| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 本文主要缩写词表 | 第15-16页 |
| 第1章 综述 | 第16-54页 |
| ·水稻蛋白质成分的分子育种研究 | 第16-30页 |
| ·稻米的营养品质及其遗传改良目标 | 第16-17页 |
| ·稻米蛋白质营养品质的遗传 | 第17-20页 |
| ·稻米蛋白质成分的育种改良 | 第20-28页 |
| ·稻米蛋白质品质分子育种存在的问题及发展方向 | 第28-30页 |
| ·水稻种子贮藏蛋白的分子生物学研究进展 | 第30-44页 |
| ·水稻种子贮藏蛋白及编码基因的组成结构 | 第31-37页 |
| ·水稻种子贮藏蛋白基因在种子发育过程中的表达及调控 | 第37-41页 |
| ·水稻种子贮藏蛋白的合成与运输 | 第41-44页 |
| ·籽粒苋种子贮藏蛋白研究进展 | 第44-48页 |
| ·概述 | 第44-45页 |
| ·籽粒苋种子贮藏蛋白的种类及营养特点 | 第45-47页 |
| ·籽粒苋种子贮藏蛋白的分子生物学利用研究 | 第47-48页 |
| ·乳铁蛋白及其遗传转化研究进展 | 第48-53页 |
| ·乳铁蛋白的特性与功能 | 第48-51页 |
| ·乳铁蛋白基因的遗传转化研究进展 | 第51-53页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第53-54页 |
| 第2章 水稻种子特异性表达启动子的分离与启动活性分析 | 第54-73页 |
| 引言 | 第54页 |
| 1 材料与方法 | 第54-62页 |
| ·材料 | 第54-56页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·试剂 | 第55页 |
| ·主要仪器 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-62页 |
| ·水稻叶片基因组DNA 的提取 | 第56页 |
| ·引物的设计、合成 | 第56-57页 |
| ·谷蛋白基因GluB-1 启动子的PCR 扩增及克隆 | 第57页 |
| ·谷蛋白基因Gt1 启动子的PCR 扩增及克隆 | 第57-58页 |
| ·油膜蛋白基因Ole18 启动子的PCR 扩增及克隆 | 第58页 |
| ·序列测定及其分析 | 第58页 |
| ·不同启动子与GUS 嵌合基因植物表达载体的构建 | 第58-61页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第61页 |
| ·转基因水稻的PCR 分子检测 | 第61-62页 |
| ·转基因水稻的GUS 活性分析 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-71页 |
| ·水稻谷蛋白基因GluB-1、Gt1 和油膜蛋白基因Ole18 启动子的克隆及序列分析 | 第62-66页 |
| ·三个基因启动子的克隆 | 第62-63页 |
| ·启动子的序列分析 | 第63-66页 |
| ·植物表达载体pCAM-pGluB-Gus、pCAM-pGt1-Gus、pCAM-pOle18-Gus 的构建及鉴定 | 第66-68页 |
| ·转基因水稻的获得及鉴定 | 第68-69页 |
| ·转基因水稻的GUS 活性分析 | 第69-71页 |
| 3 讨论 | 第71-73页 |
| 第3章 籽粒苋Am A1 基因在水稻种子中的表达 | 第73-105页 |
| 引言 | 第73页 |
| 1 材料与方法 | 第73-84页 |
| ·材料 | 第73-74页 |
| ·植物材料 | 第73-74页 |
| ·菌株与质粒 | 第74页 |
| ·生化试剂与仪器 | 第74页 |
| ·培养基 | 第74页 |
| ·实验方法 | 第74-84页 |
| ·AmA1 蛋白基因的克隆及原核表达 | 第74-76页 |
| ·Am A1 蛋白基因双T-DNA 植物表达载体构建 | 第76-79页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第79-80页 |
| ·适于PCR 快速检测的微量DNA 提取法（简化法）的建立 | 第80-81页 |
| ·转基因水稻的PCR 检测 | 第81页 |
| ·转基因水稻的Southern blot 检测 | 第81-83页 |
| ·转基因水稻的Westhern blot 检测 | 第83页 |
| ·转基因稻米的氨基酸含量分析 | 第83-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-99页 |
| ·AmA1 蛋白基因完整ORF 的克隆和序列分析 | 第84-85页 |
| ·AmA1 基因的原核表达、蛋白纯化 | 第85-86页 |
| ·AmA1 基因双T-DNA 植物表达载体的构建及鉴定 | 第86-88页 |
| ·转基因水稻PCR 快速检测的微量DNA 提取方法 | 第88-90页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第90-91页 |
| ·转AmA1 基因水稻的分子鉴定 | 第91-94页 |
| ·转AmA1 基因水稻的表达检测 | 第94-95页 |
| ·转AmA1 基因水稻种子的氨基酸含量 | 第95-99页 |
| 3 讨论 | 第99-105页 |
| ·AmA1 基因的克隆及原核表达 | 第99-100页 |
| ·PCR 快速检测时基因组DNA 的微量提取 | 第100-101页 |
| ·基于双T-DNA 共转化策略的无选择标记转化系统 | 第101-102页 |
| ·AmA1 基因表达对稻米必需氨基酸组成的影响 | 第102-105页 |
| 第4章 hLF、AmA1 基因序列优化设计及转化水稻的初步研究 | 第105-126页 |
| 引言 | 第105页 |
| 1 材料与方法 | 第105-113页 |
| ·材料 | 第105-106页 |
| ·植物材料 | 第105-106页 |
| ·菌株与质粒 | 第106页 |
| ·生化试剂与仪器 | 第106页 |
| ·培养基 | 第106页 |
| ·实验方法 | 第106-113页 |
| ·hLF 基因、AmA1 基因序列的优化设计及合成 | 第106-107页 |
| ·omAmA1、hLF、omhLF 单基因及双基因植物表达载体构建 | 第107-111页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第111页 |
| ·转基因水稻的PCR 检测 | 第111-113页 |
| 2 结果与分析 | 第113-122页 |
| ·hLF、AmA1 基因的序列优化设计及合成 | 第113-117页 |
| ·hLF、AmA1 基因优化设计后的完整序列 | 第113页 |
| ·优化前后的hLF、AmA1 基因的密码子选择偏向比较 | 第113-116页 |
| ·hLF、AmA1 基因优化前后的编码区序列比较 | 第116-117页 |
| ·植物表达载体的构建与鉴定 | 第117-120页 |
| ·转基因水稻的分子鉴定 | 第120-122页 |
| 3 讨论 | 第122-126页 |
| ·hLF、AmA1 基因编码区序列的密码子优化 | 第122-123页 |
| ·hLF、AmA1 基因非编码区序列的修饰 | 第123-124页 |
| ·复合性状转基因优质水稻的创制 | 第124-126页 |
| 结论 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-144页 |
| 附录一 优化后的omhLF 基因与原始hLF 基因的核苷酸序列比较 | 第144-146页 |
| 附录二 优化的om AmA1 基因与原始AmA1 基因的核苷酸序列比较 | 第146-147页 |
| 附录三 本研究所采用的培养基配方 | 第147-151页 |
| 附录四 本研究所使用的植物激素及抗生素的配制方法 | 第151-152页 |
| 致谢 | 第152页 |
