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油菜保卫细胞功能性SnRK2基因鉴定及BnSnRK2.6-2C氧化还原位点鉴定

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 绪论第12-23页
    1.1 油菜在生物学研究中的应用第12-13页
    1.2 气孔和保卫细胞第13-17页
        1.2.1 气孔及保卫细胞的结构和生物学功能第13页
        1.2.2 植物激素对保卫细胞的调控第13-15页
        1.2.3 气孔运动中分子开关的调控机制第15-17页
    1.3 SnRK2蛋白激酶家族研究进展第17-19页
        1.3.1 SnRK蛋白激酶及SnRK2蛋白激酶的结构与分类第17-18页
        1.3.2 SnRK2蛋白激酶在植物生长发育和逆境胁迫中的作用第18-19页
    1.4 细胞中的蛋白质半胱氨酸氧化还原修饰第19-21页
        1.4.1 细胞中蛋白质的普遍巯基氧化修饰第19-20页
        1.4.2 基于生物氧化还原分子的蛋白质巯基氧化修饰第20页
        1.4.3 蛋白质巯基氧化修饰的分析技术第20-21页
    1.5 本研究的目的和意义第21-23页
2 油菜SnRK2基因的全基因组鉴定及表达特性分析第23-48页
    2.1 材料与方法第23-30页
        2.1.1 植物材料的培养收集和干旱处理第23页
        2.1.2 油菜保卫细胞和叶肉细胞原生质体的分离和收集第23-25页
        2.1.3 保卫细胞原生质体的ABA处理第25页
        2.1.4 油菜基因组中SnRK2基因的鉴定和系统进化分析第25-26页
        2.1.5 油菜SnRK2基因的染色体结构组成和顺式作用元件分析第26页
        2.1.6 油菜总RNA的提取和cDNA第一链的合成第26-27页
        2.1.7 油菜保卫细胞中表达的SnRK2基因鉴定及克隆第27-29页
        2.1.8 油菜SnRK2基因的实时荧光定量PCR分析第29-30页
        2.1.9 油菜SnRK2基因表达模式的生物信息学分析第30页
    2.2 结果与讨论第30-47页
        2.2.1 油菜SnRK2基因的鉴定和系统进化分析第30-34页
        2.2.2 油菜SnRK2基因的基因结构和顺式作用原件分析第34-36页
        2.2.3 油菜保卫细胞SnRK2基因在不同组织器官中的表达模式第36-40页
        2.2.4 油菜SnRK2基因响应干旱胁迫处理的表达分析第40-43页
        2.2.5 油菜保卫细胞中SnRK2基因响应ABA处理的表达分析第43-45页
        2.2.6 油菜SnRK2同系基因的表达偏差分析第45-47页
    2.3 本章小结第47-48页
3 BnSnRK2.6-2C蛋白激酶的氧化还原位点鉴定第48-71页
    3.1 材料与方法第48-54页
        3.1.1 序列比对和蛋白质结构预测第48页
        3.1.2 BnSnRK2.6-2C原核表达体系的构建第48-49页
        3.1.3 重组BnSnRK2.6-2C的诱导表达和纯化第49-50页
        3.1.4 氧化还原处理和BnSnRK2.6-2C的体外激酶反应第50-51页
        3.1.5 BnSnRK2.6-2C半胱氨酸氧化修饰水平检测第51-52页
        3.1.6 半胱氨酸修饰和磷酸化修饰的高效液相色谱串联质谱联用检测第52-54页
    3.2 结果与讨论第54-69页
        3.2.1 BnSnRK2.6-2C的结构预测第54-57页
        3.2.2 BnSnRK2.6-2C体外自磷酸化活性的氧化还原调控第57-60页
        3.2.3 氧化还原处理后BnSnRK2.6-2C半胱氨酸残基氧化水平的变化第60-61页
        3.2.4 BnSnRK2.6-2C氧化还原调控位点的鉴定第61-68页
        3.2.5 一溴二胺标记的酪氨酸残基的质谱鉴定第68-69页
    3.3 本章小结第69-71页
结论第71-72页
参考文献第72-85页
攻读学位期间发表的学术论文第85-86页
致谢第86-88页
东北林业大学博士学位论文修改情况确认表第88-90页

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