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陆地棉细胞质雄性不育恢复基因的遗传定位及GhPG2基因的克隆与表达分析

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
第一章 绪论第14-28页
   ·棉花细胞质雄性不育和育性恢复的研究进展第15-21页
     ·棉花细胞质雄性不育系和恢复系遗传学研究及利用第15-16页
     ·棉花细胞质雄性不育的细胞学以及生理生化研究第16-17页
     ·棉花细胞质雄性不育和育性恢复的分子机理第17-19页
     ·棉花细胞质雄性不育育性恢复的分子标记及遗传定位的研究第19-20页
     ·棉花细胞质雄性不育育性恢复相关基因克隆的研究第20-21页
   ·图位克隆第21-24页
     ·图位克隆的技术步骤第21-23页
     ·图位克隆的局限性第23-24页
   ·BAC文库的研究进展第24-26页
     ·BAC文库的优点第24-25页
     ·BAC文库的应用第25页
     ·棉花BAC文库的研究进展第25-26页
   ·多聚半乳糖醛酸酶研究进展第26页
   ·展望第26-27页
   ·研究目的和意义第27页
   ·本文研究的策略和方法第27-28页
第二章 陆地棉细胞质雄性不育恢复基因遗传定位第28-47页
   ·材料第28-30页
     ·遗传作图材料第28页
     ·试剂第28页
     ·分子标记的种类第28-30页
   ·方法第30-33页
     ·育性调查第30页
     ·改良CTAB法提取棉花基因组第30页
     ·分子标记分析第30-33页
     ·遗传图谱的构建第33页
   ·结果分析第33-43页
     ·BC_1F_1群体遗传分析第33-34页
     ·分子标记分析第34-43页
   ·讨论第43-46页
     ·影响遗传图谱的因素第43-44页
     ·育性恢复基因紧密连锁标记的应用第44页
     ·EST-SSR标记第44页
     ·恢复基因的染色体定位及遗传图谱比较分析第44-46页
   ·小结第46-47页
第三章 部分与恢复基因连锁的分子标记筛选BAC文库第47-65页
   ·材料第47-48页
     ·BAC文库第47页
     ·试剂第47页
     ·筛选BAC文库的分子标记第47-48页
     ·载体和菌株第48页
   ·方法第48-52页
     ·BAC文库混合池的构建第48-49页
     ·PCR直选法筛选BAC文库的原理第49-50页
     ·质粒DNA中量提取第50-51页
     ·PCR反应程序的设置第51页
     ·BAC末端序列分析和分子标记开发第51页
     ·BAC末端序列重叠群的构建第51-52页
   ·结果分析第52-63页
     ·部分分子标记队C克隆的筛选第52-58页
     ·BAC末端序列注释第58-59页
     ·BAC末端序列构建重叠群第59-60页
     ·BAC末端转化为STS标记第60-62页
     ·STS标记的验证第62页
     ·部分分子标记的物理图谱第62-63页
   ·讨论第63-64页
     ·PCR直选法筛选BAC文库的优点第63页
     ·影响物理图谱构建的因素第63页
     ·BAC末端序列的应用第63-64页
   ·小结第64-65页
第四章 HZ-55-E7 BAC克隆插入片段的序列分析第65-90页
   ·材料第65页
     ·BAC克隆的筛选第65页
     ·试剂第65页
     ·载体和菌株第65页
   ·方法第65-68页
     ·质粒DNA大量提取第65-66页
     ·BAC克隆酶切鉴定插入片段大小第66-67页
     ·阳性质粒鉴定和Shotgun法测序BAC克隆第67页
     ·生物信息学软件分析第67-68页
   ·结果分析第68-90页
     ·阳性质粒鉴定第68-70页
     ·HZ一55一〔7插入片段序列特征分析第70页
     ·序列分析新基因的结构特征第70-84页
     ·与拟南芥基因组序列的比较分析第84-90页
第五章 棉花多聚半乳糖醛酸酶GhPG2和GhPG3基因序列和表达分析第90-106页
   ·材料和方法第90-95页
     ·试验材料第90页
     ·试剂第90-91页
     ·载体和菌株第91页
     ·引物序列第91-92页
     ·改良硼酸法提取RNA第92-93页
     ·目的DNA片段回收、连接和转化第93页
     ·生物信息学分析第93-94页
     ·Southern分析第94-95页
     ·半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析第95页
   ·结果分析第95-103页
     ·GhPG2基因的克隆及其序列分析第95-99页
     ·GhPG2基因在棉花不育系、保持系和恢复系中的southern分析第99-100页
     ·GhPG2基因在棉花不育系、保持系和恢复系中的表达谱分析第100-102页
     ·GhPG3基因的克隆及序列分析第102-103页
     ·GhPG2和GhPG3基因启动子预测分析第103页
   ·讨论第103-105页
   ·小结第105-106页
第六章 全文结论第106-109页
   ·棉花细胞质雄性不育恢复基因的遗传定位第106页
   ·分子标记筛选BAC文库第106-107页
   ·HZ-55-E7克隆序列测定及生物信息学分析第107页
   ·GhPG2基因的克隆与表达分析第107页
   ·创新点第107-109页
参考文献第109-118页
致谢第118-119页
作者简历第119-120页
附录第120-121页

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