摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-24页 |
·渗透调节周质葡聚糖研究的背景及现状 | 第12-18页 |
·渗透调节周质葡聚糖的结构 | 第12-13页 |
·渗透调节周质葡聚糖的生物合成 | 第13-14页 |
·渗透调节周质葡聚糖取代基 | 第14-15页 |
·渗透调节周质葡聚糖的生物功能 | 第15-18页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌致病性 | 第18页 |
·福氏志贺菌 | 第18页 |
·沙门氏菌 | 第18页 |
·λ-Red 重组系统 | 第18-22页 |
·Red 重组系统的组成 | 第19-20页 |
·Red 重组的机制 | 第20-21页 |
·Red 重组系统在微生物基因敲除中的应用 | 第21-22页 |
·试验目的与研究内容 | 第22-24页 |
第二章 福氏志贺菌2457T 渗透调节周质葡聚糖合成基因缺陷型突变体构建 | 第24-41页 |
·试验材料与设备 | 第25-26页 |
·试验菌株 | 第25-26页 |
·试验主要试剂与仪器设备 | 第26页 |
·试验内容与方法 | 第26-33页 |
·引物设计 | 第26-29页 |
·质粒制备 | 第29页 |
·pKD3 质粒扩增 | 第29页 |
·DNA 提取与纯化 | 第29页 |
·Dpn1 酶消化 | 第29-30页 |
·DNA 片段纯化 | 第30页 |
·制备感受细胞 | 第30页 |
·电转化 | 第30-31页 |
·突变体筛选 | 第31页 |
·毒力检测 | 第31页 |
·PCR 验证 | 第31-32页 |
·福氏志贺菌突变体目的基因上下游片段测序分析 | 第32页 |
·互补菌株的制备 | 第32-33页 |
·结果与分析 | 第33-40页 |
·凝胶图片分析 | 第33-37页 |
·opgGH 突变体互补菌株pLL3 的检验结果 | 第37-38页 |
·突变体测序结果分析 | 第38页 |
·突变体毒力质粒检测 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40页 |
·本章小结 | 第40-41页 |
第三章 福氏志贺菌2457T 及其突变体渗透调节周质葡聚糖的提取及分析 | 第41-61页 |
·试验材料与设备 | 第41-42页 |
·试验菌株 | 第41-42页 |
·试验主要试剂 | 第42页 |
·试验主要仪器 | 第42页 |
·试验内容与方法 | 第42-44页 |
·菌株培养 | 第42页 |
·渗透压测量 | 第42页 |
·糖测定方法 | 第42-43页 |
·渗透调节周质葡聚糖的提取 | 第43页 |
·渗透调节周质葡聚糖的纯化 | 第43页 |
·蛋白质测定 | 第43页 |
·菌数测定 | 第43页 |
·琥珀酸测定 | 第43-44页 |
·糖基组成及糖苷键连接测定 | 第44页 |
·渗透调节周质葡聚糖极性分析 | 第44页 |
·NaOH 水解 | 第44页 |
·数据处理 | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-59页 |
·分离胶选择 | 第44-45页 |
·野生型福氏志贺菌2457T 渗透调节周质葡聚糖的分离 | 第45-46页 |
·大肠杆菌及沙门氏菌标准株渗透调节周质葡聚糖的分离 | 第46页 |
·福氏志贺菌及沙门氏菌、大肠杆菌标准株渗透调节周质葡聚糖糖基组成分析 | 第46-47页 |
·福氏志贺菌渗透调节周质葡聚糖糖基内化学结构分析 | 第47-48页 |
·福氏志贺菌及其突变体渗透调节周质葡聚糖的分离纯化 | 第48页 |
·福氏志贺菌渗透调节周质葡聚糖糖基连接基团分析 | 第48-50页 |
·渗透压对福氏志贺菌及其突变体渗透调节周质葡聚糖产量的影响 | 第50-51页 |
·渗透压对福氏志贺菌野生型及其突变体单位蛋白量及菌数的影响 | 第51-53页 |
·福氏志贺菌及其突变体渗透调节周质葡聚糖的极性分析 | 第53-58页 |
·福氏志贺菌opgGH 突变体的产渗透调节周质葡聚糖功能互补试验 | 第58-59页 |
·讨论 | 第59-60页 |
·本章小结 | 第60-61页 |
第四章 福氏志贺菌和沙门氏菌及突变体生长特性研究 | 第61-93页 |
·试验材料与设备 | 第61-62页 |
·试验菌株 | 第61页 |
·试验主要试剂 | 第61-62页 |
·试验主要仪器 | 第62页 |
·试验内容与方法 | 第62-63页 |
·菌株培养 | 第62页 |
·洗菜水制备 | 第62页 |
·生长曲线测定 | 第62页 |
·生长膜测定 | 第62-63页 |
·结果与分析 | 第63-91页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌生长试验培养基选择 | 第63页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及突变体在标准培养基中的生长情况 | 第63-64页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及其突变体在低渗低营养条件下的生长情况 | 第64页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及其突变体在低营养条件下的生长情况 | 第64-65页 |
·低营养条件下渗透压对福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及其突变体生长的影响 | 第65-68页 |
·渗透压对福氏志贺菌野生型、opgGH 突变体及其互补菌株pLL3 生长的影响 | 第68-69页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型与opgGH 突变体竞争性生长的研究 | 第69-70页 |
·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型与突变体在洗菜水中生长的研究 | 第70-87页 |
·福氏志贺菌野生型与突变体生物膜形成研究 | 第87-91页 |
·讨论 | 第91-92页 |
·本章小结 | 第92-93页 |
第五章 福氏志贺菌野生型及突变体体外毒力及抗性试验 | 第93-105页 |
·试验材料与设备 | 第93-94页 |
·试验菌株 | 第93-94页 |
·试验主要试剂 | 第94页 |
·试验主要仪器 | 第94页 |
·试验内容与方法 | 第94-95页 |
·菌株培养 | 第94页 |
·体外毒力试验 | 第94页 |
·热击试验 | 第94页 |
·酸碱度影响试验 | 第94页 |
·十二烷基硫酸钠(SDS)抑制试验 | 第94-95页 |
·最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)试验 | 第95页 |
·结果与分析 | 第95-103页 |
·细菌体外毒力试验 | 第95-97页 |
·热击对福氏志贺菌野生型生长的影响 | 第97页 |
·热击对福氏志贺菌突变体生长的影响 | 第97-99页 |
·pH 值对福氏志贺菌野生型生长的影响 | 第99页 |
·pH 值对福氏志贺菌突变体生长的影响 | 第99-100页 |
·抗生素对福氏志贺菌野生型及突变体的抑菌效果 | 第100-103页 |
·十二烷基硫酸钠(SDS)对福氏志贺菌野生型及opgGH 突变体生长的影响 | 第103页 |
·讨论 | 第103-104页 |
·本章小结 | 第104-105页 |
第六章 结论与创新点 | 第105-107页 |
·结论 | 第105-106页 |
·创新点 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-115页 |
缩略词 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
个人简介 | 第117页 |