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奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌脉冲场凝胶电泳分型及其主要毒力因子和耐药性的研究

图表目录第1-13页
缩略词第13-14页
摘要第14-18页
Abstract第18-23页
第一部分 文献综述第23-59页
 第一章 奶牛乳房炎第23-31页
  1 奶牛乳腺的防御系统第23-26页
   ·物理屏障第24页
   ·免疫细胞第24-25页
   ·溶性因子第25-26页
  2 奶牛乳房炎类型第26页
  3 奶牛乳房炎的流行第26-27页
  4 奶牛乳房炎的危害第27-28页
   ·经济损失第27-28页
   ·共卫生安全问题第28页
   ·动物福利第28页
  5 奶牛乳房炎的诊断第28-31页
   ·体细胞计数法第28-29页
   ·基于牛奶酶活性变化的诊断方法第29页
   ·基于牛奶理化变化的诊断方法第29-30页
   ·微生物学诊断第30-31页
 第二章 奶牛乳房炎主要病原第31-37页
  1 传染性病原第32-33页
   ·金黄色葡萄球菌第32-33页
   ·无乳链球菌第33页
   ·支原体第33页
  2 环境性病原第33-35页
   ·乳房链球菌第33-34页
   ·大肠菌群第34页
   ·凝固酶阴性葡萄球菌第34-35页
  3 奶牛乳房炎防治措施对病原的影响第35-37页
 第三章 金黄色葡萄球菌分型第37-47页
  1 金黄色葡萄球菌的表型分型第37-39页
   ·血清学分型第37-38页
   ·噬菌体分型第38页
   ·耐药谱分型第38页
   ·蛋白质电泳-多位点酶电泳第38-39页
  2 金黄色葡萄球菌的分子分型第39-41页
   ·质粒多态性分型第39页
   ·核糖分型第39-40页
   ·脉冲场凝胶电泳分型第40页
   ·特异性功能集团的多态性分型第40页
   ·特异性DNA片段多态性分型第40-41页
  3 脉冲场凝胶电泳技术及其在金黄色葡萄球菌分型中的应用第41-45页
   ·脉冲场凝胶电泳的技术原理第42页
   ·脉冲场凝胶电泳装置类型第42-43页
   ·脉冲场凝胶电泳的应用第43-44页
   ·脉冲场凝胶电泳的结果分析第44-45页
  4 金黄色葡萄球菌分型方法的趋势第45-47页
 第四章 金黄色葡萄球菌耐药性研究第47-49页
 第五章 金黄色葡萄球菌的主要毒力因子第49-57页
  1 金黄色葡萄球菌毒力因子第49-54页
   ·微生物表面黏附分子第49-50页
   ·金黄色葡萄球菌的胞外酶第50-51页
   ·金黄色葡萄球菌的胞外毒素第51-54页
  2 金黄色葡萄球菌疫苗第54-57页
 第六章 本研究的目的意义和主要内容第57-59页
  1 本研究的目的意义第57-58页
  2 主要研究内容第58-59页
第二部分 试验研究第59-127页
 第一章 奶牛主要疾病发病情况的调查第59-63页
  1. 材料与方法第59页
   ·调查对象第59页
   ·调查内容第59页
   ·调查方法第59页
   ·数据分析第59页
  2. 结果与分析第59-61页
   ·奶牛主要疾病发病率情况第59-60页
   ·奶牛主要疾病的构成第60-61页
   ·不同月份临床型乳房炎发病比较第61页
  3. 本章小结第61-63页
 第二章 浙江省主要奶牛养殖区奶牛隐性乳房炎发病及病原研究第63-71页
  第一节 浙江省主要奶牛养殖区奶牛隐性乳房炎发病情况调查第63-67页
   1 材料与方法第63-65页
   ·调查对象第63页
   ·主要试剂第63页
   ·隐性乳房炎诊断第63-64页
   ·数据统计与分析第64-65页
   2 结果与分析第65-67页
   ·浙江省奶牛隐性乳房炎发病调查结果第65-67页
  第二节 浙江省奶牛隐性乳房炎主要病原调查第67-70页
   1 材料与方法第67-68页
   ·奶样采集第67页
   ·细菌分离与鉴定程序第67-68页
   ·数据统计与分析第68页
   2 结果与分析第68-70页
   ·浙江省主要奶牛养殖区乳房炎主要病原菌第68-69页
   ·不同规模奶牛场病原菌检出情况比较第69-70页
  第三节 本章小结第70-71页
 第三章 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌分子分型研究第71-85页
  第一节 浙江省主要奶牛养殖区乳房炎金黄色葡萄球菌PFGE分型第71-79页
   1 材料与方法第71-75页
   ·细菌来源第71-72页
   ·仪器与主要试剂第72页
   ·金黄色葡萄球菌鉴定第72页
   ·脉冲场凝胶电泳第72-74页
   ·聚类分析与分型第74-75页
   2 结果与分析第75-79页
   ·PFGE典型电泳图谱第75页
   ·浙江省主要奶牛养殖区奶牛乳房炎金黄色葡萄球PFGE分型聚类图第75-77页
   ·不同牛场的主要流行株第77页
   ·杭州近郊某规模奶牛场不同年份金黄色葡萄球菌流行的比较第77-79页
  第二节 我国十四个省区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要流行株PFGE分型研究第79-83页
   1 材料与方法第79-80页
   ·细菌来源第79-80页
   ·仪器与主要试剂第80页
   ·金黄色葡萄球菌菌株鉴定第80页
   ·脉冲场凝胶电泳第80页
   2 结果与分析第80-83页
   ·聚类分析第80-81页
   ·不同省区的主要流行株第81-83页
  第三节 本章小结第83-85页
 第四章 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药及其与PFGE分型的相关性第85-91页
  1 材料与方法第85-87页
   ·菌株来源第85页
   ·主要药品与试剂第85页
   ·菌株鉴定第85页
   ·药敏试验第85-87页
   ·金黄色葡萄球菌耐药与PFGE分型比较第87页
  2 结果与分析第87-90页
   ·浙江省四个不同地区以及新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药情况第87-89页
   ·浙江省四个不同地区以及新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要耐药谱第89-90页
   ·金黄色葡萄球菌PFGE分型与耐药的相关性第90页
  3 本章小结第90-91页
 第五章 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要毒力因子及其与PFGE分型的相关性第91-103页
  第一节 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌超抗原基因分布及其与PFGE分型的关系第91-99页
   1 材料与方法第91-94页
   ·菌株来源与鉴定第91页
   ·主要仪器第91页
   ·主要试剂第91-92页
   ·金黄色葡萄球菌模板制备第92页
   ·超抗原基因PCR扩增引物第92-94页
   ·超抗原基因PCR扩增条件第94页
   ·PCR模式与PCR产物测序第94页
   ·奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌毒力因子分布与PFGE分型的相关性第94页
   ·数据统计与分析第94页
   2 结果与分析第94-99页
   ·超抗原基因PCR扩增产物电泳图谱第94-96页
   ·超抗原基因PCR检测结果第96-97页
   ·奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌超抗原基因类型第97-98页
   ·超抗原基因类型与PFGE分型的相关性第98-99页
  第二节 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌pvl基因检测第99-101页
   1 材料与方法第99-101页
   ·菌株来源与鉴定第99页
   ·主要仪器第99页
   ·主要试剂第99页
   ·模板制备第99页
   ·PCR引物第99-100页
   ·PCR条件与测序第100-101页
   2 结果与分析第101页
   ·PVL基因PCR扩增产物电泳图谱第101页
   ·菌株检测结果第101页
  第三节 本章小结第101-103页
 第六章 金黄色葡萄球菌ClfA基因A功能区的克隆及原核表达第103-113页
  1 材料与方法第103-107页
   ·实验材料第103-104页
   ·方法第104-107页
  2 结果与分析第107-111页
   ·PCR扩增结果和序列分析第107-108页
   ·PCR产物测序分析第108-109页
   ·重组表达质粒的构建和鉴定第109-110页
   ·SDS-PAGE分析第110-111页
   ·Western Blotting分析第111页
  3 本章小结第111-113页
 第七章 综合讨论第113-125页
  1 奶牛主要疾病与临床型乳房炎第113-114页
  2 浙江省主要奶牛养殖区隐性乳房炎发病及病原第114-115页
  3 我国部分省区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的分子分型第115-118页
  4 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药情况第118-119页
  5 奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的主要毒力因子第119-122页
  6 金黄色葡萄球菌ClfA基因克隆及表达第122-125页
 第八章 提示、创新点及后续研究展望第125-127页
  1 提示第125-126页
  2 创新点第126页
  3 后续研究展望第126-127页
参考文献第127-149页
攻读博士期间发表的论文和出版物第149-151页
致谢第151页

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