| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 S-腺苷甲硫氨酸合酶研究进展 | 第13-17页 |
| 1.1 SAMs的结构特征及催化反应机制 | 第13-14页 |
| 1.2 SAMs的催化代谢机制 | 第14-15页 |
| 1.3 SAMs参与植物胁迫响应中的研究进展 | 第15-17页 |
| 2 植物启动子的研究进展 | 第17-25页 |
| 2.1 植物启动子结构与功能概述 | 第17-18页 |
| 2.2 植物启动子的分类及其特点 | 第18-20页 |
| 2.3 植物启动子的研究方法及功能检测 | 第20-25页 |
| 第二章 黄瓜CsSAMs基因表达及其启动子的克隆和序列分析 | 第25-41页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| 1.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 1.2 试验试剂及仪器 | 第27页 |
| 2 方法 | 第27-32页 |
| 2.1 黄瓜CsSAMs基因启动子的克隆 | 第27-32页 |
| 2.2 黄瓜叶片总RNA提取、cDNA合成以及qRT-PCR | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-38页 |
| 3.1 黄瓜基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.2 全长启动子片段的克隆 | 第33页 |
| 3.3 全长启动子片段的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| 3.4 黄瓜CsSAMs启动子序列的生物信息学分析 | 第34-36页 |
| 3.5 黄瓜叶片CsSAMs基因在不同逆境和激素处理下的表达模式分析 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 黄瓜CsSAMs启动子的功能分析 | 第41-57页 |
| 1 材料 | 第42-45页 |
| 1.1 试验材料 | 第42页 |
| 1.2 常用试验试剂及仪器 | 第42-43页 |
| 1.3 常用培养基及溶液制备 | 第43-45页 |
| 2 方法 | 第45-49页 |
| 2.1 不同片段长度CsSAMs启动子驱动GUS基因融合表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 2.2 农杆菌介导的烟草叶片转化 | 第46-47页 |
| 2.3 GUS基因表达的组织化学检测 | 第47页 |
| 2.4 GUS酶活定量检测 | 第47-48页 |
| 2.5 农杆菌介导的瞬时表达分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-54页 |
| 3.1 CsSAMs缺失启动子驱动GUS基因融合表达载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.2 转基因烟草的再生与PCR检测 | 第50-51页 |
| 3.3 黄瓜CsSAMs启动子GUS组织化学染色分析 | 第51-53页 |
| 3.4 黄瓜CsSAMs启动子GUS酶活分析 | 第53-54页 |
| 3.5 瞬时表达验证GT-1元件对盐胁迫的响应 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 第四章 黄瓜CsSAMs启动子与上游转录因子的互作验证 | 第57-75页 |
| 1 材料 | 第58-60页 |
| 1.1 实验材料 | 第58页 |
| 1.2 常用试验试剂及仪器 | 第58-59页 |
| 1.3 常用培养基及溶液配制 | 第59-60页 |
| 2 方法 | 第60-64页 |
| 2.1 生物信息学方法预测黄瓜中能与GT-1元件互作的Trihelix转录因子 | 第60页 |
| 2.2 黄瓜Trihelix候选转录因子基因qRT-PCT鉴定 | 第60-61页 |
| 2.3 CsGT-3b转录因子生物信息学分析 | 第61页 |
| 2.4 酵母单杂交系统验证CsGT-3b转录因子与CsSAMs启动子GT-1元件的互作 | 第61-63页 |
| 2.5 黄瓜CsGT-3b转录因子与CsSAMs蛋白的亚细胞定位 | 第63-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-73页 |
| 3.1 系统发育树分析拟南芥AtGT-3b转录因子与黄瓜Trihelix转录因子家族关系 | 第64-65页 |
| 3.2 黄瓜Trihelix候选转录因子基因在盐胁迫下表达模式分析 | 第65-66页 |
| 3.3 黄瓜CsGT-3b蛋白的生物信息学分析 | 第66-68页 |
| 3.4 酵母单杂交体系验证 | 第68-71页 |
| 3.5 黄瓜CsGT-3b转录因子与CsSAMs蛋白的亚细胞定位 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| 全文结论 | 第75-77页 |
| 附录 | 第77-81页 |
| 附表1 本研究所用引物总汇 | 第77-78页 |
| 附表2 MS培养基组分 | 第78页 |
| 附表3 10×SD培养基组分 | 第78-79页 |
| 附录4 | 第79-81页 |
| 附录4-1 pCAMBIA1303载体图谱 | 第79页 |
| 附录4-2 pEZS-NL载体图谱 | 第79-80页 |
| 附录4-3 酵母单杂交诱饵载体图谱 | 第80页 |
| 附录4-4 酵母单杂交文库载体图谱 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第91-93页 |
| 致谢 | 第93页 |
