中文摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第1章 文献综述 | 第8-22页 |
1.1 PEDV的概述 | 第8-15页 |
1.1.1 PED的流行性 | 第8-9页 |
1.1.2 PEDV引起的黏膜免疫反应 | 第9-11页 |
1.1.3 PEDV的疫苗研究情况 | 第11-13页 |
1.1.4 PEDV的关键蛋白的选取 | 第13-15页 |
1.2 酵母表面展示技术的研究 | 第15-20页 |
1.2.1 酿酒酵母表面展示 | 第15-19页 |
1.2.2 酿酒酵母表达系统高效表达外源基因的策略 | 第19-20页 |
1.3 本课题的研究目的和意义 | 第20-22页 |
第2章 重组酿酒酵母的构建 | 第22-50页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-28页 |
2.2.1 实验菌株、质粒、仪器、试剂、引物 | 第22-26页 |
2.2.2 实验所用溶液及其配方 | 第26-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-41页 |
2.3.1 PEDV S1及包含COE的S1的截短序列的扩增 | 第28-34页 |
2.3.2 整合型重组酿酒酵母的构建及筛选 | 第34-38页 |
2.3.3 附加型重组酿酒酵母的构建及筛选 | 第38-40页 |
2.3.4 附加型酿酒酵母菌株中质粒稳定性的初步探索 | 第40-41页 |
2.4 实验结果 | 第41-48页 |
2.4.1 PEDV的结构分析 | 第41-44页 |
2.4.2 PEDV S1及COE基因的克隆 | 第44-45页 |
2.4.3 整合型酿酒酵母的筛选 | 第45-46页 |
2.4.4 附加型酿酒酵母的筛选 | 第46-48页 |
2.4.5 附加型酿酒酵母菌株中质粒稳定性 | 第48页 |
2.5 讨论 | 第48-49页 |
2.6 本章小结 | 第49-50页 |
第3章 PEDV S1截短体表面展示重组酿酒酵母的特性 | 第50-62页 |
3.1 引言 | 第50页 |
3.2 实验材料和方法 | 第50-54页 |
3.2.1 实验相关试剂 | 第50-51页 |
3.2.2 实验方法 | 第51-54页 |
3.3 实验结果 | 第54-59页 |
3.3.1 蛋白表达Western Blot结果 | 第54-55页 |
3.3.2 蛋白洗脱Western Blot结果 | 第55页 |
3.3.3 蛋白表达免疫荧光结果 | 第55-57页 |
3.3.4 蛋白表达流式结果 | 第57-58页 |
3.3.5 单菌落蛋白表达量的检测 | 第58-59页 |
3.4 讨论 | 第59-60页 |
3.5 本章小结 | 第60-62页 |
第4章 重组酿酒酵母免疫效力的初步评价 | 第62-68页 |
4.1 引言 | 第62页 |
4.2 实验材料和方法 | 第62-64页 |
4.2.1 实验所用材料和试剂 | 第62-63页 |
4.2.2 实验方法 | 第63-64页 |
4.3 实验结果 | 第64-66页 |
4.3.1 重组酵母对小鼠脾脏的影响 | 第64-65页 |
4.3.2 病毒中和实验 | 第65-66页 |
4.4 讨论 | 第66页 |
4.5 本章小结 | 第66-68页 |
第5章 结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录 | 第78-80页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第80-82页 |
致谢 | 第82页 |