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山东鸡新城疫病毒分离鉴定与Ⅱ+Ⅶ基因型灭活疫苗研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
符号及缩略语第14-16页
第一篇 文献综述第16-66页
 第一章 新城疫的流行概况及研究进展第16-42页
  1 新城疫的流行概况第16-18页
  2 病原学研究进展第18-26页
   ·病毒的分类与理化特性第18-19页
   ·生物学特性第19页
   ·抗原性第19-20页
   ·NDV的毒力和致病性第20-21页
   ·NDV的分子生物学特性第21-25页
     ·NDV基因组组成第21页
     ·NDV结构蛋白分布及特征第21-25页
   ·致病性的分子基础第25-26页
  3 ND诊断技术的研究进展第26-30页
   ·单克隆抗体技术第27-28页
   ·核酸探针技术第28页
   ·限制性核酸内切酶分析第28-29页
   ·RT-PCR技术第29-30页
  4 ND防制方法的研究进展第30-35页
   ·鸡新城疫灭活疫苗第30页
   ·鸡新城疫活疫苗第30-31页
   ·鸡新城疫基因工程苗第31-35页
     ·亚单位疫苗第31-32页
     ·DNA疫苗第32-33页
     ·重组活载体疫苗第33-35页
  参考文献第35-42页
 第二章 核酸疫苗及免疫佐剂的研究及应用第42-66页
  1 核酸疫苗的研究进展第42-53页
   ·核酸疫苗的结构第43页
   ·核酸疫苗的作用机理第43-46页
   ·核酸疫苗的优点及不足第46-49页
     ·核酸疫苗的优点第46-48页
     ·核酸疫苗的不足第48-49页
   ·影响核酸疫苗免疫效果的主要因素第49-52页
     ·目的基因的选择第49页
     ·质粒载体的选择第49-50页
     ·免疫剂量及次数第50页
     ·免疫方法与途径第50-51页
     ·免疫增强剂和免疫佐剂的应用第51页
     ·接种前组织预处理第51-52页
   ·增强DNA疫苗免疫效果的策略第52-53页
  2 DNA疫苗免疫佐剂的研究与应用第53-59页
   ·细胞因子佐剂第53页
   ·CpG DNA(ODN)佐剂第53-54页
   ·补体分子佐剂C3d第54-59页
     ·C3d的分子生物学特性第55页
     ·C3d的分子佐剂作用第55-57页
     ·C3d可能的作用机制第57-59页
  3 本研究的目的及意义第59-60页
  参考文献第60-66页
第二篇 实验研究第66-126页
 第三章 NDV的分离鉴定与生物学特性研究第66-78页
  1 材料与方法第66-69页
   ·材料第66-67页
     ·新城疫标准毒株第66页
     ·标准血清第66-67页
     ·SPF鸡和鸡胚第67页
     ·病料第67页
     ·试剂第67页
     ·主要仪器第67页
   ·方法第67-69页
     ·病料的来源第67页
     ·病毒的分离与增殖第67-68页
     ·病毒分离株的鉴定第68页
     ·分离株毒力测定第68-69页
     ·动物回归试验第69页
     ·新城疫鸡群的平均抗体效价测定第69页
  2 结果第69-73页
   ·临床症状与流行特点第69页
   ·病毒的分离第69页
   ·病毒分离株的鉴定第69-71页
     ·HA和HI试验第69-70页
     ·血凝谱测定第70-71页
   ·分离株毒力测定第71页
   ·动物回归试验第71-73页
   ·新城疫鸡群的平均抗体效价测定结果第73页
  3 讨论第73-75页
  参考文献第75-78页
 第四章 山东省新城疫病毒LY1分离株F与HN基因序列分析第78-104页
  1 材料与方法第79-88页
   ·材料第79-81页
     ·SPF鸡胚第79页
     ·菌株与质粒载体第79页
     ·病毒第79页
     ·试剂第79页
     ·溶液配制第79-81页
     ·主要仪器、设备第81页
   ·方法第81-88页
     ·NDV LY1株增殖与浓缩第81页
     ·病毒RNA的提取第81-82页
     ·NDV F基因和HN基因的的RT-PCR扩增第82-84页
     ·琼脂糖凝胶电泳分析第84页
     ·PCR产物的回收第84-85页
     ·NDV F基因和HN基因的克隆与鉴定第85-86页
     ·重组质粒的提取与鉴定第86-88页
     ·阳性质粒测序与序列分析第88页
  2 结果第88-100页
   ·F和HN基因的RT-PCR扩增结果第88-89页
     ·F基因的RT-PCR扩增结果第88-89页
     ·HN基因的RT-PCR扩增结果第89页
   ·F基因、HN基因的克隆及阳性克隆的鉴定结果第89-91页
     ·F基因的克隆及阳性克隆的鉴定第89页
     ·HN基因的克隆及阳性克隆的鉴定第89-91页
   ·F基因和HN基因的克隆测序及序列分析比较第91-95页
     ·F基因的克隆测序及序列分析比较第91-93页
     ·HN基因的克隆测序及序列分析比较第93-95页
   ·与国内外标准株同源性分析比较第95-97页
   ·对新城疫山东分离株(LY1)F蛋白裂解位点区(112~117)的研究第97-98页
   ·系统发育进化树第98-100页
     ·F基因发育进化树第98-99页
     ·HN基因发育进化树第99-100页
  3 讨论第100-102页
  参考文献第102-104页
 第五章 新城疫不同基因型灭活油乳疫苗的研制及免疫效果测定第104-114页
  1 材料与方法第105-107页
   ·材料第105页
     ·种毒第105页
     ·试验用鸡胚和鸡第105页
     ·1%红细胞悬液第105页
     ·主要试剂第105页
     ·主要仪器第105页
   ·方法第105-107页
     ·LY1株半数致死量(LD_(50))测定第105页
     ·新城疫病毒油乳剂灭活疫苗的制备第105-106页
     ·疫苗质量的检验第106页
     ·免疫效果试验第106-107页
     ·攻毒保护试验第107页
  2 结果第107-109页
   ·LY1株半数致死量(LD_(50))测定结果第107页
   ·疫苗质量检验结果第107-108页
     ·物理性状第107页
     ·无菌试验第107-108页
     ·安全性试验结果第108页
   ·免疫效果试验结果第108-109页
   ·攻毒保护试验结果第109页
  3 讨论第109-112页
  参考文献第112-114页
 第六章 鸡C3d分子佐剂NDV HN基因疫苗效果研究第114-126页
  1 材料与方法第115-118页
   ·材料第115页
   ·方法第115-118页
     ·RT-PCR扩增NDV-HN基因第115页
     ·C3d-P29-HN融合基因重组质粒的构建第115-117页
     ·重组质粒的大量提取第117-118页
     ·NDV C3d-P29 HN基因疫苗免疫抗体效价检测第118页
     ·攻毒保护试验第118页
  2 结果第118-121页
   ·RT-PCR扩增新城疫LY1株HN基因第118-119页
   ·抗原基因的插入第119-120页
   ·血凝抑制抗体变化第120页
   ·攻毒保护试验结果第120-121页
  3 讨论第121-122页
  参考文献第122-126页
全文总结第126-128页
攻读学位期间发表的学术论文第128-130页
致谢第130页

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