| 缩略语表 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| ABSTRACT | 第13-18页 |
| 前言 | 第19-21页 |
| 文献回顾 | 第21-35页 |
| 1.乳腺癌概况 | 第21-24页 |
| 2.肿瘤微环境 | 第24-30页 |
| 3.癌相关成纤维细胞与肿瘤微环境 | 第30-32页 |
| 4.CD147与肿瘤微环境 | 第32-35页 |
| 第一部分 癌相关成纤维细胞表型分子CD147的发现与鉴定 | 第35-53页 |
| 1 材料 | 第35-37页 |
| 1.1 乳腺癌样本 | 第35页 |
| 1.2 组织芯片 | 第35页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 1.4 主要试剂 | 第36-37页 |
| 1.5 缓冲液配制 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-41页 |
| 2.1 组织固定与石蜡包埋 | 第37页 |
| 2.2 石蜡切片免疫荧光染色 | 第37-39页 |
| 2.3 人原代癌相关成纤维细胞分离及培养 | 第39页 |
| 2.4 人原代癌相关成纤维细胞蛋白提取 | 第39-40页 |
| 2.5 质谱分析 | 第40页 |
| 2.6 蛋白免疫印迹反应(western blot) | 第40-41页 |
| 2.7 流式细胞术检测 | 第41页 |
| 2.8 统计方法 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-51页 |
| 3.1 乳腺癌中癌相关成纤维细胞分布检测 | 第41-42页 |
| 3.2 人原代成纤维细胞的分离培养与纯度鉴定 | 第42-43页 |
| 3.3 CAFs分子表型的质谱初筛 | 第43-44页 |
| 3.4 CD147作为CAFs表型分子的体外验证 | 第44-45页 |
| 3.5 CAFs中CD147分子与乳腺癌进展的相关性初探 | 第45-47页 |
| 3.6 CAFs中CD147分子表达与乳腺癌进展的相关性分析 | 第47-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 第二部分 成纤维细胞CD147影响乳腺癌进展的功能研究 | 第53-75页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| 1.1 细胞系 | 第53页 |
| 1.2 实验动物 | 第53页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第53页 |
| 1.4 主要试剂耗材 | 第53-54页 |
| 1.5 缓冲液配制 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-61页 |
| 2.1 小鼠的饲养、繁育 | 第54页 |
| 2.2 小鼠DNA提取 | 第54-55页 |
| 2.3 PCR | 第55-56页 |
| 2.4 DNA电泳 | 第56-57页 |
| 2.5 小鼠解剖 | 第57页 |
| 2.6 HE染色 | 第57-58页 |
| 2.7 小鼠乳腺原代成纤维细胞分离培养 | 第58页 |
| 2.8 细胞系体外培养 | 第58页 |
| 2.9 细胞免疫荧光染色 | 第58-59页 |
| 2.10 小鼠皮下瘤接种及瘤体测量 | 第59页 |
| 2.11 凋亡检测 | 第59-61页 |
| 2.12 统计学方法 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-72页 |
| 3.1 成纤维细胞特异性敲除CD147小鼠的构建及基因型鉴定 | 第61-62页 |
| 3.2 成纤维细胞特异性敲除CD147小鼠敲除效果检测 | 第62-64页 |
| 3.3 成纤维细胞特异性敲除CD147小鼠表型鉴定 | 第64-66页 |
| 3.4 成纤维细胞敲除CD147对小鼠乳腺癌成瘤及肿瘤生长的影响 | 第66-69页 |
| 3.5 敲除CD147分子对小鼠原代成纤维细胞活化的影响 | 第69-70页 |
| 3.6 成纤维细胞敲除CD147对肿瘤细胞增殖的影响 | 第70-71页 |
| 3.7 成纤维细胞敲除CD147皮下瘤组织凋亡情况检测 | 第71页 |
| 3.8 成纤维细胞敲除CD147皮下瘤组织新生血管情况检测 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| 第三部分 干预癌相关成纤维细胞CD147抑制乳腺癌进展的功能与机制研究· | 第75-92页 |
| 1 材料 | 第75-77页 |
| 1.1 细胞系 | 第75页 |
| 1.2 实验动物 | 第75页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第75页 |
| 1.4 主要试剂耗材 | 第75-76页 |
| 1.5 主要缓冲液配制 | 第76-77页 |
| 2 方法 | 第77-79页 |
| 2.1 小鼠皮下瘤接种及瘤体测量 | 第77页 |
| 2.2 质谱蛋白提取 | 第77页 |
| 2.3 Bradford蛋白定量 | 第77页 |
| 2.4 SDS-PAGE电泳检测蛋白质量 | 第77-78页 |
| 2.5 蛋白胰酶酶解及标记 | 第78页 |
| 2.6 高PH条件下的HPLC分级 | 第78页 |
| 2.7 质谱分析 | 第78页 |
| 2.8 WesternBlot阵列检测 | 第78-79页 |
| 2.9 统计学方法 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-89页 |
| 3.1 干预CAFs中CD147分子的表达对人乳腺癌细胞体内成瘤的影响 | 第79-82页 |
| 3.2 干涉CAFs中CD147分子对NOG小鼠肿瘤细胞增殖的影响 | 第82-83页 |
| 3.3 干涉CAFs中CD147分子对NOG小鼠肿瘤细胞凋亡的影响 | 第83页 |
| 3.4 干涉CAFs中CD147分子对NOG小鼠肿瘤组织新生血管生成的影响· | 第83-84页 |
| 3.5 NOG小鼠皮下瘤蛋白质谱分析 | 第84-87页 |
| 3.6 WesternBlot阵列检测 | 第87-89页 |
| 4 讨论 | 第89-92页 |
| 小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 个人简历和研究成果 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
