19页 |
·本研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-35页 |
·材料 | 第20-24页 |
·实验材料 | 第20页 |
·试验试剂 | 第20-24页 |
·主要仪器设备 | 第24-25页 |
·试验方法 | 第25-35页 |
第三章 结果 | 第35-44页 |
·人SUMO-3 基因片段的扩增 | 第35页 |
·人 SUMO-3 基因原核表达载体 pET41a(+)-SUMO-3 的构建和鉴定 | 第35-36页 |
·重组质粒 pET41a(+)-SUMO-3 在大肠杆菌中的表达 | 第36-38页 |
·诱导温度对重组质粒pET41a(+)-SUMO-3 表达的影响 | 第36页 |
·诱导剂IPTG 浓度对重组质粒pET41a(+)-SUMO-3 表达的影响 | 第36-37页 |
·诱导时间对重组质粒pET41a(+)-SUMO-3 表达的影响 | 第37-38页 |
·融合蛋白GST-SUMO-3 的纯化及融合蛋白酶切鉴定 | 第38-39页 |
·兔抗人SUMO-3 多克隆抗体鉴定 | 第39-41页 |
·ELISA 检测 | 第39页 |
·Western blot 检测 | 第39-40页 |
·Hela 细胞内源性SUMO-3 的检测 | 第40-41页 |
·人 SUMO-3 基因真核表达载体 pCMV-Myc/HA-SUMO-3 的构建和鉴定 | 第41-42页 |
·人 SUMO-3 基因荧光真核表达载体 pEGFP-c1/pDsRed1-c1-SUMO-3 的 构建和鉴定 | 第42页 |
·SUMO-3 蛋白在亚细胞结构的定位分布 | 第42页 |
·SUMO-3 蛋白和 p53 蛋白在细胞内共定位的研究 | 第42-44页 |
第四章 讨论 | 第44-47页 |
·SUMO-3 基因扩增片段的选择 | 第44页 |
·原核表达系统的选择 | 第44页 |
·兔抗人SUMO-3 多克隆抗体的制备 | 第44-45页 |
·多克隆抗体的鉴定 | 第45页 |
·SUMO-3 对 p53 的修饰 | 第45-47页 |
第五章 总结及展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录1 | 第53-56页 |
附录2 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |