| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| 1.1 乳成分、合成途径及调控机制 | 第13-22页 |
| 1.1.1 牛乳的成分组成 | 第13-15页 |
| 1.1.2 乳蛋白和乳脂肪的合成与分泌 | 第15-21页 |
| 1.1.3 乳蛋白合成的调节 | 第21-22页 |
| 1.1.4 乳脂肪合成的调节 | 第22页 |
| 1.2 氨基酸对乳合成的调节作用 | 第22-24页 |
| 1.3 PURB研究进展 | 第24-27页 |
| 1.3.1 Pur蛋白家族简介 | 第24-26页 |
| 1.3.2 PURB的结构与功能 | 第26-27页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 主要实验试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第30页 |
| 2.1.3 实验细胞 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-45页 |
| 2.2.1 奶牛乳腺上皮细胞的原代培养、纯化与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.2 蛋氨酸和亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞的乳合成的影响 | 第32-37页 |
| 2.2.3 蛋氨酸和亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞PURB表达和定位的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.4 PURB调节乳蛋白和乳脂肪合成的功能研究 | 第38-41页 |
| 2.2.5 PURB介导氨基酸调节乳合成的分子机理 | 第41-44页 |
| 2.2.6 统计分析方法 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-61页 |
| 3.1 原代奶牛乳腺上皮细胞的培养、纯化与鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2 蛋氨酸和亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞的乳合成的影响 | 第46-49页 |
| 3.2.1 蛋氨酸和亮氨酸处理对细胞乳蛋白和乳脂肪合成的影响 | 第46-48页 |
| 3.2.2 蛋氨酸和亮氨酸处理对细胞乳合成相关信号途径的影响 | 第48-49页 |
| 3.3 蛋氨酸和亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞PURB表达和定位的影响 | 第49-51页 |
| 3.3.1 蛋氨酸和亮氨酸处理对细胞PURB蛋白和mRNA水平的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.2 蛋氨酸和亮氨酸处理对细胞PURB亚细胞定位的影响 | 第50-51页 |
| 3.4 PURB调节乳蛋白和乳脂肪合成的功能研究 | 第51-55页 |
| 3.4.1 PURB过表达和敲低对乳蛋白和乳脂肪合成的影响 | 第51-53页 |
| 3.4.2 PURB过表达和敲低对细胞乳合成相关信号途径的影响 | 第53-55页 |
| 3.5 PURB介导氨基酸调节乳合成的分子机理 | 第55-61页 |
| 3.5.1 PURB在牛乳腺上皮细胞的细胞定位 | 第55-56页 |
| 3.5.2 抑制PI3K对蛋氨酸和亮氨酸上调PURB表达的影响 | 第56-57页 |
| 3.5.3 抑制PURB对蛋氨酸和亮氨酸上调细胞乳合成相关信号途径的影响 | 第57-59页 |
| 3.5.4 ChIP-qPCR分析PURB与mTOR和SREBP-1c基因启动子的结合 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| 4.1 原代牛乳腺上皮细胞的培养、纯化和鉴定 | 第61页 |
| 4.2 氨基酸调节乳蛋白和乳脂肪合成的作用及其分子机理 | 第61-62页 |
| 4.3 PURB调节牛乳腺上皮细胞乳蛋白和乳脂肪合成的信号转导通路 | 第62-64页 |
| 4.3.1 PURB的结构与功能 | 第62页 |
| 4.3.2 PURB对乳蛋白和乳脂肪合成及相关信号通路的影响 | 第62-64页 |
| 4.4 氨基酸调节PURB表达的分子机制 | 第64页 |
| 4.5 展望 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |
