摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
符号及缩略语 | 第14-16页 |
第一篇 文献综述 | 第16-66页 |
第一章 新城疫的流行概况及研究进展 | 第16-42页 |
1 新城疫的流行概况 | 第16-18页 |
2 病原学研究进展 | 第18-26页 |
·病毒的分类与理化特性 | 第18-19页 |
·生物学特性 | 第19页 |
·抗原性 | 第19-20页 |
·NDV的毒力和致病性 | 第20-21页 |
·NDV的分子生物学特性 | 第21-25页 |
·NDV基因组组成 | 第21页 |
·NDV结构蛋白分布及特征 | 第21-25页 |
·致病性的分子基础 | 第25-26页 |
3 ND诊断技术的研究进展 | 第26-30页 |
·单克隆抗体技术 | 第27-28页 |
·核酸探针技术 | 第28页 |
·限制性核酸内切酶分析 | 第28-29页 |
·RT-PCR技术 | 第29-30页 |
4 ND防制方法的研究进展 | 第30-35页 |
·鸡新城疫灭活疫苗 | 第30页 |
·鸡新城疫活疫苗 | 第30-31页 |
·鸡新城疫基因工程苗 | 第31-35页 |
·亚单位疫苗 | 第31-32页 |
·DNA疫苗 | 第32-33页 |
·重组活载体疫苗 | 第33-35页 |
参考文献 | 第35-42页 |
第二章 核酸疫苗及免疫佐剂的研究及应用 | 第42-66页 |
1 核酸疫苗的研究进展 | 第42-53页 |
·核酸疫苗的结构 | 第43页 |
·核酸疫苗的作用机理 | 第43-46页 |
·核酸疫苗的优点及不足 | 第46-49页 |
·核酸疫苗的优点 | 第46-48页 |
·核酸疫苗的不足 | 第48-49页 |
·影响核酸疫苗免疫效果的主要因素 | 第49-52页 |
·目的基因的选择 | 第49页 |
·质粒载体的选择 | 第49-50页 |
·免疫剂量及次数 | 第50页 |
·免疫方法与途径 | 第50-51页 |
·免疫增强剂和免疫佐剂的应用 | 第51页 |
·接种前组织预处理 | 第51-52页 |
·增强DNA疫苗免疫效果的策略 | 第52-53页 |
2 DNA疫苗免疫佐剂的研究与应用 | 第53-59页 |
·细胞因子佐剂 | 第53页 |
·CpG DNA(ODN)佐剂 | 第53-54页 |
·补体分子佐剂C3d | 第54-59页 |
·C3d的分子生物学特性 | 第55页 |
·C3d的分子佐剂作用 | 第55-57页 |
·C3d可能的作用机制 | 第57-59页 |
3 本研究的目的及意义 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
第二篇 实验研究 | 第66-126页 |
第三章 NDV的分离鉴定与生物学特性研究 | 第66-78页 |
1 材料与方法 | 第66-69页 |
·材料 | 第66-67页 |
·新城疫标准毒株 | 第66页 |
·标准血清 | 第66-67页 |
·SPF鸡和鸡胚 | 第67页 |
·病料 | 第67页 |
·试剂 | 第67页 |
·主要仪器 | 第67页 |
·方法 | 第67-69页 |
·病料的来源 | 第67页 |
·病毒的分离与增殖 | 第67-68页 |
·病毒分离株的鉴定 | 第68页 |
·分离株毒力测定 | 第68-69页 |
·动物回归试验 | 第69页 |
·新城疫鸡群的平均抗体效价测定 | 第69页 |
2 结果 | 第69-73页 |
·临床症状与流行特点 | 第69页 |
·病毒的分离 | 第69页 |
·病毒分离株的鉴定 | 第69-71页 |
·HA和HI试验 | 第69-70页 |
·血凝谱测定 | 第70-71页 |
·分离株毒力测定 | 第71页 |
·动物回归试验 | 第71-73页 |
·新城疫鸡群的平均抗体效价测定结果 | 第73页 |
3 讨论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第四章 山东省新城疫病毒LY1分离株F与HN基因序列分析 | 第78-104页 |
1 材料与方法 | 第79-88页 |
·材料 | 第79-81页 |
·SPF鸡胚 | 第79页 |
·菌株与质粒载体 | 第79页 |
·病毒 | 第79页 |
·试剂 | 第79页 |
·溶液配制 | 第79-81页 |
·主要仪器、设备 | 第81页 |
·方法 | 第81-88页 |
·NDV LY1株增殖与浓缩 | 第81页 |
·病毒RNA的提取 | 第81-82页 |
·NDV F基因和HN基因的的RT-PCR扩增 | 第82-84页 |
·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第84页 |
·PCR产物的回收 | 第84-85页 |
·NDV F基因和HN基因的克隆与鉴定 | 第85-86页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第86-88页 |
·阳性质粒测序与序列分析 | 第88页 |
2 结果 | 第88-100页 |
·F和HN基因的RT-PCR扩增结果 | 第88-89页 |
·F基因的RT-PCR扩增结果 | 第88-89页 |
·HN基因的RT-PCR扩增结果 | 第89页 |
·F基因、HN基因的克隆及阳性克隆的鉴定结果 | 第89-91页 |
·F基因的克隆及阳性克隆的鉴定 | 第89页 |
·HN基因的克隆及阳性克隆的鉴定 | 第89-91页 |
·F基因和HN基因的克隆测序及序列分析比较 | 第91-95页 |
·F基因的克隆测序及序列分析比较 | 第91-93页 |
·HN基因的克隆测序及序列分析比较 | 第93-95页 |
·与国内外标准株同源性分析比较 | 第95-97页 |
·对新城疫山东分离株(LY1)F蛋白裂解位点区(112~117)的研究 | 第97-98页 |
·系统发育进化树 | 第98-100页 |
·F基因发育进化树 | 第98-99页 |
·HN基因发育进化树 | 第99-100页 |
3 讨论 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-104页 |
第五章 新城疫不同基因型灭活油乳疫苗的研制及免疫效果测定 | 第104-114页 |
1 材料与方法 | 第105-107页 |
·材料 | 第105页 |
·种毒 | 第105页 |
·试验用鸡胚和鸡 | 第105页 |
·1%红细胞悬液 | 第105页 |
·主要试剂 | 第105页 |
·主要仪器 | 第105页 |
·方法 | 第105-107页 |
·LY1株半数致死量(LD_(50))测定 | 第105页 |
·新城疫病毒油乳剂灭活疫苗的制备 | 第105-106页 |
·疫苗质量的检验 | 第106页 |
·免疫效果试验 | 第106-107页 |
·攻毒保护试验 | 第107页 |
2 结果 | 第107-109页 |
·LY1株半数致死量(LD_(50))测定结果 | 第107页 |
·疫苗质量检验结果 | 第107-108页 |
·物理性状 | 第107页 |
·无菌试验 | 第107-108页 |
·安全性试验结果 | 第108页 |
·免疫效果试验结果 | 第108-109页 |
·攻毒保护试验结果 | 第109页 |
3 讨论 | 第109-112页 |
参考文献 | 第112-114页 |
第六章 鸡C3d分子佐剂NDV HN基因疫苗效果研究 | 第114-126页 |
1 材料与方法 | 第115-118页 |
·材料 | 第115页 |
·方法 | 第115-118页 |
·RT-PCR扩增NDV-HN基因 | 第115页 |
·C3d-P29-HN融合基因重组质粒的构建 | 第115-117页 |
·重组质粒的大量提取 | 第117-118页 |
·NDV C3d-P29 HN基因疫苗免疫抗体效价检测 | 第118页 |
·攻毒保护试验 | 第118页 |
2 结果 | 第118-121页 |
·RT-PCR扩增新城疫LY1株HN基因 | 第118-119页 |
·抗原基因的插入 | 第119-120页 |
·血凝抑制抗体变化 | 第120页 |
·攻毒保护试验结果 | 第120-121页 |
3 讨论 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-126页 |
全文总结 | 第126-128页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第128-130页 |
致谢 | 第130页 |