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福氏志贺菌和沙门氏菌渗透调节周质葡聚糖基因功能的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 前言第12-24页
   ·渗透调节周质葡聚糖研究的背景及现状第12-18页
     ·渗透调节周质葡聚糖的结构第12-13页
     ·渗透调节周质葡聚糖的生物合成第13-14页
     ·渗透调节周质葡聚糖取代基第14-15页
     ·渗透调节周质葡聚糖的生物功能第15-18页
   ·福氏志贺菌和沙门氏菌致病性第18页
     ·福氏志贺菌第18页
     ·沙门氏菌第18页
   ·λ-Red 重组系统第18-22页
     ·Red 重组系统的组成第19-20页
     ·Red 重组的机制第20-21页
     ·Red 重组系统在微生物基因敲除中的应用第21-22页
   ·试验目的与研究内容第22-24页
第二章 福氏志贺菌2457T 渗透调节周质葡聚糖合成基因缺陷型突变体构建第24-41页
   ·试验材料与设备第25-26页
     ·试验菌株第25-26页
     ·试验主要试剂与仪器设备第26页
   ·试验内容与方法第26-33页
     ·引物设计第26-29页
     ·质粒制备第29页
     ·pKD3 质粒扩增第29页
     ·DNA 提取与纯化第29页
     ·Dpn1 酶消化第29-30页
     ·DNA 片段纯化第30页
     ·制备感受细胞第30页
     ·电转化第30-31页
     ·突变体筛选第31页
     ·毒力检测第31页
     ·PCR 验证第31-32页
     ·福氏志贺菌突变体目的基因上下游片段测序分析第32页
     ·互补菌株的制备第32-33页
   ·结果与分析第33-40页
     ·凝胶图片分析第33-37页
     ·opgGH 突变体互补菌株pLL3 的检验结果第37-38页
     ·突变体测序结果分析第38页
     ·突变体毒力质粒检测第38-40页
   ·讨论第40页
   ·本章小结第40-41页
第三章 福氏志贺菌2457T 及其突变体渗透调节周质葡聚糖的提取及分析第41-61页
   ·试验材料与设备第41-42页
     ·试验菌株第41-42页
     ·试验主要试剂第42页
     ·试验主要仪器第42页
   ·试验内容与方法第42-44页
     ·菌株培养第42页
     ·渗透压测量第42页
     ·糖测定方法第42-43页
     ·渗透调节周质葡聚糖的提取第43页
     ·渗透调节周质葡聚糖的纯化第43页
     ·蛋白质测定第43页
     ·菌数测定第43页
     ·琥珀酸测定第43-44页
     ·糖基组成及糖苷键连接测定第44页
     ·渗透调节周质葡聚糖极性分析第44页
     ·NaOH 水解第44页
     ·数据处理第44页
   ·结果与分析第44-59页
     ·分离胶选择第44-45页
     ·野生型福氏志贺菌2457T 渗透调节周质葡聚糖的分离第45-46页
     ·大肠杆菌及沙门氏菌标准株渗透调节周质葡聚糖的分离第46页
     ·福氏志贺菌及沙门氏菌、大肠杆菌标准株渗透调节周质葡聚糖糖基组成分析第46-47页
     ·福氏志贺菌渗透调节周质葡聚糖糖基内化学结构分析第47-48页
     ·福氏志贺菌及其突变体渗透调节周质葡聚糖的分离纯化第48页
     ·福氏志贺菌渗透调节周质葡聚糖糖基连接基团分析第48-50页
     ·渗透压对福氏志贺菌及其突变体渗透调节周质葡聚糖产量的影响第50-51页
     ·渗透压对福氏志贺菌野生型及其突变体单位蛋白量及菌数的影响第51-53页
     ·福氏志贺菌及其突变体渗透调节周质葡聚糖的极性分析第53-58页
     ·福氏志贺菌opgGH 突变体的产渗透调节周质葡聚糖功能互补试验第58-59页
   ·讨论第59-60页
   ·本章小结第60-61页
第四章 福氏志贺菌和沙门氏菌及突变体生长特性研究第61-93页
   ·试验材料与设备第61-62页
     ·试验菌株第61页
     ·试验主要试剂第61-62页
     ·试验主要仪器第62页
   ·试验内容与方法第62-63页
     ·菌株培养第62页
     ·洗菜水制备第62页
     ·生长曲线测定第62页
     ·生长膜测定第62-63页
   ·结果与分析第63-91页
     ·福氏志贺菌和沙门氏菌生长试验培养基选择第63页
     ·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及突变体在标准培养基中的生长情况第63-64页
     ·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及其突变体在低渗低营养条件下的生长情况第64页
     ·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及其突变体在低营养条件下的生长情况第64-65页
     ·低营养条件下渗透压对福氏志贺菌和沙门氏菌野生型及其突变体生长的影响第65-68页
     ·渗透压对福氏志贺菌野生型、opgGH 突变体及其互补菌株pLL3 生长的影响第68-69页
     ·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型与opgGH 突变体竞争性生长的研究第69-70页
     ·福氏志贺菌和沙门氏菌野生型与突变体在洗菜水中生长的研究第70-87页
     ·福氏志贺菌野生型与突变体生物膜形成研究第87-91页
   ·讨论第91-92页
   ·本章小结第92-93页
第五章 福氏志贺菌野生型及突变体体外毒力及抗性试验第93-105页
   ·试验材料与设备第93-94页
     ·试验菌株第93-94页
     ·试验主要试剂第94页
     ·试验主要仪器第94页
   ·试验内容与方法第94-95页
     ·菌株培养第94页
     ·体外毒力试验第94页
     ·热击试验第94页
     ·酸碱度影响试验第94页
     ·十二烷基硫酸钠(SDS)抑制试验第94-95页
     ·最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)试验第95页
   ·结果与分析第95-103页
     ·细菌体外毒力试验第95-97页
     ·热击对福氏志贺菌野生型生长的影响第97页
     ·热击对福氏志贺菌突变体生长的影响第97-99页
     ·pH 值对福氏志贺菌野生型生长的影响第99页
     ·pH 值对福氏志贺菌突变体生长的影响第99-100页
     ·抗生素对福氏志贺菌野生型及突变体的抑菌效果第100-103页
     ·十二烷基硫酸钠(SDS)对福氏志贺菌野生型及opgGH 突变体生长的影响第103页
   ·讨论第103-104页
   ·本章小结第104-105页
第六章 结论与创新点第105-107页
   ·结论第105-106页
   ·创新点第106-107页
参考文献第107-115页
缩略词第115-116页
致谢第116-117页
个人简介第117页

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