| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 文献综述 | 第10-20页 |
| 第一节 前言 | 第10页 |
| 第二节 玉米瘤黑粉病的概述 | 第10-13页 |
| 1 玉米瘤黑粉病的发病环境 | 第11页 |
| 2 玉米瘤黑粉病的发病症状 | 第11-12页 |
| 3 玉米瘤黑粉病的危害 | 第12-13页 |
| 4 玉米瘤黑粉病的防治措施 | 第13页 |
| 第三节 玉蜀黍黑粉菌的概述 | 第13-15页 |
| 1 玉蜀黍黑粉菌的特征特性 | 第13-14页 |
| 2 玉蜀黍黑粉菌的冬孢子的生物学特性 | 第14-15页 |
| 第四节 玉蜀黍黑粉菌的研究进展 | 第15-20页 |
| 1 玉蜀黍黑粉菌的生长周期 | 第15-16页 |
| 2 玉蜀黍黑粉菌的研究进展 | 第16-20页 |
| ·关于玉蜀黍黑粉菌中基因 biz1 和 mzr1 的研究 | 第18-20页 |
| 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 玉蜀黍黑粉菌 Biz1 调控基因过表达实验 | 第21-47页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-37页 |
| ·查找目的基因序列 | 第23-24页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24-25页 |
| ·从 U.maydis 中提取 DNA | 第25-26页 |
| ·PCR 扩增目的基因 | 第26页 |
| ·PCR 产物回收 | 第26-27页 |
| ·制备 PHD3 表达载体 | 第27-29页 |
| ·电泳产物回收 | 第29页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第29-30页 |
| ·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第30页 |
| ·热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第30-31页 |
| ·质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·阳性质粒的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·阳性质粒线性化 | 第32页 |
| ·SG200△biz1 原生质体的制备 | 第32-33页 |
| ·SG200△biz1 原生质体转化 | 第33-34页 |
| ·菌株保存 | 第34页 |
| ·从 U.maydis 中提取 RNA | 第34-35页 |
| ·RNA 溶液中基因组 DNA 降解 | 第35-36页 |
| ·RNA 反转录 cDNA | 第36页 |
| ·玉米植株侵染 | 第36-37页 |
| ·实验结果与分析 | 第37-47页 |
| ·目的基因序列的克隆 | 第37-39页 |
| ·阳性质粒酶切验证 | 第39-42页 |
| ·原生质体转化后提取 DNA 验证 | 第42-44页 |
| ·原生质体转化后提取 RNA 并进行反转录验证 | 第44-45页 |
| ·玉米植株侵染实验 | 第45-47页 |
| 第三章 玉蜀黍黑粉菌 Biz1 调控基因缺失实验 | 第47-55页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第47页 |
| ·仪器设备 | 第47页 |
| ·主要试剂和培养基的配制 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·查找目的基因的左臂和右臂的基因序列 | 第47页 |
| ·引物的设计与合成 | 第47-49页 |
| ·以 um521 为模板，PCR 扩增目的基因的左臂和右臂 | 第49页 |
| ·PCR 产物纯化回收 | 第49页 |
| ·从质粒 PBS-hhn 上酶切得到筛选标记基因 hyg | 第49页 |
| ·电泳产物回收 | 第49页 |
| ·目的基因的左臂和右臂与筛选标记基因连接 | 第49-50页 |
| ·SG200 原生质体的制备 | 第50页 |
| ·SG200 原生质体转化 | 第50页 |
| ·转化后的菌株 DNA 进行 PCR 验证 | 第50页 |
| ·菌株保存 | 第50页 |
| ·实验结果与分析 | 第50-55页 |
| ·目的基因左臂和右臂的克隆 | 第50-51页 |
| ·酶切质粒获得筛选标记基因 hyg | 第51-52页 |
| ·目的基因的左臂和右臂与 hyg 基因连接产物 | 第52-53页 |
| ·同源重组后基因敲除验证 | 第53页 |
| ·玉米植株侵染实验 | 第53-55页 |
| 第四章 SG200 菌株中 bip5 基因的过表达与缺失实验 | 第55-60页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第55页 |
| ·仪器设备 | 第55页 |
| ·主要试剂和培养基的配置 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-57页 |
| ·制备 PHD3-mig 表达载体 | 第55-56页 |
| ·电泳产物回收 | 第56页 |
| ·目的基因 bip5 与载体连接 | 第56页 |
| ·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第56页 |
| ·热激法转化大肠杆菌感受态细胞 | 第56页 |
| ·质粒的提取 | 第56页 |
| ·阳性质粒的酶切鉴定 | 第56页 |
| ·阳性质粒的线性化 | 第56页 |
| ·SG200 原生质体的制备 | 第56页 |
| ·SG200 原生质体转化 | 第56-57页 |
| ·菌株保存 | 第57页 |
| ·玉米植株侵染 | 第57页 |
| ·实验结果与分析 | 第57-60页 |
| ·阳性质粒酶切验证 | 第57-58页 |
| ·原生质体转化后提取 DNA 验证 | 第58页 |
| ·玉米植株侵染实验 | 第58-60页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 作者简介 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
