| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-12页 |
| 1 引言 | 第12-29页 |
| ·猪传染性胃肠炎病原学特性及研究进展 | 第12-19页 |
| ·TGEV 的形态学特性 | 第12-13页 |
| ·TGEV 的培养特性 | 第13页 |
| ·TGEV 的理化学特性 | 第13页 |
| ·TGEV 的抗原性、变异性和免疫性 | 第13-14页 |
| ·TGEV 分子生物学特性 | 第14-19页 |
| ·猪传染性胃肠炎流行病学 | 第19页 |
| ·猪传染性胃肠炎诊断研究进展 | 第19-24页 |
| ·传统的诊断方法 | 第19-21页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第21-24页 |
| ·猪传染性胃肠炎疫苗研究进展 | 第24-28页 |
| ·基因工程疫苗研究进展 | 第24-28页 |
| ·本课题研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 2 猪传染性胃肠炎病毒HB06 株M 蛋白基因的克隆及序列分析 | 第29-45页 |
| ·材料 | 第29-34页 |
| ·毒株与细胞 | 第29页 |
| ·载体及菌株 | 第29页 |
| ·细胞培养所需主要试剂 | 第29页 |
| ·PCR 及RT-PCR 反应所需试剂 | 第29-30页 |
| ·目的基因的克隆所需试剂 | 第30页 |
| ·质粒DNA 提取所需试剂 | 第30页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第30-33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-38页 |
| ·PK-15 细胞复苏与培养 | 第34页 |
| ·病毒的增殖 | 第34页 |
| ·病毒总RNA 的提取 | 第34页 |
| ·M 基因的克隆 | 第34-38页 |
| ·TGEV HB06 株M 蛋白基因遗传信息分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-42页 |
| ·TGEV M 基因的RT-PCR 扩增结果 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pMD-M 的鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·序列测定与分析结果 | 第40页 |
| ·TGEV HB06 株M 蛋白基因遗传信息分析结果 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-45页 |
| ·关于TGEV HB06 株M 基因的扩增与克隆 | 第42-43页 |
| ·关于TGEV HB06 株M 基因的序列分析 | 第43-45页 |
| 3 猪传染性胃肠炎病毒HB06 株M 蛋白基因的表达及间接ELISA 方法的建立 | 第45-76页 |
| ·材料 | 第45-50页 |
| ·载体及菌株 | 第45页 |
| ·血清、抗体及酶类 | 第45页 |
| ·诱导表达所需主要试剂 | 第45页 |
| ·包涵体纯化所需主要试剂 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE 所需主要试剂 | 第46页 |
| ·Western-blotting 所需主要试剂 | 第46页 |
| ·ELISA 所需主要试剂 | 第46页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第46-50页 |
| ·方法 | 第50-58页 |
| ·M 基因的原核重组表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·基因工程重组表达菌的诱导表达 | 第52页 |
| ·重组M 蛋白诱导表达的最佳条件的确定 | 第52-53页 |
| ·重组M 蛋白的纯化回收 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白的Western-blotting 鉴定 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA 方法的建立 | 第56-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-69页 |
| ·重组表达质粒pGEX-6P-M 的鉴定结果 | 第58-59页 |
| ·构建的重组表达质粒的序列测定 | 第59-60页 |
| ·基因工程重组菌的诱导表达和SDS-PAGE 电泳分析 | 第60-61页 |
| ·重组M 蛋白诱导表达的最佳条件的确定 | 第61-63页 |
| ·重组蛋白的纯化回收 | 第63-64页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第64页 |
| ·重组蛋白的Western-blotting 鉴定 | 第64页 |
| ·间接ELISA 方法的建立 | 第64-69页 |
| ·讨论 | 第69-76页 |
| 4 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 附录 | 第87-90页 |
| 附录A TGEV HB06 株M 基因测序结果 | 第87-88页 |
| 附录B TGEV HB06 株M 基因推导的氨基酸序列 | 第88-89页 |
| 附录C TGEV HB06 株M 基因密码子使用偏爱性 | 第89-90页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
| 作者简历 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
