图表目录 | 第1-13页 |
缩略词 | 第13-14页 |
摘要 | 第14-18页 |
Abstract | 第18-23页 |
第一部分 文献综述 | 第23-59页 |
第一章 奶牛乳房炎 | 第23-31页 |
1 奶牛乳腺的防御系统 | 第23-26页 |
·物理屏障 | 第24页 |
·免疫细胞 | 第24-25页 |
·溶性因子 | 第25-26页 |
2 奶牛乳房炎类型 | 第26页 |
3 奶牛乳房炎的流行 | 第26-27页 |
4 奶牛乳房炎的危害 | 第27-28页 |
·经济损失 | 第27-28页 |
·共卫生安全问题 | 第28页 |
·动物福利 | 第28页 |
5 奶牛乳房炎的诊断 | 第28-31页 |
·体细胞计数法 | 第28-29页 |
·基于牛奶酶活性变化的诊断方法 | 第29页 |
·基于牛奶理化变化的诊断方法 | 第29-30页 |
·微生物学诊断 | 第30-31页 |
第二章 奶牛乳房炎主要病原 | 第31-37页 |
1 传染性病原 | 第32-33页 |
·金黄色葡萄球菌 | 第32-33页 |
·无乳链球菌 | 第33页 |
·支原体 | 第33页 |
2 环境性病原 | 第33-35页 |
·乳房链球菌 | 第33-34页 |
·大肠菌群 | 第34页 |
·凝固酶阴性葡萄球菌 | 第34-35页 |
3 奶牛乳房炎防治措施对病原的影响 | 第35-37页 |
第三章 金黄色葡萄球菌分型 | 第37-47页 |
1 金黄色葡萄球菌的表型分型 | 第37-39页 |
·血清学分型 | 第37-38页 |
·噬菌体分型 | 第38页 |
·耐药谱分型 | 第38页 |
·蛋白质电泳-多位点酶电泳 | 第38-39页 |
2 金黄色葡萄球菌的分子分型 | 第39-41页 |
·质粒多态性分型 | 第39页 |
·核糖分型 | 第39-40页 |
·脉冲场凝胶电泳分型 | 第40页 |
·特异性功能集团的多态性分型 | 第40页 |
·特异性DNA片段多态性分型 | 第40-41页 |
3 脉冲场凝胶电泳技术及其在金黄色葡萄球菌分型中的应用 | 第41-45页 |
·脉冲场凝胶电泳的技术原理 | 第42页 |
·脉冲场凝胶电泳装置类型 | 第42-43页 |
·脉冲场凝胶电泳的应用 | 第43-44页 |
·脉冲场凝胶电泳的结果分析 | 第44-45页 |
4 金黄色葡萄球菌分型方法的趋势 | 第45-47页 |
第四章 金黄色葡萄球菌耐药性研究 | 第47-49页 |
第五章 金黄色葡萄球菌的主要毒力因子 | 第49-57页 |
1 金黄色葡萄球菌毒力因子 | 第49-54页 |
·微生物表面黏附分子 | 第49-50页 |
·金黄色葡萄球菌的胞外酶 | 第50-51页 |
·金黄色葡萄球菌的胞外毒素 | 第51-54页 |
2 金黄色葡萄球菌疫苗 | 第54-57页 |
第六章 本研究的目的意义和主要内容 | 第57-59页 |
1 本研究的目的意义 | 第57-58页 |
2 主要研究内容 | 第58-59页 |
第二部分 试验研究 | 第59-127页 |
第一章 奶牛主要疾病发病情况的调查 | 第59-63页 |
1. 材料与方法 | 第59页 |
·调查对象 | 第59页 |
·调查内容 | 第59页 |
·调查方法 | 第59页 |
·数据分析 | 第59页 |
2. 结果与分析 | 第59-61页 |
·奶牛主要疾病发病率情况 | 第59-60页 |
·奶牛主要疾病的构成 | 第60-61页 |
·不同月份临床型乳房炎发病比较 | 第61页 |
3. 本章小结 | 第61-63页 |
第二章 浙江省主要奶牛养殖区奶牛隐性乳房炎发病及病原研究 | 第63-71页 |
第一节 浙江省主要奶牛养殖区奶牛隐性乳房炎发病情况调查 | 第63-67页 |
1 材料与方法 | 第63-65页 |
·调查对象 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63页 |
·隐性乳房炎诊断 | 第63-64页 |
·数据统计与分析 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-67页 |
·浙江省奶牛隐性乳房炎发病调查结果 | 第65-67页 |
第二节 浙江省奶牛隐性乳房炎主要病原调查 | 第67-70页 |
1 材料与方法 | 第67-68页 |
·奶样采集 | 第67页 |
·细菌分离与鉴定程序 | 第67-68页 |
·数据统计与分析 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-70页 |
·浙江省主要奶牛养殖区乳房炎主要病原菌 | 第68-69页 |
·不同规模奶牛场病原菌检出情况比较 | 第69-70页 |
第三节 本章小结 | 第70-71页 |
第三章 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌分子分型研究 | 第71-85页 |
第一节 浙江省主要奶牛养殖区乳房炎金黄色葡萄球菌PFGE分型 | 第71-79页 |
1 材料与方法 | 第71-75页 |
·细菌来源 | 第71-72页 |
·仪器与主要试剂 | 第72页 |
·金黄色葡萄球菌鉴定 | 第72页 |
·脉冲场凝胶电泳 | 第72-74页 |
·聚类分析与分型 | 第74-75页 |
2 结果与分析 | 第75-79页 |
·PFGE典型电泳图谱 | 第75页 |
·浙江省主要奶牛养殖区奶牛乳房炎金黄色葡萄球PFGE分型聚类图 | 第75-77页 |
·不同牛场的主要流行株 | 第77页 |
·杭州近郊某规模奶牛场不同年份金黄色葡萄球菌流行的比较 | 第77-79页 |
第二节 我国十四个省区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要流行株PFGE分型研究 | 第79-83页 |
1 材料与方法 | 第79-80页 |
·细菌来源 | 第79-80页 |
·仪器与主要试剂 | 第80页 |
·金黄色葡萄球菌菌株鉴定 | 第80页 |
·脉冲场凝胶电泳 | 第80页 |
2 结果与分析 | 第80-83页 |
·聚类分析 | 第80-81页 |
·不同省区的主要流行株 | 第81-83页 |
第三节 本章小结 | 第83-85页 |
第四章 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药及其与PFGE分型的相关性 | 第85-91页 |
1 材料与方法 | 第85-87页 |
·菌株来源 | 第85页 |
·主要药品与试剂 | 第85页 |
·菌株鉴定 | 第85页 |
·药敏试验 | 第85-87页 |
·金黄色葡萄球菌耐药与PFGE分型比较 | 第87页 |
2 结果与分析 | 第87-90页 |
·浙江省四个不同地区以及新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药情况 | 第87-89页 |
·浙江省四个不同地区以及新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要耐药谱 | 第89-90页 |
·金黄色葡萄球菌PFGE分型与耐药的相关性 | 第90页 |
3 本章小结 | 第90-91页 |
第五章 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要毒力因子及其与PFGE分型的相关性 | 第91-103页 |
第一节 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌超抗原基因分布及其与PFGE分型的关系 | 第91-99页 |
1 材料与方法 | 第91-94页 |
·菌株来源与鉴定 | 第91页 |
·主要仪器 | 第91页 |
·主要试剂 | 第91-92页 |
·金黄色葡萄球菌模板制备 | 第92页 |
·超抗原基因PCR扩增引物 | 第92-94页 |
·超抗原基因PCR扩增条件 | 第94页 |
·PCR模式与PCR产物测序 | 第94页 |
·奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌毒力因子分布与PFGE分型的相关性 | 第94页 |
·数据统计与分析 | 第94页 |
2 结果与分析 | 第94-99页 |
·超抗原基因PCR扩增产物电泳图谱 | 第94-96页 |
·超抗原基因PCR检测结果 | 第96-97页 |
·奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌超抗原基因类型 | 第97-98页 |
·超抗原基因类型与PFGE分型的相关性 | 第98-99页 |
第二节 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌pvl基因检测 | 第99-101页 |
1 材料与方法 | 第99-101页 |
·菌株来源与鉴定 | 第99页 |
·主要仪器 | 第99页 |
·主要试剂 | 第99页 |
·模板制备 | 第99页 |
·PCR引物 | 第99-100页 |
·PCR条件与测序 | 第100-101页 |
2 结果与分析 | 第101页 |
·PVL基因PCR扩增产物电泳图谱 | 第101页 |
·菌株检测结果 | 第101页 |
第三节 本章小结 | 第101-103页 |
第六章 金黄色葡萄球菌ClfA基因A功能区的克隆及原核表达 | 第103-113页 |
1 材料与方法 | 第103-107页 |
·实验材料 | 第103-104页 |
·方法 | 第104-107页 |
2 结果与分析 | 第107-111页 |
·PCR扩增结果和序列分析 | 第107-108页 |
·PCR产物测序分析 | 第108-109页 |
·重组表达质粒的构建和鉴定 | 第109-110页 |
·SDS-PAGE分析 | 第110-111页 |
·Western Blotting分析 | 第111页 |
3 本章小结 | 第111-113页 |
第七章 综合讨论 | 第113-125页 |
1 奶牛主要疾病与临床型乳房炎 | 第113-114页 |
2 浙江省主要奶牛养殖区隐性乳房炎发病及病原 | 第114-115页 |
3 我国部分省区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分子分型 | 第115-118页 |
4 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药情况 | 第118-119页 |
5 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的主要毒力因子 | 第119-122页 |
6 金黄色葡萄球菌ClfA基因克隆及表达 | 第122-125页 |
第八章 提示、创新点及后续研究展望 | 第125-127页 |
1 提示 | 第125-126页 |
2 创新点 | 第126页 |
3 后续研究展望 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-149页 |
攻读博士期间发表的论文和出版物 | 第149-151页 |
致谢 | 第151页 |