中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
文献综述 | 第8-21页 |
1.叶绿素的降解 | 第8-12页 |
·叶绿素的降解代谢途径 | 第8-9页 |
·几种主要的参与叶绿素降解的酶 | 第9-11页 |
·叶绿素降解的意义 | 第11-12页 |
2.滞绿突变 | 第12-13页 |
·滞绿的定义 | 第12页 |
·滞绿突变体的类型 | 第12-13页 |
·滞绿突变的应用及意义 | 第13页 |
3.叶绿素降解的相关调控蛋白 | 第13-14页 |
·衰老诱导的叶绿体滞绿蛋白同源基因 | 第13-14页 |
·叶绿素和捕光色素蛋白复合体 | 第14页 |
4.cDNA末端快速扩增技术(RACE) | 第14-17页 |
5.利用原核表达系统获得可溶性的外源蛋白 | 第17-21页 |
·原核表达系统的特点 | 第17-18页 |
·提高外源蛋白可溶性表达的常用方法 | 第18-21页 |
材料与方法 | 第21-35页 |
1.实验材料 | 第21页 |
2.试剂和培养基 | 第21-22页 |
3.实验方法 | 第22-35页 |
第一部分 豌豆中叶绿素降解调控关键基因PsNYE1的克隆及功能分析 | 第35-47页 |
实验结果 | 第36-45页 |
·豌豆PsNYE1基因全长cDNA序列的获得 | 第36-39页 |
·PsNYE1基因序列的生物信息学分析 | 第39-42页 |
·PsNYE1基因的克隆与植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
·PsNYE1基因的功能互补 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-47页 |
第二部分 NYE1蛋白原核表达系统的建立 | 第47-53页 |
实验结果 | 第48-52页 |
·原核表达载体pET-30a(+):NYE1-220的构建及在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第48-49页 |
·AtNYE1蛋白的二级结构预测 | 第49页 |
·原核表达载体pGEX-4T-1:NYE1-160的构建及在BL21(DE3)中的透导表达 | 第49-50页 |
·原核表达载体pMAL-c2X:NYE1-220的构建及在Rosetta Plus中的诱导表达 | 第50-52页 |
讨论 | 第52-53页 |
第三部分 NYE1共表达基因CRN1的初步研究 | 第53-60页 |
实验结果 | 第54-59页 |
·CRN1和NYE1基因表达谱的比较 | 第54页 |
·CRN1基因T-DNA插入突变体的鉴定和表型观察 | 第54-56页 |
·crn1-1是C类非功能型滞绿突变体 | 第56页 |
·衰老过程中crn1-1中光合作用相关蛋白的降解 | 第56-57页 |
·CRN1在多个物种中的序列比较 | 第57-59页 |
讨论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-65页 |