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豌豆中NYE1基因的克隆及NYE1的功能分析

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
文献综述第8-21页
 1.叶绿素的降解第8-12页
   ·叶绿素的降解代谢途径第8-9页
   ·几种主要的参与叶绿素降解的酶第9-11页
   ·叶绿素降解的意义第11-12页
 2.滞绿突变第12-13页
   ·滞绿的定义第12页
   ·滞绿突变体的类型第12-13页
   ·滞绿突变的应用及意义第13页
 3.叶绿素降解的相关调控蛋白第13-14页
   ·衰老诱导的叶绿体滞绿蛋白同源基因第13-14页
   ·叶绿素和捕光色素蛋白复合体第14页
 4.cDNA末端快速扩增技术(RACE)第14-17页
 5.利用原核表达系统获得可溶性的外源蛋白第17-21页
   ·原核表达系统的特点第17-18页
   ·提高外源蛋白可溶性表达的常用方法第18-21页
材料与方法第21-35页
 1.实验材料第21页
 2.试剂和培养基第21-22页
 3.实验方法第22-35页
第一部分 豌豆中叶绿素降解调控关键基因PsNYE1的克隆及功能分析第35-47页
 实验结果第36-45页
   ·豌豆PsNYE1基因全长cDNA序列的获得第36-39页
   ·PsNYE1基因序列的生物信息学分析第39-42页
   ·PsNYE1基因的克隆与植物表达载体的构建第42-43页
   ·PsNYE1基因的功能互补第43-45页
 讨论第45-47页
第二部分 NYE1蛋白原核表达系统的建立第47-53页
 实验结果第48-52页
   ·原核表达载体pET-30a(+):NYE1-220的构建及在BL21(DE3)中的诱导表达第48-49页
   ·AtNYE1蛋白的二级结构预测第49页
   ·原核表达载体pGEX-4T-1:NYE1-160的构建及在BL21(DE3)中的透导表达第49-50页
   ·原核表达载体pMAL-c2X:NYE1-220的构建及在Rosetta Plus中的诱导表达第50-52页
 讨论第52-53页
第三部分 NYE1共表达基因CRN1的初步研究第53-60页
 实验结果第54-59页
   ·CRN1和NYE1基因表达谱的比较第54页
   ·CRN1基因T-DNA插入突变体的鉴定和表型观察第54-56页
   ·crn1-1是C类非功能型滞绿突变体第56页
   ·衰老过程中crn1-1中光合作用相关蛋白的降解第56-57页
   ·CRN1在多个物种中的序列比较第57-59页
 讨论第59-60页
参考文献第60-64页
致谢第64-65页

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