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籼稻高效遗传转化体系的建立

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述第14-30页
   ·水稻遗传转化方法评述第14-17页
     ·直接转化方法第14-17页
     ·农杆菌介导法第17页
   ·农杆菌及其介导水稻遗传转化的原理第17-18页
   ·农杆菌介导水稻遗传转化研究的回顾第18页
     ·农杆菌的摸索阶段第18页
     ·农杆菌的技术突破和成熟阶段第18页
   ·影响农杆菌介导水稻遗传转化效率的因素第18-24页
     ·转基因受体的影响第19-21页
     ·水稻基因型第21页
     ·农杆菌菌株和质粒载体第21页
     ·vir 基因的诱导第21-22页
     ·农杆菌侵染方式农杆菌菌液浓度第22-23页
     ·共培养条件第23页
     ·筛选标记基因以及筛选剂的选择第23-24页
   ·遗传转化方法在水稻遗传改良上的应用第24-29页
     ·抗病性改良第24-26页
     ·抗虫性改良第26-27页
     ·抗逆性改良第27-28页
     ·品质性状的改良第28-29页
   ·本研究的目的和意义第29-30页
     ·本研究的目的第29页
     ·本研究的意义第29-30页
第二章 材料与方法第30-39页
   ·实验材料第30页
     ·供试水稻品种第30页
     ·菌株和质粒第30页
   ·实验仪器和药品第30-31页
     ·主要药品第30页
     ·主要仪器第30-31页
   ·实验方法第31-36页
     ·农杆菌介导的水稻转化全过程[115]第31-32页
     ·水稻转化频率的计算第32页
     ·水稻叶片DNA 提取第32-33页
     ·小量提取质粒DNA(碱裂解法)第33-34页
     ·转基因植株的分子检测第34-35页
     ·农杆菌感受态细胞的制备及电激法转化第35-36页
   ·试验设计第36-39页
     ·水稻转化受体的选择第36页
     ·农杆菌对水稻愈伤组织转化的试验设计第36-37页
     ·组织培养褐变处理第37页
     ·转化子的筛选和植株再生第37-39页
第三章 结果与分析第39-55页
   ·转化前实验结果第39-40页
     ·外植体对水稻转化频率的影响第39页
     ·愈伤组织继代次数对转化频率的影响第39-40页
   ·转化过程中的实验结果第40-47页
     ·农杆菌培养方式改变对对水稻转化率的影响第40-41页
     ·菌液浓度对转化效率的影响第41-43页
     ·农杆菌侵染方式对水稻转化率的影响第43-44页
     ·是否添加AS 对转化效率的影响第44-45页
     ·共培养基pH 值对转化效率的影响第45-47页
   ·转化后的实验结果第47-51页
     ·抗氧化剂对水稻愈伤组织转化率的影响第47-48页
     ·干燥处理对抗性愈伤组织获得的影响第48-49页
     ·不同筛选方式对农杆菌介导水稻转化效率的影响第49页
     ·不同的碳源对水稻转化率的影响第49-50页
     ·抗性愈伤筛选时间对分化的影响第50-51页
   ·优化后的农杆菌转化体系第51-55页
     ·优化后的明恢86 体系第51-52页
     ·新旧农杆菌介导转化体系对比第52页
     ·转基因植株的分子生物学检测第52-53页
     ·电激法将质粒pGUSAJ4 导入三种农杆菌中第53页
     ·三种农杆菌株对水稻愈伤组织转化频率的比较第53-55页
第四章 讨论第55-60页
   ·农杆菌菌株和载体对转化频率的的影响第55页
   ·转化受体类型及生理状态对转化频率的的影响第55-56页
   ·愈伤组织继代次数对转化率的影响第56页
   ·共培养时几个因素对转化效率的影响第56-58页
     ·酚类化合物第56-57页
     ·农杆菌菌液浓度第57页
     ·侵染方式第57页
     ·共培养温度第57页
     ·共培养PH第57-58页
   ·关于组织培养过程中的褐化问题第58页
   ·碳源对水稻转化的影响第58-60页
第五章 结论第60-62页
参考文献第62-70页
图版1:农杆菌介导转化水稻胚性愈伤获得完整植株第70-73页
附录1:农杆菌介导的转化所用基本培养基配方第73-78页
附录2:实验结果数据第78-84页
致谢第84页

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